| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-26页 |
| 1 洋常春藤的应用 | 第13-16页 |
| 1.1 绿化应用 | 第14页 |
| 1.2 医药应用 | 第14-16页 |
| 1.2.1 传统中医应用 | 第14-15页 |
| 1.2.2 现代医药应用 | 第15-16页 |
| 2 洋常春藤药用活性成分 | 第16-20页 |
| 2.1 皂苷类化合物简介 | 第16页 |
| 2.2 三萜皂苷类化合物的生物合成途径 | 第16-17页 |
| 2.3 生物合成途径的关键酶基因 | 第17-20页 |
| 2.3.1 FPS(法尼基焦磷酸合成酶) | 第18页 |
| 2.3.2 SS(鲨烯合成酶) | 第18页 |
| 2.3.3 SE(鲨烯环氧酶) | 第18-19页 |
| 2.3.4 CYP450(植物细胞色素单加氧酶) | 第19页 |
| 2.3.5 GT(糖基转移酶) | 第19-20页 |
| 2.4 洋常春藤皂苷类活性成分的研究进展 | 第20页 |
| 3 温度与水分对皂苷类化合物含量的影响 | 第20-21页 |
| 3.1 温度对皂苷类化合物含量的影响 | 第21页 |
| 3.2 水分对皂苷类化合物含量的影响 | 第21页 |
| 4 FPS基因同源克隆及表达的研究进展 | 第21-24页 |
| 4.1 同源性序列克隆技术 | 第21-22页 |
| 4.2 FPS基因同源克隆研究进展 | 第22-24页 |
| 4.3 FPS基因表达对皂苷含量的影响 | 第24页 |
| 5 研究目的与意义 | 第24-26页 |
| 第二章 水分和温度水平对洋常春藤皂苷类含量的影响 | 第26-35页 |
| 1 材料与方法 | 第26-28页 |
| 1.1 试验材料 | 第26页 |
| 1.2 仪器与试剂 | 第26-27页 |
| 1.3 不同水分水平试验设计 | 第27页 |
| 1.4 不同温度水平试验设计 | 第27-28页 |
| 1.5 皂苷类成分含量检测 | 第28页 |
| 1.5.1 供试品溶液的制备工艺 | 第28页 |
| 1.5.2 HPLC色谱检测条件 | 第28页 |
| 1.5.3 皂苷含量测定的方法 | 第28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-33页 |
| 2.1 洋常春藤皂苷类成分HPLC图谱分析 | 第28-29页 |
| 2.2 不同水分水平下洋常春藤皂苷类成分含量的研究 | 第29-31页 |
| 2.2.1 不同水分水平对洋常春藤叶片中皂苷类含量的影响 | 第29-30页 |
| 2.2.2 不同水分水平对洋常春藤茎中皂苷类含量的影响 | 第30-31页 |
| 2.3 不同温度水平下洋常春藤皂苷类成分含量的研究 | 第31-33页 |
| 2.3.1 不同温度水平对洋常春藤叶片中皂苷类含量的影响 | 第31-32页 |
| 2.3.2 不同温度水平对洋常春藤茎中皂苷类含量的影响 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| 4 小结 | 第34-35页 |
| 第三章 洋常春藤法呢基焦磷酸合酶基因的克隆与序列分析 | 第35-50页 |
| 1 材料与方法 | 第35-42页 |
| 1.1 试验材料 | 第35页 |
| 1.2 仪器与试剂 | 第35-36页 |
| 1.2.1 试验仪器 | 第35-36页 |
| 1.2.2 试验试剂 | 第36页 |
| 1.3 洋常春藤FPS基因的克隆 | 第36-42页 |
| 1.3.1 总RNA的提取 | 第36-37页 |
| 1.3.2 cDNA单链合成 | 第37-38页 |
| 1.3.3 引物合成与RT-PCR扩增 | 第38-39页 |
| 1.3.4 胶回收 | 第39-40页 |
| 1.3.5 T-A克隆与转化 | 第40页 |
| 1.3.6 重组质粒的鉴定和测序 | 第40-41页 |
| 1.3.7 序列分析方法 | 第41-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-48页 |
| 2.1 洋常春藤总RNA提取与FPS基因扩增结果 | 第42-43页 |
| 2.2 洋常春藤FPS基因的cDNA克隆 | 第43页 |
| 2.3 洋常春藤FPS基因cDNA序列的同源性分析 | 第43-46页 |
| 2.4 洋常春藤FPS蛋白的系统进化分析结果 | 第46-47页 |
| 2.5 洋常春藤FPS蛋白的预测分析 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-49页 |
| 4 小结 | 第49-50页 |
| 第四章 洋常春藤FPS基因的表达分析 | 第50-59页 |
| 1 材料与方法 | 第50-55页 |
| 1.1 试验材料 | 第50页 |
| 1.2 仪器与试剂 | 第50-51页 |
| 1.2.1 试验仪器 | 第51页 |
| 1.2.2 试验试剂 | 第51页 |
| 1.3 定量模版制备 | 第51-53页 |
| 1.3.1 洋常春藤各器官材料总RNA的提取 | 第51-52页 |
| 1.3.2 总RNA检测 | 第52页 |
| 1.3.3 cDNA单链合成 | 第52-53页 |
| 1.4 洋常春藤FPS基因PCR检测 | 第53-54页 |
| 1.4.1 洋常春藤FPS基因编码区内特异引物设计 | 第53页 |
| 1.4.2 洋常春藤FPS基因PCR扩增 | 第53-54页 |
| 1.4.4 电泳鉴定 | 第54页 |
| 1.5 洋常春藤FPS基因实时荧光定量RT-PCR检测 | 第54-55页 |
| 1.5.1 洋常春藤FPS基因编码区内特异引物设计 | 第54页 |
| 1.5.2 洋常春藤FPS基因编码区内特异引物设计 | 第54页 |
| 1.5.3 实时荧光定量RT-PCR检测 | 第54-55页 |
| 1.5.4 表达量计算 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-57页 |
| 2.1 RNA提取质量检测结果 | 第55-56页 |
| 2.2 洋常春藤FPS基因PCR扩增结果 | 第56页 |
| 2.3 洋常春藤RT-qPCR数据分析 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| 4 小结 | 第58-59页 |
| 全文结论 | 第59-60页 |
| 创新点及展望 | 第60-61页 |
| 1 创新点 | 第60页 |
| 2 展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 作者简介 | 第69页 |
