| 符号说明 | 第4-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第15-31页 |
| 1.1 病毒粒子结构 | 第16页 |
| 1.2 流感病毒的敏感性 | 第16页 |
| 1.3 禽流感病毒的基因组结构 | 第16-20页 |
| 1.3.1 血凝素（Hemagglutinin，HA） | 第17-18页 |
| 1.3.2 神经氨酸酶（Neuraminidase，NA） | 第18-19页 |
| 1.3.3 聚合酶蛋白（PB1、PB2、PA） | 第19页 |
| 1.3.4 核蛋白（NP） | 第19-20页 |
| 1.3.5 基质蛋白 | 第20页 |
| 1.3.6 非结构蛋白(NS) | 第20页 |
| 1.4 禽流感病毒的变异 | 第20-22页 |
| 1.4.1 抗原漂移 | 第20-21页 |
| 1.4.2 抗原的转变 | 第21页 |
| 1.4.3 致病性的变异 | 第21-22页 |
| 1.5 禽流感病毒感染哺乳动物及人致病机制的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.6 天然免疫系统与病毒感染关系的研究进展 | 第23-30页 |
| 1.6.1 模式识别受体 | 第23-26页 |
| 1.6.1.1 Toll样受体 | 第23-24页 |
| 1.6.1.2 NOD样受体 | 第24-25页 |
| 1.6.1.3 RIG-I样受体(RLRs) | 第25页 |
| 1.6.1.4 C型外源凝集素受体 | 第25-26页 |
| 1.6.2 病毒与炎症反应的研究 | 第26-30页 |
| 1.6.2.1 相关免疫因子与流感病毒的致病作用 | 第26-28页 |
| 1.6.2.2 主要的免疫因子及其作用 | 第28-30页 |
| 1.7 研究目的和意义 | 第30-31页 |
| 2 材料方法 | 第31-44页 |
| 2.1 材料 | 第31-32页 |
| 2.1.1 病毒株 | 第31页 |
| 2.1.2 实验中所用鸡胚、细胞及抗体 | 第31页 |
| 2.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第31页 |
| 2.1.4 主要实验溶液的配置 | 第31-32页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第32页 |
| 2.2 方法 | 第32-44页 |
| 2.2.1 H9N2亚型AIV对哺乳动物的感染 | 第32-33页 |
| 2.2.2 AIV增殖与纯化 | 第33页 |
| 2.2.3 病毒TCID50的测定 | 第33-34页 |
| 2.2.3.1 MDCK细胞的准备 | 第33-34页 |
| 2.2.3.2 TCID50的检测 | 第34页 |
| 2.2.4 病毒在TC-1 细胞上复制能力的检测 | 第34-35页 |
| 2.2.4.1 增殖曲线的绘制 | 第34-35页 |
| 2.2.4.2 间接免疫荧光检测（IFA） | 第35页 |
| 2.2.5 模式识别受体荧光定量PCR方法的建立 | 第35-41页 |
| 2.2.5.1 引物的设计与合成 | 第35-36页 |
| 2.2.5.2 细胞RNA提取 | 第36-37页 |
| 2.2.5.3 c DNA的合成 | 第37页 |
| 2.2.5.4 目的基因的获取 | 第37-38页 |
| 2.2.5.5 DNA片段的纯化回收 | 第38页 |
| 2.2.5.6 目的片段的克隆及验证 | 第38-41页 |
| 2.2.6 荧光定量PCR检测TC-1 细胞模式识别受体及细胞因子和趋化因子表达量 | 第41-42页 |
| 2.2.7 ELISA检测模式识别受体及细胞因子和趋化因子 | 第42-44页 |
| 2.2.7.1 样品的准备 | 第42页 |
| 2.2.7.2 ELISA试剂盒对小鼠模式识别受体及细胞因子的检测 | 第42-44页 |
| 3 结果 | 第44-56页 |
| 3.1 5株H9N2亚型禽流感病毒TCID50的检测 | 第44页 |
| 3.2 5株H9N2亚型AIV在TC-1 细胞上增殖能力的检测结果 | 第44-46页 |
| 3.2.1 病毒增殖曲线 | 第44-45页 |
| 3.2.2 间接免疫荧光实验检测结果 | 第45-46页 |
| 3.3 荧光定量检测模式识别受体及细胞因子 | 第46-52页 |
| 3.3.1 模式识别受体荧光定量PCR引物的验证 | 第46-47页 |
| 3.3.2 荧光定量PCR检测模式识别受体方法的建立 | 第47页 |
| 3.3.3 荧光定量PCR的敏感性实验 | 第47页 |
| 3.3.4 荧光定量PCR的重复性实验 | 第47-48页 |
| 3.3.5 荧光定量检测模式识别受体 | 第48-49页 |
| 3.3.6 荧光定量检测细胞因子 | 第49-51页 |
| 3.3.7 荧光定量检测趋化因子 | 第51-52页 |
| 3.4 ELISA检测模式识别受体及细胞因子 | 第52-56页 |
| 3.4.1 ELISA检测模式识别受体 | 第52-53页 |
| 3.4.2 ELISA检测细胞因子 | 第53-54页 |
| 3.4.3 荧光定量检测趋化因子 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| 4.1 研究目的 | 第56页 |
| 4.2 材料和方法的选择 | 第56-57页 |
| 4.3 病毒敏感性的检测 | 第57页 |
| 4.4 模式识别受体和免疫因子的检测 | 第57-59页 |
| 4.4.1 模式识别受体的表达 | 第57-58页 |
| 4.4.2 细胞因子的表达 | 第58页 |
| 4.4.3 趋化因子的表达 | 第58-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第71页 |
