中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
缩略词 | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-42页 |
1.1 拟南芥根尖于细胞微环境的结构 | 第16-17页 |
1.2 维持根尖干细胞微环境的调控机制 | 第17-27页 |
1.2.1 SCR/SHR调控途径 | 第17-19页 |
1.2.2 PLT调控途径 | 第19-21页 |
1.2.3 WOX5调控途径 | 第21-23页 |
1.2.4 激素调控途径 | 第23-26页 |
1.2.5 表观遗传调控途径 | 第26-27页 |
1.3 ROS信号通路 | 第27-34页 |
1.3.1 ROS的产生 | 第27-28页 |
1.3.2 ROS的清除 | 第28-29页 |
1.3.3 ROS信号的传递 | 第29-30页 |
1.3.4 ROS对根生长发育的调控 | 第30-34页 |
1.4 AAA类ATP水解酶 | 第34-40页 |
1.4.1 AAA类ATP酶的结构 | 第34-35页 |
1.4.2 AAA类ATP酶的功能分类 | 第35-36页 |
1.4.3 AAA类ATP酶参与调控植物生长发育 | 第36-39页 |
1.4.4 AAA类ATP酶与ROS | 第39-40页 |
1.5 研究目的和意义 | 第40-42页 |
第二章 材料与方法 | 第42-66页 |
2.1 实验材料 | 第42-43页 |
2.1.1 植物材料 | 第42页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第42页 |
2.1.3 实验试剂 | 第42-43页 |
2.1.4 实验仪器 | 第43页 |
2.2 实验方法 | 第43-66页 |
2.2.1 植物培养 | 第43-44页 |
2.2.2 培养基及溶液配制 | 第44-45页 |
2.2.3 植物基因组DNA的提取 | 第45页 |
2.2.4 Tail-PCR鉴定 | 第45-46页 |
2.2.5 T-DNA突变体PCR鉴定 | 第46-47页 |
2.2.6 基因克隆与载体构建 | 第47-49页 |
2.2.7 质粒提取(TIANGEN) | 第49-50页 |
2.2.8 大肠杆菌转化 | 第50页 |
2.2.9 农杆菌转化 | 第50-51页 |
2.2.10 农杆菌介导的植物转化 | 第51页 |
2.2.11 植物RNA提取(QIAGEN) | 第51页 |
2.2.12 RNA反转录 | 第51-52页 |
2.2.13 Real-time PCR | 第52页 |
2.2.14 Lugol染色 | 第52-53页 |
2.2.15 EdU染色 | 第53页 |
2.2.16 GUS染色 | 第53页 |
2.2.17 亚细胞定位 | 第53-54页 |
2.2.18 蛋白的体外表达及纯化 | 第54-55页 |
2.2.19 BCA法测定蛋白浓度 | 第55页 |
2.2.20 ATP水解酶活性测定 | 第55-57页 |
2.2.21 线粒体复合体Ⅰ活性测定 | 第57-58页 |
2.2.22 ROS水平检测 | 第58-60页 |
2.2.23 植物总蛋白的提取 | 第60页 |
2.2.24 Bradford法测定蛋白浓度 | 第60页 |
2.2.25 SDS-PAGE电泳 | 第60-61页 |
2.2.26 Western blot | 第61-62页 |
2.2.27 实验所用引物 | 第62-66页 |
第三章 结果与分析 | 第66-96页 |
3.1 app1突变体静止中心和根尖远端干细胞的维持发生缺陷 | 第66-70页 |
3.2 app1突变体无明显根长表型 | 第70-71页 |
3.3 APP1主要在根尖表达且蛋白定位于线粒体 | 第71-72页 |
3.4 APP1具有ATP酶水解活性 | 第72-75页 |
3.5 app1突变体中ROS水平降低 | 第75-78页 |
3.6 app1中QC分裂和DSC分化的加快是由ROS水平降低引起的 | 第78-81页 |
3.7 ROS的稳态对于干细胞微环境的维持具有重要调控作用 | 第81-83页 |
3.8 过表达APP1对主根生长无明显影响 | 第83-84页 |
3.9 SCR和SHR在app1突变体中表达下调 | 第84-86页 |
3.10 APP1对根尖干细胞的调控不依赖PLT1和PLT2 | 第86-88页 |
3.11 APP1对细胞周期基因的表达无影响 | 第88-89页 |
3.12 APP1对根尖干细胞的调控不依赖于生长素信号通路 | 第89-90页 |
3.13 APP1与UPB1对根生长发育的调控是相互独立的 | 第90-91页 |
3.14 ROS参与调控维持根尖干细胞微环境的转录因子的表达 | 第91-93页 |
3.15 ROS水平对于根尖干细胞微环境的调控机制 | 第93-96页 |
第四章 讨论与分析 | 第96-100页 |
4.1 APP1对于依赖于ROS稳态的根尖干细胞微环境的维持具有重要作用 | 第96页 |
4.2 ROS的最适浓度对于根尖干细胞微环境的维持具有重要作用 | 第96-97页 |
4.3 APP1对于根尖干细胞微环境的维持不是通过影响根尖生长素信号实现的 | 第97-98页 |
4.4 SCR和SHR参与APP1对于根尖干细胞微环境的维持 | 第98-100页 |
总结 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-118页 |
致谢 | 第118-120页 |
已发表文章 | 第120页 |