江南卷柏GST基因家族的功能进化研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-22页 |
| ·基因家族 | 第9-13页 |
| ·基因家族的形成及其扩张方式 | 第9-10页 |
| ·基因重复后的进化命运 | 第10-13页 |
| ·谷胱甘肽转移酶(GST)概述 | 第13-20页 |
| ·GST基因家族的分类和命名 | 第13-14页 |
| ·GST的基因结构 | 第14页 |
| ·GST的蛋白结构 | 第14-15页 |
| ·GST的主要催化机制 | 第15-16页 |
| ·GST的功能 | 第16-20页 |
| ·Tau和phi类GST | 第16-18页 |
| ·Zeta和theta类GSTs | 第18页 |
| ·DHAR和lambda类GSTs | 第18-19页 |
| ·TCHQD类和Ure2p类GSTs | 第19页 |
| ·Hemerythrin类和iota类GSTs | 第19-20页 |
| ·微粒体类GSTs | 第20页 |
| ·江南卷柏基因组简介 | 第20页 |
| ·本论文的目的和意义 | 第20-22页 |
| 2 江南卷柏GST基因的鉴定和表达模式研究 | 第22-33页 |
| ·材料和方法 | 第22-24页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·基因的搜索和鉴定 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22页 |
| ·总RNA的提取 | 第22-23页 |
| ·RNA反转录成cDNA | 第23页 |
| ·系统发生关系分析 | 第23-24页 |
| ·序列相似性分析和基因结构分析 | 第24页 |
| ·江南卷柏GST基因家族的表达模式分析 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-32页 |
| ·序列搜索与鉴定 | 第24-25页 |
| ·系统发生分析 | 第25-26页 |
| ·基因结构分析 | 第26-27页 |
| ·Tau类GST扩张机制 | 第27-28页 |
| ·GST在陆地植物中的进化 | 第28-29页 |
| ·江南卷柏GST基因家族表达模式分析 | 第29-32页 |
| ·江南卷柏总RNA的提取 | 第29-30页 |
| ·江南卷柏GST基因家族表达模式分析 | 第30-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 3 江南卷柏GSTs蛋白质的功能分化研究 | 第33-44页 |
| ·实验方法 | 第33-38页 |
| ·表达引物设计 | 第33页 |
| ·PCR扩增 | 第33页 |
| ·DNA回收 | 第33-34页 |
| ·大肠杆菌BL21感受态的制备 | 第34-35页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·质粒的提取 | 第35页 |
| ·载体双酶切 | 第35-36页 |
| ·连接 | 第36页 |
| ·转化 | 第36页 |
| ·阳性重组子的鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白的原核表达 | 第37页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第37-38页 |
| ·重组蛋白的酶学活性检测 | 第38页 |
| ·结果和分析 | 第38-43页 |
| ·江南卷柏GST基因表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白的诱导和纯化 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白的酶学活性分析 | 第40-43页 |
| ·底物活性的分析 | 第40-41页 |
| ·重组蛋白的动力学分析 | 第41页 |
| ·重组蛋白的pH依赖性和温度依赖性分析 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 4 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 附录 | 第51-59页 |
| 个人简介 | 第59-60页 |
| 导师简介 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
