摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
缩略语及专有词汇检索表 | 第16-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-34页 |
1 土传病害真菌及防控 | 第18-21页 |
1.1 土传病害真菌的种类与表现 | 第18-20页 |
1.2 土传病害的成因 | 第20页 |
1.3 土传病害防治 | 第20-21页 |
2 生防木霉国内外研究概况 | 第21-25页 |
2.1 生防木霉菌的生物学特征和应用现状 | 第21-22页 |
2.2 生防木霉菌防治病害机制 | 第22-24页 |
2.3 生防木霉促生机制研究现状 | 第24页 |
2.4 真菌蛋白酶的研究进展和功能 | 第24-25页 |
3 丝状真菌的研究方法 | 第25-31页 |
3.1 正向遗传学方法 | 第26-27页 |
3.2 反向遗传学方法 | 第27-29页 |
3.3 基因打靶 | 第29-31页 |
4 研究目的、意义及技术路线 | 第31-34页 |
4.1 研究的目的和意义 | 第31-32页 |
4.2 研究技术路线图 | 第32-34页 |
第二章 Trichoderma guizhouense NJAU 4742鉴定与重寄生特征分析 | 第34-54页 |
1 材料与方法 | 第34-41页 |
1.1 材料 | 第34-36页 |
1.2 方法 | 第36-41页 |
2 结果与分析 | 第41-50页 |
2.1 筛选和纯化强寄生能力的木霉 | 第41-42页 |
2.2 染色分析NJAU 4742和Foc4的菌丝完整性 | 第42-43页 |
2.3 NJAU 4742挥发性气体抑制Foc4菌丝生长 | 第43页 |
2.4 NJAU 4742挥发性气体成分与抑菌效果 | 第43-44页 |
2.5 Foc4菌丝体诱导NJAU 4742分泌胞外水解酶 | 第44-45页 |
2.6 实时荧光定量PCR分析chil8-5、nag1和gluc78表达 | 第45-46页 |
2.7 贝叶斯进化分析NJAU 4742 | 第46-48页 |
2.8 比较NJAU 4742和CBS重寄生及代谢特征 | 第48-50页 |
2.9 光敏感性分析 | 第50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
4 小结 | 第52-54页 |
第三章 Trichoderma guizhouense NJAU 4742荧光蛋白标记及其定殖研究 | 第54-72页 |
1 材料与方法 | 第54-60页 |
1.1 材料 | 第54-56页 |
1.2 方法 | 第56-60页 |
2 结果与分析 | 第60-68页 |
2.1 分析NAJU4742对潮霉素敏感性 | 第60-61页 |
2.2 根癌农杆菌介导的NJAU 4742遗传转化体系的建立与优化 | 第61-62页 |
2.3 转化子的PCR和荧光检测 | 第62-63页 |
2.4 AMT体系在其他真菌中的推广应用 | 第63-64页 |
2.5 标记菌株NJAU 4741遗传稳定性、重寄生和Biolog分析 | 第64-66页 |
2.6 标记菌株NJAU4741在土壤和肥料中的定殖研究 | 第66-67页 |
2.7 标记菌株NJAU4741对土壤酶活的影响 | 第67页 |
2.8 标记菌株NJAU 4741定殖植物根际与促生研究 | 第67-68页 |
3 讨论 | 第68-70页 |
4 小结 | 第70-72页 |
第四章 Trichoderma guizhouense NJAU 4742重寄生突变菌株的筛选和分析 | 第72-96页 |
1 材料与方法 | 第72-84页 |
1.1 材料 | 第72-74页 |
1.2 方法 | 第74-84页 |
2 结果与分析 | 第84-92页 |
2.1 比较野生型NJAU 4742和突变子NJAU 4743对镰刀菌的拮抗能力 | 第84-85页 |
2.2 突变子NJAU 4743丧失强拮抗多种植物病原真菌的活性 | 第85-86页 |
2.3 野生型NJAU 4742和突变子NJAU 4743菌丝代谢谱的比较 | 第86页 |
2.4 NJAU 4742和突变子NJAU 4743水溶性代谢产物的抑菌效果 | 第86-87页 |
2.5 T-DNA插入位点侧翼序列的克隆与分析 | 第87-89页 |
2.6 反转录PCR确定T-DNA插入位点的沉默基因 | 第89-90页 |
2.7 反向遗传学回补突变菌株 | 第90-91页 |
2.8 验证回复突变子NJAU 5307和NJAU 5308拮抗活性 | 第91-92页 |
2.9 测定NJAU 4742不同生长阶段的nmp1表达 | 第92页 |
3 讨论 | 第92-93页 |
4 小结 | 第93-96页 |
第五章 Trichoderma guizhouense NJAU 4742中性金属肽酶NMP1异源表达与功能分析 | 第96-116页 |
1 材料与方法 | 第96-103页 |
1.1 材料 | 第96-97页 |
1.2 方法 | 第97-103页 |
2 结果与分析 | 第103-112页 |
2.1 NMP1序列比对分析 | 第103-104页 |
2.2 蛋白预测与结构分析 | 第104-106页 |
2.3 NMP1进化分析 | 第106-108页 |
2.4 基因nmp1酵母表达载体构建及转化 | 第108-109页 |
2.5 Western Blot分析酵母转化子发酵液 | 第109页 |
2.6 NMP1蛋白纯化与测序 | 第109-110页 |
2.7 粗酶液酶活 | 第110-111页 |
2.8 NMP1对病原真菌的拮抗能力测定与分析 | 第111-112页 |
2.9 测定对峙多种病原真菌中基因nmp1表达 | 第112页 |
3 讨论 | 第112-114页 |
4 小结 | 第114-116页 |
第六章 功能性分析活性氧在Trichoderma guizhouense NJAU 4742重寄生过程的作用 | 第116-138页 |
1 材料与方法 | 第116-122页 |
1.1 材料 | 第116-117页 |
1.2 方法 | 第117-122页 |
2 结果与分析 | 第122-134页 |
2.1 分析菌丝表面黄色分泌物 | 第122-123页 |
2.2 间接分析对峙平板不同位置菌丝分泌的酶活和H_2O_2 | 第123-124页 |
2.3 原位检测NJAU 4742对峙Foc4的平板上H_2O_2和O_2·~- | 第124-125页 |
2.4 分析正丁醇提取液、粗酶液和H_2O_2对Foc4菌丝影响 | 第125页 |
2.5 植物病原真菌和NJAU 4742菌丝对H_2O_2敏感分析 | 第125-127页 |
2.6 NJAU 4742活性氧相关基因显著上调 | 第127-128页 |
2.7 基因nox1敲除 | 第128-129页 |
2.8 NJAU 4742和△nox1突变子的菌丝形态差异 | 第129-130页 |
2.9 △nox1基因互补子及突变株的筛选及验证 | 第130-131页 |
2.10 过量表达nox1质粒转化与突变株的筛选 | 第131-133页 |
2.11 比较过量表达突变子和△nox1的重寄生能力 | 第133-134页 |
3 讨论 | 第134-136页 |
4 小结 | 第136-138页 |
参考文献 | 第138-150页 |
全文结论及展望 | 第150-152页 |
一、全文结论 | 第150-151页 |
二、展望 | 第151-152页 |
创新点 | 第152-154页 |
附录 | 第154-158页 |
博士期间已(待)发表的论文 | 第158-160页 |
会议摘要 | 第160-162页 |
致谢 | 第162-163页 |