| 中国农业科学院博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-26页 |
| ·植物突变体库的创制 | 第15-17页 |
| ·功能缺失型突变体 | 第15-16页 |
| ·功能获得型突变体 | 第16-17页 |
| ·棉花突变体研究进展 | 第17-19页 |
| ·自然突变体 | 第18页 |
| ·理化诱变突变体 | 第18页 |
| ·重组突变体 | 第18-19页 |
| ·插入突变体 | 第19页 |
| ·作物株型改良 | 第19-21页 |
| ·作物株型 | 第19页 |
| ·植物株高相关基因研究进展 | 第19-21页 |
| ·油菜素内酯研究进展 | 第21-22页 |
| ·油菜素内酯的合成与代谢 | 第21-22页 |
| ·油菜素内酯的信号转导 | 第22页 |
| ·棉花纤维发育研究进展 | 第22-25页 |
| ·纤维发育与植物激素 | 第22-23页 |
| ·纤维发育相关基因 | 第23-24页 |
| ·调节纤维发育的模型 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 PAG1 突变体的鉴定与遗传分析 | 第26-40页 |
| ·材料与方法 | 第26-32页 |
| ·材料及其种植 | 第26页 |
| ·菌株与质粒 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·棉花遗传转化 | 第26-28页 |
| ·花粉活力测定 | 第28页 |
| ·叶片透明和细胞观察 | 第28页 |
| ·石蜡切片制作 | 第28-29页 |
| ·纤维品质的测定 | 第29页 |
| ·光形态建成 | 第29-30页 |
| ·棉花液体培养与 BL 处理 | 第30页 |
| ·BR 合成基因在突变体和野生型中表达分析 | 第30-32页 |
| ·结果 | 第32-38页 |
| ·棉花激活标签突变体文库的构建 | 第32-33页 |
| ·pag1 突变体表型观察 | 第33-34页 |
| ·花粉活力测定 | 第34页 |
| ·纤维和细胞伸长 | 第34-35页 |
| ·pag1 突变体细胞扩展受抑制 | 第35-36页 |
| ·光形态建成 | 第36-37页 |
| ·BL 处理恢复表型 | 第37页 |
| ·BR 合成相关基因的表达分析 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| ·棉花体细胞胚胎再生是棉花遗传转化的关键 | 第38-39页 |
| ·激活标签技术是获得棉花突变体的有效方法 | 第39-40页 |
| 第三章 PAG1 基因的克隆与功能分析 | 第40-59页 |
| ·材料与方法 | 第40-47页 |
| ·菌株与质粒 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·PCR 检测 | 第40页 |
| ·遗传分析 | 第40页 |
| ·卡那霉素处理 | 第40页 |
| ·TAIL-PCR 扩增 | 第40-41页 |
| ·目标性状与插入位点共分离 | 第41页 |
| ·序列比对分析 | 第41-42页 |
| ·目的基因克隆 | 第42页 |
| ·目的基因表达载体构建 | 第42-43页 |
| ·农杆菌转化 | 第43-44页 |
| ·拟南芥的培养与遗传转化 | 第44页 |
| ·目的基因表达分析 | 第44页 |
| ·BL 诱导表达和组织特异性分析 | 第44-45页 |
| ·启动子克隆与分析 | 第45页 |
| ·启动子驱动 GUS 载体构建与遗传转化 | 第45-46页 |
| ·GUS 染色 | 第46-47页 |
| ·结果分析 | 第47-57页 |
| ·遗传分析 | 第47-48页 |
| ·卡那霉素抗性与 PCR 鉴定 | 第48-49页 |
| ·T-DNA 插入位点的确定 | 第49-50页 |
| ·插入位点下游基因的表达分析 | 第50-51页 |
| ·目标基因的克隆与序列分析 | 第51-52页 |
| ·目标基因的功能验证 | 第52-53页 |
| ·PAG1 表达分析 | 第53-54页 |
| ·PAG1 启动子的克隆与分析 | 第54-56页 |
| ·PAG1 启动子的表达分析 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| ·T-DNA 标签技术是棉花中功能基因克隆的可行策略 | 第57页 |
| ·pag1 是一个 BR 缺陷型突变体 | 第57-58页 |
| ·PAG1 在调节组织的生长中发挥重要作用 | 第58-59页 |
| 第四章 PAG1 改良植物株型 | 第59-67页 |
| ·材料与方法 | 第59-60页 |
| ·材料种植同上 | 第59页 |
| ·棉花嫁接 | 第59页 |
| ·BL 局部处理 | 第59页 |
| ·不同转化体的表达分析 | 第59页 |
| ·LS1 绿色特异启动子载体构建 | 第59-60页 |
| ·转基因水稻的获得 | 第60页 |
| ·棉花转化同 2.1.4 | 第60页 |
| ·结果分析 | 第60-66页 |
| ·BL 在棉花中不能长距离运输 | 第60-61页 |
| ·BL 局部处理可塑造棉花株型 | 第61-62页 |
| ·利用组成型启动子筛选不同株高的转基因植株 | 第62-63页 |
| ·绿色组织特异启动子转化拟南芥 | 第63页 |
| ·绿色组织特异启动子转化棉花 | 第63-65页 |
| ·PAG1 在单子叶植物中的功能验证 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-67页 |
| ·PAG1 在双子叶和单子叶植物中都具有 BR 失活的功能 | 第66页 |
| ·BR 不能进行长距离运输为特异改良株型提供了可能 | 第66-67页 |
| 第五章 BR 调节棉花纤维伸长的机制 | 第67-80页 |
| ·材料与方法 | 第67-68页 |
| ·胚珠离体培养 | 第67页 |
| ·RNA 提取与检测 | 第67页 |
| ·转录组测序 | 第67页 |
| ·测序分析 | 第67-68页 |
| ·结果分析 | 第68-77页 |
| ·BR 缺陷对纤维发育的影响 | 第68-70页 |
| ·材料选取与样品检测 | 第70-72页 |
| ·转录组测序与分析 | 第72页 |
| ·差异基因分析 | 第72-73页 |
| ·差异基因 GO 聚类分析 | 第73-75页 |
| ·脂肪酸合成和乙烯信号转导途径相关基因 | 第75页 |
| ·细胞壁和细胞骨架相关基因 | 第75-76页 |
| ·其他相关基因 | 第76页 |
| ·RNA-Seq 数据的 Real-time PCR 验证 | 第76-77页 |
| ·讨论 | 第77-80页 |
| ·纤维发育过程中内源 BR 受到严密调控 | 第77-78页 |
| ·BR 可调节种子大小促进纤维产量 | 第78页 |
| ·BR 调节纤维的机制 | 第78-80页 |
| 第六章 全文结论 | 第80-82页 |
| ·结论 | 第80-81页 |
| ·创新点 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 作者简介 | 第98页 |
