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拟南芥核苷三磷酸水解酶APP1通过影响ROS的稳态参与根尖干细胞微环境的维持

中文摘要第8-11页
ABSTRACT第11-13页
缩略词第14-16页
第一章 文献综述第16-42页
    1.1 拟南芥根尖于细胞微环境的结构第16-17页
    1.2 维持根尖干细胞微环境的调控机制第17-27页
        1.2.1 SCR/SHR调控途径第17-19页
        1.2.2 PLT调控途径第19-21页
        1.2.3 WOX5调控途径第21-23页
        1.2.4 激素调控途径第23-26页
        1.2.5 表观遗传调控途径第26-27页
    1.3 ROS信号通路第27-34页
        1.3.1 ROS的产生第27-28页
        1.3.2 ROS的清除第28-29页
        1.3.3 ROS信号的传递第29-30页
        1.3.4 ROS对根生长发育的调控第30-34页
    1.4 AAA类ATP水解酶第34-40页
        1.4.1 AAA类ATP酶的结构第34-35页
        1.4.2 AAA类ATP酶的功能分类第35-36页
        1.4.3 AAA类ATP酶参与调控植物生长发育第36-39页
        1.4.4 AAA类ATP酶与ROS第39-40页
    1.5 研究目的和意义第40-42页
第二章 材料与方法第42-66页
    2.1 实验材料第42-43页
        2.1.1 植物材料第42页
        2.1.2 菌株和载体第42页
        2.1.3 实验试剂第42-43页
        2.1.4 实验仪器第43页
    2.2 实验方法第43-66页
        2.2.1 植物培养第43-44页
        2.2.2 培养基及溶液配制第44-45页
        2.2.3 植物基因组DNA的提取第45页
        2.2.4 Tail-PCR鉴定第45-46页
        2.2.5 T-DNA突变体PCR鉴定第46-47页
        2.2.6 基因克隆与载体构建第47-49页
        2.2.7 质粒提取(TIANGEN)第49-50页
        2.2.8 大肠杆菌转化第50页
        2.2.9 农杆菌转化第50-51页
        2.2.10 农杆菌介导的植物转化第51页
        2.2.11 植物RNA提取(QIAGEN)第51页
        2.2.12 RNA反转录第51-52页
        2.2.13 Real-time PCR第52页
        2.2.14 Lugol染色第52-53页
        2.2.15 EdU染色第53页
        2.2.16 GUS染色第53页
        2.2.17 亚细胞定位第53-54页
        2.2.18 蛋白的体外表达及纯化第54-55页
        2.2.19 BCA法测定蛋白浓度第55页
        2.2.20 ATP水解酶活性测定第55-57页
        2.2.21 线粒体复合体Ⅰ活性测定第57-58页
        2.2.22 ROS水平检测第58-60页
        2.2.23 植物总蛋白的提取第60页
        2.2.24 Bradford法测定蛋白浓度第60页
        2.2.25 SDS-PAGE电泳第60-61页
        2.2.26 Western blot第61-62页
        2.2.27 实验所用引物第62-66页
第三章 结果与分析第66-96页
    3.1 app1突变体静止中心和根尖远端干细胞的维持发生缺陷第66-70页
    3.2 app1突变体无明显根长表型第70-71页
    3.3 APP1主要在根尖表达且蛋白定位于线粒体第71-72页
    3.4 APP1具有ATP酶水解活性第72-75页
    3.5 app1突变体中ROS水平降低第75-78页
    3.6 app1中QC分裂和DSC分化的加快是由ROS水平降低引起的第78-81页
    3.7 ROS的稳态对于干细胞微环境的维持具有重要调控作用第81-83页
    3.8 过表达APP1对主根生长无明显影响第83-84页
    3.9 SCR和SHR在app1突变体中表达下调第84-86页
    3.10 APP1对根尖干细胞的调控不依赖PLT1和PLT2第86-88页
    3.11 APP1对细胞周期基因的表达无影响第88-89页
    3.12 APP1对根尖干细胞的调控不依赖于生长素信号通路第89-90页
    3.13 APP1与UPB1对根生长发育的调控是相互独立的第90-91页
    3.14 ROS参与调控维持根尖干细胞微环境的转录因子的表达第91-93页
    3.15 ROS水平对于根尖干细胞微环境的调控机制第93-96页
第四章 讨论与分析第96-100页
    4.1 APP1对于依赖于ROS稳态的根尖干细胞微环境的维持具有重要作用第96页
    4.2 ROS的最适浓度对于根尖干细胞微环境的维持具有重要作用第96-97页
    4.3 APP1对于根尖干细胞微环境的维持不是通过影响根尖生长素信号实现的第97-98页
    4.4 SCR和SHR参与APP1对于根尖干细胞微环境的维持第98-100页
总结第100-102页
参考文献第102-118页
致谢第118-120页
已发表文章第120页

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