| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一部分 引言 | 第8-15页 |
| 一、 男性不育的概念及其相关研究进展 | 第8页 |
| 二、 基因组印记研究概况 | 第8-13页 |
| （一） 基因组印记概念及发现 | 第8-9页 |
| （二） 基因组印记的相关理论 | 第9页 |
| （三） 基因组印记与甲基化 | 第9-12页 |
| （四） 基因组印记与动物生长发育 | 第12-13页 |
| 三、 本文研究的内容和意义 | 第13-15页 |
| （一） 立题依据 | 第13-14页 |
| （二） 本文研究的内容和意义 | 第14-15页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第15-22页 |
| 一、 实验材料 | 第15-16页 |
| （一） 研究对象及分组 | 第15页 |
| （二） 主要试剂 | 第15页 |
| （三） 实验仪器 | 第15-16页 |
| 二、 实验方法 | 第16-22页 |
| （一） 精液样本的处理 | 第16页 |
| （二） 精液提纯 | 第16页 |
| （三） 精子 DNA 提取 | 第16-17页 |
| （四） 精子 DNA 甲基化修饰 | 第17-18页 |
| （五） DNA 扩增 | 第18-19页 |
| （六） PCR 产物验证 | 第19页 |
| （七） PCR 片段回收 | 第19-20页 |
| （八） 连接 | 第20页 |
| （九） 转化 | 第20页 |
| （十） 质粒 DNA 的小量提取 | 第20-21页 |
| （十一）酶切验证 | 第21页 |
| （十二）PCR 产物克隆测序 | 第21页 |
| （十三）统计分析 | 第21-22页 |
| 第三部分 实验结果与分析 | 第22-31页 |
| 一、 MEST 基因 DMR PCR 扩增 | 第22页 |
| 二、 H19 基因 DMR PCR 扩增 | 第22-23页 |
| 三、 MEST 基因 DMR 阳性克隆鉴定 | 第23-24页 |
| 四、 H19 基因 DMR 阳性克隆鉴定 | 第24页 |
| 五、 H19 基因 DMR 和 MEST 基因 DMR CpG 位点整体甲基化状态分析 | 第24-27页 |
| （一） H19 DMR CpG 各位点甲基化状态的点状图 | 第24-25页 |
| （二） H19 DMR CpG 位点整体甲基化状态分析 | 第25-26页 |
| （三） MEST DMR CpG 各位点甲基化状态点状图 | 第26-27页 |
| （四） MEST DMRCpG 位点整体甲基化状态分析 | 第27页 |
| 六、 H19 DMR 和 MEST DMR CpG 各位点平均甲基化率比较分析 | 第27-31页 |
| （一） H19 DMR CpG 各位点平均甲基化百分率比较分析 | 第27-28页 |
| （二） MEST DMR CpG 各位点甲基化百分率比较分析 | 第28-31页 |
| 第四部分 讨论 | 第31-33页 |
| 一、 H19 DMR 甲基化异常是人类精子形成缺陷的一个生物标志 | 第31-32页 |
| 二、 MEST 甲基化异常与中国男性精子形成异常无关 | 第32-33页 |
| 第五部分 主要结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-40页 |
| 附录一 | 第40-41页 |
| 附录二 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 学期间公开发表论文及著作情况 | 第43页 |
