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球孢白僵菌四个Septin基因的功能解析与无外源抗性标记表达杀虫蛋白Vip3Aal的工程菌构建

致谢第7-10页
摘要第10-12页
1 文献综述第12-17页
    1.1 Septin基因家族的研究现状第12-15页
        1.1.1 Septin蛋白的结构与功能第12-13页
        1.1.2 真菌Septin基因家族的研究第13-15页
    1.2 用于真菌遗传改良筛选标记基因的研究现状第15-16页
    1.3 展望第16-17页
2 球孢白僵菌Septin基因家族的功能解析第17-33页
    2.1 材料第17-18页
        2.1.1 菌株和载体第17-18页
        2.1.2 试剂及试剂盒第18页
    2.2 方法第18-24页
        2.2.1 真菌DNA提取第18-19页
        2.2.2 球孢白僵菌septin蛋白家族的鉴定与序列分析第19页
        2.2.3 Septin单基因敲除与回补株的构建第19-21页
        2.2.4 Septin基因转录水平分析第21页
        2.2.5 不同营养基质上的生长速率测定第21-22页
        2.2.6 产孢量及萌发速率的检测第22页
        2.2.7 孢子质量的检测第22页
        2.2.8 菌落生长抗逆力的测定第22-23页
        2.2.9 分生孢子抗逆力的测定第23页
        2.2.10 分生孢子毒力的生物测定第23页
        2.2.11 数据分析第23-24页
    2.3 结果第24-32页
        2.3.1 球孢白僵菌BspA-D的基本特征第24-25页
        2.3.2 单基因敲除对同伴基因转录表达的影响第25-26页
        2.3.3 bsp基因敲除对菌落生长、产孢、孢子萌发及芽管分隔的影响第26-29页
        2.3.4 bsp基因敲除对孢子大小、密度及表面结构的影响第29-30页
        2.3.5 bsp基因敲除对化学胁迫敏感性的影响第30-31页
        2.3.6 bsp基因敲除对生防潜能的影响第31-32页
    2.4 讨论第32-33页
3 利用球孢白僵菌内源安全标记表达昆虫胃毒蛋白的工程菌构建第33-40页
    3.1 材料第34页
        3.1.1 菌株和载体第34页
        3.1.2 试剂及试剂盒第34页
    3.2 方法第34-37页
        3.2.1 载体构建第34-35页
        3.2.2 ura3缺失株感受态芽生孢子的制备第35-36页
        3.2.3 质粒的芽生孢子转化第36页
        3.2.4 转化子的鉴定及转录水平筛选第36-37页
        3.2.5 转化子的酶联免疫吸附测定第37页
    3.3 结果与讨论第37-40页
        3.3.1 双元载体及转化子的PCR鉴定第37-38页
        3.3.2 被导入目标基因及其编码蛋白的表达达水平第38-40页
4 结语第40-41页
参考文献第41-47页
Summary第47-48页
附录:攻读硕士学位期间的主要成果第49页

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