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石斛多糖干预大鼠骨髓间充质干细胞成脂及成骨分化的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-16页
符号说明第16-17页
第一章 前言第17-32页
   ·引言第17页
   ·石斛第17-22页
     ·药用石斛概况第17-19页
       ·铁皮石斛第18页
       ·铜皮石斛第18-19页
       ·霍山石斛第19页
       ·金钗石斛第19页
       ·马鞭石斛第19页
     ·石斛主要化学成分第19-22页
   ·石斛多糖第22-26页
     ·石斛多糖的提取第22-23页
     ·石斛多糖的分离纯化及结构分析第23-24页
     ·石斛多糖的药理作用第24-26页
       ·免疫调节第24页
       ·抗肿瘤第24-25页
       ·抗氧化第25页
       ·抗菌第25-26页
       ·降血糖第26页
   ·骨髓间充质干细胞(BMSCs)简介第26-30页
     ·BMSCs概况第26-27页
     ·BMSCs的生物学特性第27-28页
     ·BMSCs的分离纯化第28-29页
     ·BMSCs的成脂及成骨分化第29-30页
     ·BMSCs与骨质疏松症的关系第30页
   ·本课题研究的目的和主要内容第30-32页
第二章 石斛多糖的提取第32-42页
   ·引言第32页
   ·仪器与材料第32-33页
     ·实验仪器第32页
     ·实验材料第32-33页
   ·方法与操作第33-37页
     ·石斛多糖的提取和得率测定第33-34页
       ·石斛多糖的提取第33页
       ·石斛多糖得率的测定第33-34页
     ·浓硫酸-苯酚比色法测定石斛多糖含量第34-35页
       ·主要溶液的制备第34页
       ·葡萄糖标准曲线的绘制第34-35页
       ·铁皮石斛、铜皮石斛多糖含量的测定第35页
     ·考马斯亮蓝G-250法测定石斛多糖中蛋白含量第35-36页
       ·主要溶液的制备第35页
       ·铁皮石斛、铜皮石斛多糖中蛋白含量测定第35-36页
     ·Sevage法纯化石斛多糖第36-37页
       ·主要溶液的制备第36页
       ·Sevage法脱蛋白第36-37页
   ·结果与讨论第37-41页
     ·铁皮石斛、铜皮石斛多糖的得率测定第37页
     ·石斛多糖的含量测定第37-39页
       ·葡萄糖标准曲线第37-38页
       ·铁皮石斛、铜皮石斛多糖含量第38-39页
     ·石斛多糖中蛋白含量的测定第39-40页
       ·蛋白标准曲线第39页
       ·铁皮石斛、铜皮石斛多糖中蛋白含量第39-40页
     ·Sevage法纯化后石斛多糖中蛋白含量测定第40-41页
   ·本章小结第41-42页
第三章 BMSCs的分离、鉴定及石斛多糖对其生存率的影响第42-55页
   ·引言第42页
   ·仪器与材料第42-44页
     ·实验仪器第42-43页
     ·实验材料第43-44页
   ·方法与操作第44-49页
     ·BMSCs的分离、培养及鉴定第44-47页
       ·主要溶液的制备第44页
       ·BMSCs的分离第44-45页
       ·BMSCs的原代培养第45页
       ·BMSCs的的传代培养第45页
       ·BMSCs的冻存第45-46页
       ·BMSCs的复苏第46页
       ·BMSCs的形态学观察第46页
       ·BMSCs的表面抗原鉴定第46-47页
     ·BMSCs的细胞活力及生长曲线的测定第47-48页
       ·主要溶液的制备第47页
       ·BMSCs的细胞活力第47-48页
       ·BMSCs的生长曲线第48页
     ·石斛多糖对BMSCs生存率的影响测定第48-49页
   ·结果与讨论第49-53页
     ·BMSCs的分离、培养及形态学观察第49-50页
     ·BMSCs的表面抗原鉴定第50-51页
     ·BMSCs的细胞活力测定第51页
     ·BMSCs的生长曲线测定第51-52页
     ·石斛多糖对BMSCs生存率的影响测定第52-53页
       ·铁皮石斛多糖对BMSCs生存率的影响测定第52-53页
       ·铜皮石斛多糖对BMSCs生存率的影响测定第53页
   ·本章小结第53-55页
第四章 石斛多糖对BMSCs成脂分化的影响第55-71页
   ·引言第55页
   ·仪器与材料第55-57页
     ·实验仪器第55-56页
     ·实验材料第56-57页
   ·方法与操作第57-61页
     ·石斛多糖干预BMSCs成脂分化第57页
     ·油红O染色、拍照及定量检测第57-58页
       ·主要溶液的制备第57页
       ·油红O染色第57-58页
       ·定量检测第58页
     ·BMSCs成脂分化标志基因的检测第58-61页
       ·主要溶液的制备第58页
       ·细胞总RNA的提取第58-59页
       ·逆转录为cDNA第59-60页
       ·荧光定量PCR第60-61页
   ·结果与讨论第61-69页
     ·油红O染色第61-64页
     ·MTT法定量检测第64-66页
     ·成脂分化标志基因的检测第66-69页
   ·本章小结第69-71页
第五章 石斛多糖对BMSCs成骨分化的影响第71-81页
   ·引言第71页
   ·仪器与材料第71-73页
     ·实验仪器第71-72页
     ·实验材料第72-73页
   ·方法与操作第73-75页
     ·石斛多糖干预BMSCs成骨分化第73页
     ·碱性磷酸酶染色第73页
     ·茜素红染色第73-74页
       ·主要溶液的制备第73页
       ·茜素红染色第73-74页
     ·BMSCs成骨分化标志基因的检测第74-75页
       ·细胞总RNA的提取第74页
       ·逆转录为cDNA第74页
       ·荧光定量PCR第74-75页
   ·结果与讨论第75-79页
     ·碱性磷酸酶染色第75-76页
     ·茜素红染色第76-78页
     ·成骨分化标志基因的检测第78-79页
   ·本章小结第79-81页
全文总结第81-83页
参考文献第83-90页
致谢第90-91页
攻读硕士期间发表的学术论文第91页

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