| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-13页 |
| 1. 引言 | 第13-27页 |
| ·β-甘露糖苷酶的研究进展 | 第13-19页 |
| ·半纤维素及其降解酶系概述 | 第13-14页 |
| ·β-甘露糖苷酶的结构 | 第14-15页 |
| ·β-甘露糖苷酶的来源与性质 | 第15-16页 |
| ·β-甘露糖苷酶的应用 | 第16-17页 |
| ·β-甘露糖苷酶与相关酶的协同作用 | 第17-19页 |
| ·裂解性多糖单加氧酶的研究进展 | 第19-25页 |
| ·纤维素及纤维素降解酶系概述 | 第19-20页 |
| ·裂解性多糖单加氧酶的发现 | 第20-22页 |
| ·裂解性多糖单加氧酶的化学结构 | 第22-23页 |
| ·裂解性多糖单加氧酶的作用机制 | 第23-25页 |
| ·裂解性多糖单加氧酶的应用 | 第25页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第25-26页 |
| ·本研究的主要内容 | 第26-27页 |
| 2. C. bescii GH2家族β-甘露糖苷酶CbMan2A的克隆表达及性质研究 | 第27-51页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·菌株、基因组及质粒 | 第27页 |
| ·引物合成与核酸序列分析 | 第27页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第27-28页 |
| ·常用溶液与培养基配制 | 第28-29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-37页 |
| ·CbMan2A的基因克隆与表达载体构建 | 第29-32页 |
| ·CbMan2A的蛋白表达与纯化 | 第32-33页 |
| ·CbMan2A的基本酶学性质测定 | 第33-36页 |
| ·CbMan2A的甘露寡糖降解实验 | 第36页 |
| ·CbMan2A与甘露聚糖酶CbMan5A的协同作用 | 第36页 |
| ·CbMan2A与半乳甘露聚糖底物的结合实验 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-49页 |
| ·CbMan2A序列分析 | 第37-39页 |
| ·CbMan2A-pET28a(+)重组质粒构建 | 第39-40页 |
| ·CbMan2A重组蛋白的异源表达 | 第40-41页 |
| ·绘制对硝基酚标准曲线 | 第41页 |
| ·绘制甘露糖标准曲线 | 第41-42页 |
| ·CbMan2A底物特异性检测 | 第42-43页 |
| ·酸碱度及温度对CbMan2A酶活性的影响 | 第43页 |
| ·CbMan2A动力学参数测定 | 第43-45页 |
| ·CbMan2A对甘露寡糖的降解 | 第45页 |
| ·CbMan2A与甘露聚糖酶CbMan5A的协同作用 | 第45-46页 |
| ·CbMan2A对半乳甘露聚糖底物的结合作用 | 第46-47页 |
| ·C.bescii转化利用甘露聚糖模型的构建 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·本章小结 | 第50-51页 |
| 3. Humicola insolens来源GH61家族裂解性多糖单加氧酶HiLPMO1417的克隆表达及性质研究 | 第51-66页 |
| ·实验材料 | 第51-52页 |
| ·菌株与质粒 | 第51页 |
| ·引物设计与核酸序列分析 | 第51页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第51-52页 |
| ·常用溶液与培养基配制 | 第52页 |
| ·主要仪器设备 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-59页 |
| ·HiLPMO1417的基因克隆与表达载体构建 | 第52-55页 |
| ·HiLPMO1417的蛋白表达与纯化 | 第55-56页 |
| ·HiLPMO1417的酶活性检测 | 第56-57页 |
| ·HiLPMO1417多糖降解产物的高效液相色谱分析 | 第57-58页 |
| ·HiLPMO1417纤维素产物的MALDI-TOF MS分析 | 第58页 |
| ·HiLPMO1417与纤维素酶HiCelxw的协同作用 | 第58-59页 |
| ·木质素小分子做还原剂 | 第59页 |
| ·实验结果与分析 | 第59-64页 |
| ·HiLPMO1417的序列分析 | 第59-60页 |
| ·HiLPMO1417-pPIC9重组表达载体构建 | 第60-61页 |
| ·HiLPMO1417的异源表达 | 第61-62页 |
| ·HiLPMO1417的底物催化谱 | 第62页 |
| ·HiLPMO1417纤维素产物的高效液相色谱分析 | 第62页 |
| ·HiLPMO1417纤维素产物的MALDI-TOF MS分析 | 第62-63页 |
| ·HiLPMO1417与纤维素酶HiCelxw的协同作用 | 第63-64页 |
| ·木质素小分子做还原剂 | 第64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| ·本章小结 | 第65-66页 |
| 4. 全文结论与展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-77页 |
| 个人简介 | 第77-78页 |
| 导师简介 | 第78-79页 |
| 获得成果目录 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
