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重组猪源OAS1抗日本脑炎病毒的特性研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-15页
第一篇 文献综述第15-45页
 第一章 OAS抗病毒功能研究进展第15-25页
  1 OAS家族的基因组成第15-17页
   ·人类的OAS基因组成第15-16页
   ·猪的OAS基因组成第16页
   ·小鼠的OAS基因组成第16-17页
  2 OAS蛋白的结构第17-18页
  3 OAS的生物学功能以及催化作用机制研究第18-20页
   ·OAS的生物学功能:OAS独特的2’聚合酶活性以及OAS蛋白的来源第19页
   ·OAS的催化作用机制第19-20页
  4 OAS蛋白家族抗病毒的分子机制研究进展第20-22页
   ·OAS蛋白家族成员依赖于RNaseL途径的抗病毒作用第21页
   ·OAS蛋白家族成员非依赖于RNaseL途径的抗病毒作用第21-22页
  5 OAS蛋白与临床疾病的关系第22页
  6 有关OAS蛋白研究的前景展望第22-25页
 第二章 日本乙型脑炎的研究背景第25-45页
  1 日本乙型脑炎病毒的病原学特征及其理化特性第25-26页
  2 日本乙型脑炎的流行以及流行的模式第26-28页
  3 日本乙型脑炎病毒的扩散第28页
  4 日本乙型脑炎的毒力影响因素和致病机理第28-30页
   ·毒力影响因素第28-30页
   ·致病机理第30页
  5 流行性乙型脑炎病毒的生物合成第30-31页
  6 流行性乙型脑炎疫苗的相关研究第31-32页
  7 流行性乙型脑炎的诊断技术概况第32页
  8 流行性乙型脑炎综合防治管理的有效措施第32-35页
   ·积极宣传第33页
   ·加强饲养管理措施第33页
   ·加强预防措施第33页
   ·免疫接种防治结合第33-34页
   ·对症治疗措施第34页
   ·加强监测第34-35页
  9 流行性乙型脑炎疫苗的前景展望第35-36页
  参考文献第36-45页
第二篇 实验部分第45-123页
 第三章 重组OAS1的可溶性表达与理化特性研究第45-65页
  摘要第45-46页
  1 实验材料第46-47页
   ·材料第46页
   ·实验动物第46页
   ·主要试剂与工具酶第46-47页
   ·主要仪器设备第47页
  2 实验方法第47-57页
   ·猪源OAS1基因的引物设计与合成第47页
   ·提取PK-15细胞的总RNA第47-48页
   ·猪源OAS1目的基因的RT-PCR扩增第48-49页
   ·猪源OAS1目的基因原核表达载体的构建:连接及转化第49-54页
   ·重组OAS1蛋白的可溶性诱导表达纯化第54-55页
   ·重组OAS1蛋白的Western blot分析鉴定第55-56页
   ·制备重组OAS1蛋白多克隆抗体并利用Western blot方法鉴定其反应原性第56-57页
  3 实验结果第57-60页
   ·猪源OAS1基因克隆与序列分析第57页
   ·猪源OAS1原核表达重组质粒的构建第57-58页
   ·猪源OAS1蛋白在大肠杆菌Rosetta2中的表达与纯化第58-60页
   ·猪源OAS1蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体第60页
  4 讨论第60-61页
  参考文献第61-63页
  ABSTRACT第63-65页
 第四章 重组OAS1蛋白抗病毒特性研究第65-91页
  摘要第65-66页
  1 实验材料第66-67页
   ·细胞和毒株第66页
   ·主要试剂第66-67页
   ·主要仪器第67页
  2 实验方法第67-77页
   ·重组OAS1蛋白的脱盐处理,浓度测定以及其对细胞毒性的检测第67-69页
   ·重组OAS1蛋白抗病毒谱的测定第69-76页
   ·重组OAS1蛋白抑制病毒感染细胞的最佳时机分析第76-77页
  3 实验结果第77-85页
   ·重组OAS1蛋白的脱盐处理,浓度测定以及其对细胞毒性的检测第77-78页
   ·重组OAS1蛋白抗病毒谱的测定第78-82页
   ·重组OAS1蛋白抑制病毒感染细胞的最佳时机分析第82-85页
  4 讨论第85-87页
  参考文献第87-89页
  Abstract第89-91页
 第五章 重组OAS1抗日本脑炎病毒的作用机制研究第91-123页
  摘要第91-93页
  1 实验材料第93-94页
   ·细胞和毒株第93页
   ·主要试剂第93页
   ·主要仪器第93-94页
  2 实验方法第94-101页
   ·重组OAS1蛋白对JEV吸附和入胞的影响第94-96页
   ·重组OAS1蛋白对JEV在细胞中早期增殖的影响第96-97页
   ·重组OAS1蛋白在BHK-21细胞系上对JEV子代病毒感染效率的影响第97-98页
   ·重组OAS1aD74A/D76A原核表达,纯化以及在BHK-21细胞系上抗JEV的活性测定第98-101页
  3 实验结果第101-116页
   ·重组OAS1蛋白对JEV吸附和入胞的影响第101-103页
   ·重组OAS1蛋白对JEV在细胞中早期增殖的影响第103-106页
   ·重组OAS1蛋白在BHK-21细胞系上对JEV子代病毒感染效率的影响第106-110页
   ·重组OAS1aD74A/D76A原核表达,纯化以及在BHK-21细胞系上抗JEV的活性测定第110-116页
  4 讨论第116-118页
  参考文献第118-120页
  ABSTRACT第120-123页
全文总结第123-125页
致谢第125页

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