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生防木霉(Trichoderma guizhouense NJAU 4742)重寄生分子机理研究Ⅰ中性金属肽酶NMP1和活性氧的功能分析

摘要第9-12页
ABSTRACT第12-15页
缩略语及专有词汇检索表第16-18页
第一章 文献综述第18-34页
    1 土传病害真菌及防控第18-21页
        1.1 土传病害真菌的种类与表现第18-20页
        1.2 土传病害的成因第20页
        1.3 土传病害防治第20-21页
    2 生防木霉国内外研究概况第21-25页
        2.1 生防木霉菌的生物学特征和应用现状第21-22页
        2.2 生防木霉菌防治病害机制第22-24页
        2.3 生防木霉促生机制研究现状第24页
        2.4 真菌蛋白酶的研究进展和功能第24-25页
    3 丝状真菌的研究方法第25-31页
        3.1 正向遗传学方法第26-27页
        3.2 反向遗传学方法第27-29页
        3.3 基因打靶第29-31页
    4 研究目的、意义及技术路线第31-34页
        4.1 研究的目的和意义第31-32页
        4.2 研究技术路线图第32-34页
第二章 Trichoderma guizhouense NJAU 4742鉴定与重寄生特征分析第34-54页
    1 材料与方法第34-41页
        1.1 材料第34-36页
        1.2 方法第36-41页
    2 结果与分析第41-50页
        2.1 筛选和纯化强寄生能力的木霉第41-42页
        2.2 染色分析NJAU 4742和Foc4的菌丝完整性第42-43页
        2.3 NJAU 4742挥发性气体抑制Foc4菌丝生长第43页
        2.4 NJAU 4742挥发性气体成分与抑菌效果第43-44页
        2.5 Foc4菌丝体诱导NJAU 4742分泌胞外水解酶第44-45页
        2.6 实时荧光定量PCR分析chil8-5、nag1和gluc78表达第45-46页
        2.7 贝叶斯进化分析NJAU 4742第46-48页
        2.8 比较NJAU 4742和CBS重寄生及代谢特征第48-50页
        2.9 光敏感性分析第50页
    3 讨论第50-52页
    4 小结第52-54页
第三章 Trichoderma guizhouense NJAU 4742荧光蛋白标记及其定殖研究第54-72页
    1 材料与方法第54-60页
        1.1 材料第54-56页
        1.2 方法第56-60页
    2 结果与分析第60-68页
        2.1 分析NAJU4742对潮霉素敏感性第60-61页
        2.2 根癌农杆菌介导的NJAU 4742遗传转化体系的建立与优化第61-62页
        2.3 转化子的PCR和荧光检测第62-63页
        2.4 AMT体系在其他真菌中的推广应用第63-64页
        2.5 标记菌株NJAU 4741遗传稳定性、重寄生和Biolog分析第64-66页
        2.6 标记菌株NJAU4741在土壤和肥料中的定殖研究第66-67页
        2.7 标记菌株NJAU4741对土壤酶活的影响第67页
        2.8 标记菌株NJAU 4741定殖植物根际与促生研究第67-68页
    3 讨论第68-70页
    4 小结第70-72页
第四章 Trichoderma guizhouense NJAU 4742重寄生突变菌株的筛选和分析第72-96页
    1 材料与方法第72-84页
        1.1 材料第72-74页
        1.2 方法第74-84页
    2 结果与分析第84-92页
        2.1 比较野生型NJAU 4742和突变子NJAU 4743对镰刀菌的拮抗能力第84-85页
        2.2 突变子NJAU 4743丧失强拮抗多种植物病原真菌的活性第85-86页
        2.3 野生型NJAU 4742和突变子NJAU 4743菌丝代谢谱的比较第86页
        2.4 NJAU 4742和突变子NJAU 4743水溶性代谢产物的抑菌效果第86-87页
        2.5 T-DNA插入位点侧翼序列的克隆与分析第87-89页
        2.6 反转录PCR确定T-DNA插入位点的沉默基因第89-90页
        2.7 反向遗传学回补突变菌株第90-91页
        2.8 验证回复突变子NJAU 5307和NJAU 5308拮抗活性第91-92页
        2.9 测定NJAU 4742不同生长阶段的nmp1表达第92页
    3 讨论第92-93页
    4 小结第93-96页
第五章 Trichoderma guizhouense NJAU 4742中性金属肽酶NMP1异源表达与功能分析第96-116页
    1 材料与方法第96-103页
        1.1 材料第96-97页
        1.2 方法第97-103页
    2 结果与分析第103-112页
        2.1 NMP1序列比对分析第103-104页
        2.2 蛋白预测与结构分析第104-106页
        2.3 NMP1进化分析第106-108页
        2.4 基因nmp1酵母表达载体构建及转化第108-109页
        2.5 Western Blot分析酵母转化子发酵液第109页
        2.6 NMP1蛋白纯化与测序第109-110页
        2.7 粗酶液酶活第110-111页
        2.8 NMP1对病原真菌的拮抗能力测定与分析第111-112页
        2.9 测定对峙多种病原真菌中基因nmp1表达第112页
    3 讨论第112-114页
    4 小结第114-116页
第六章 功能性分析活性氧在Trichoderma guizhouense NJAU 4742重寄生过程的作用第116-138页
    1 材料与方法第116-122页
        1.1 材料第116-117页
        1.2 方法第117-122页
    2 结果与分析第122-134页
        2.1 分析菌丝表面黄色分泌物第122-123页
        2.2 间接分析对峙平板不同位置菌丝分泌的酶活和H_2O_2第123-124页
        2.3 原位检测NJAU 4742对峙Foc4的平板上H_2O_2和O_2·~-第124-125页
        2.4 分析正丁醇提取液、粗酶液和H_2O_2对Foc4菌丝影响第125页
        2.5 植物病原真菌和NJAU 4742菌丝对H_2O_2敏感分析第125-127页
        2.6 NJAU 4742活性氧相关基因显著上调第127-128页
        2.7 基因nox1敲除第128-129页
        2.8 NJAU 4742和△nox1突变子的菌丝形态差异第129-130页
        2.9 △nox1基因互补子及突变株的筛选及验证第130-131页
        2.10 过量表达nox1质粒转化与突变株的筛选第131-133页
        2.11 比较过量表达突变子和△nox1的重寄生能力第133-134页
    3 讨论第134-136页
    4 小结第136-138页
参考文献第138-150页
全文结论及展望第150-152页
    一、全文结论第150-151页
    二、展望第151-152页
创新点第152-154页
附录第154-158页
博士期间已(待)发表的论文第158-160页
会议摘要第160-162页
致谢第162-163页

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