| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 引言 | 第9-15页 |
| ·乳腺癌 | 第9页 |
| ·成纤维细胞生长因子 1（FGF-1）与肿瘤 | 第9-10页 |
| ·单链抗体 single-chain variable fragment (scFv) 与肿瘤治疗 | 第10-13页 |
| ·人鼠嵌合抗体（human-mouse chimeric antibody） | 第13页 |
| ·立题依据及研究意义 | 第13-15页 |
| 材料和方法 | 第15-23页 |
| ·实验材料和仪器 | 第15页 |
| ·细胞株 | 第15页 |
| ·载体 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·实验仪器 | 第15页 |
| ·慢病毒包装 | 第15-16页 |
| ·细胞培养 | 第15页 |
| ·细胞铺板 | 第15-16页 |
| ·包装载体与核心载体共转 | 第16页 |
| ·病毒包装结果的观察及病毒的收集 | 第16页 |
| ·慢病毒滴度的测定 | 第16页 |
| ·细胞侵染 | 第16页 |
| ·侵染结果的观察及稳定系的建立 | 第16页 |
| ·病毒侵染效率的测定 | 第16页 |
| ·蛋白免疫印迹（Western Blotting） | 第16-17页 |
| ·细胞免疫荧光 | 第17页 |
| ·细胞内 RNA 的提取及 RT-PCR | 第17-18页 |
| ·细胞总 RNA 的提取 | 第17-18页 |
| ·去 DNA 污染 | 第18页 |
| ·逆转录合成 cDNA | 第18页 |
| ·RT-PCR | 第18页 |
| ·流式细胞术检测细胞周期 | 第18-19页 |
| ·准备 | 第18-19页 |
| ·实验过程 | 第19页 |
| ·嵌合抗体表达载体的构建 | 第19-23页 |
| ·引物设计 | 第19-20页 |
| ·目的片段的获得 | 第20页 |
| ·目的片段及空载体的双酶切 | 第20页 |
| ·DNA 凝胶回收 | 第20-21页 |
| ·连接反应 | 第21页 |
| ·转化 | 第21页 |
| ·质粒的小量提取 | 第21页 |
| ·表达载体的 PCR 及双酶切鉴定 | 第21-22页 |
| ·质粒大量提取 | 第22-23页 |
| 结果及分析 | 第23-31页 |
| ·多株乳腺癌细胞系中检测到内源性 FGF-1 的表达 | 第23-24页 |
| ·慢病毒介导的 FGF-1 基因在乳腺癌细胞 MCF-7 中的稳定表达 | 第24-27页 |
| ·慢病毒包装 | 第24-25页 |
| ·病毒滴度测定 | 第25页 |
| ·慢病毒侵染 MCF-7 细胞 | 第25-26页 |
| ·侵染效率检测 | 第26页 |
| ·Western Blot 检测 FGF-1 在细胞内的表达 | 第26-27页 |
| ·ScFv1C9 通过 G1 期阻滞抑制乳腺癌细胞的增殖 | 第27-29页 |
| ·细胞周期药物 SU9516 最佳浓度的筛选 | 第27-28页 |
| ·MCF-7 细胞瞬时转染后细胞周期检测 | 第28-29页 |
| ·抗酸性成纤维细胞生长因子 FGF-1 人鼠嵌合抗体的构建及表达 | 第29-31页 |
| ·表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·免疫荧光检测嵌合抗体表达载体在 293T 中的表达 | 第30-31页 |
| 讨论 | 第31-33页 |
| 结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-37页 |
| 致谢 | 第37页 |
