摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-15页 |
第一篇 文献综述 | 第15-45页 |
第一章 OAS抗病毒功能研究进展 | 第15-25页 |
1 OAS家族的基因组成 | 第15-17页 |
·人类的OAS基因组成 | 第15-16页 |
·猪的OAS基因组成 | 第16页 |
·小鼠的OAS基因组成 | 第16-17页 |
2 OAS蛋白的结构 | 第17-18页 |
3 OAS的生物学功能以及催化作用机制研究 | 第18-20页 |
·OAS的生物学功能:OAS独特的2’聚合酶活性以及OAS蛋白的来源 | 第19页 |
·OAS的催化作用机制 | 第19-20页 |
4 OAS蛋白家族抗病毒的分子机制研究进展 | 第20-22页 |
·OAS蛋白家族成员依赖于RNaseL途径的抗病毒作用 | 第21页 |
·OAS蛋白家族成员非依赖于RNaseL途径的抗病毒作用 | 第21-22页 |
5 OAS蛋白与临床疾病的关系 | 第22页 |
6 有关OAS蛋白研究的前景展望 | 第22-25页 |
第二章 日本乙型脑炎的研究背景 | 第25-45页 |
1 日本乙型脑炎病毒的病原学特征及其理化特性 | 第25-26页 |
2 日本乙型脑炎的流行以及流行的模式 | 第26-28页 |
3 日本乙型脑炎病毒的扩散 | 第28页 |
4 日本乙型脑炎的毒力影响因素和致病机理 | 第28-30页 |
·毒力影响因素 | 第28-30页 |
·致病机理 | 第30页 |
5 流行性乙型脑炎病毒的生物合成 | 第30-31页 |
6 流行性乙型脑炎疫苗的相关研究 | 第31-32页 |
7 流行性乙型脑炎的诊断技术概况 | 第32页 |
8 流行性乙型脑炎综合防治管理的有效措施 | 第32-35页 |
·积极宣传 | 第33页 |
·加强饲养管理措施 | 第33页 |
·加强预防措施 | 第33页 |
·免疫接种防治结合 | 第33-34页 |
·对症治疗措施 | 第34页 |
·加强监测 | 第34-35页 |
9 流行性乙型脑炎疫苗的前景展望 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-45页 |
第二篇 实验部分 | 第45-123页 |
第三章 重组OAS1的可溶性表达与理化特性研究 | 第45-65页 |
摘要 | 第45-46页 |
1 实验材料 | 第46-47页 |
·材料 | 第46页 |
·实验动物 | 第46页 |
·主要试剂与工具酶 | 第46-47页 |
·主要仪器设备 | 第47页 |
2 实验方法 | 第47-57页 |
·猪源OAS1基因的引物设计与合成 | 第47页 |
·提取PK-15细胞的总RNA | 第47-48页 |
·猪源OAS1目的基因的RT-PCR扩增 | 第48-49页 |
·猪源OAS1目的基因原核表达载体的构建:连接及转化 | 第49-54页 |
·重组OAS1蛋白的可溶性诱导表达纯化 | 第54-55页 |
·重组OAS1蛋白的Western blot分析鉴定 | 第55-56页 |
·制备重组OAS1蛋白多克隆抗体并利用Western blot方法鉴定其反应原性 | 第56-57页 |
3 实验结果 | 第57-60页 |
·猪源OAS1基因克隆与序列分析 | 第57页 |
·猪源OAS1原核表达重组质粒的构建 | 第57-58页 |
·猪源OAS1蛋白在大肠杆菌Rosetta2中的表达与纯化 | 第58-60页 |
·猪源OAS1蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体 | 第60页 |
4 讨论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-63页 |
ABSTRACT | 第63-65页 |
第四章 重组OAS1蛋白抗病毒特性研究 | 第65-91页 |
摘要 | 第65-66页 |
1 实验材料 | 第66-67页 |
·细胞和毒株 | 第66页 |
·主要试剂 | 第66-67页 |
·主要仪器 | 第67页 |
2 实验方法 | 第67-77页 |
·重组OAS1蛋白的脱盐处理,浓度测定以及其对细胞毒性的检测 | 第67-69页 |
·重组OAS1蛋白抗病毒谱的测定 | 第69-76页 |
·重组OAS1蛋白抑制病毒感染细胞的最佳时机分析 | 第76-77页 |
3 实验结果 | 第77-85页 |
·重组OAS1蛋白的脱盐处理,浓度测定以及其对细胞毒性的检测 | 第77-78页 |
·重组OAS1蛋白抗病毒谱的测定 | 第78-82页 |
·重组OAS1蛋白抑制病毒感染细胞的最佳时机分析 | 第82-85页 |
4 讨论 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-89页 |
Abstract | 第89-91页 |
第五章 重组OAS1抗日本脑炎病毒的作用机制研究 | 第91-123页 |
摘要 | 第91-93页 |
1 实验材料 | 第93-94页 |
·细胞和毒株 | 第93页 |
·主要试剂 | 第93页 |
·主要仪器 | 第93-94页 |
2 实验方法 | 第94-101页 |
·重组OAS1蛋白对JEV吸附和入胞的影响 | 第94-96页 |
·重组OAS1蛋白对JEV在细胞中早期增殖的影响 | 第96-97页 |
·重组OAS1蛋白在BHK-21细胞系上对JEV子代病毒感染效率的影响 | 第97-98页 |
·重组OAS1aD74A/D76A原核表达,纯化以及在BHK-21细胞系上抗JEV的活性测定 | 第98-101页 |
3 实验结果 | 第101-116页 |
·重组OAS1蛋白对JEV吸附和入胞的影响 | 第101-103页 |
·重组OAS1蛋白对JEV在细胞中早期增殖的影响 | 第103-106页 |
·重组OAS1蛋白在BHK-21细胞系上对JEV子代病毒感染效率的影响 | 第106-110页 |
·重组OAS1aD74A/D76A原核表达,纯化以及在BHK-21细胞系上抗JEV的活性测定 | 第110-116页 |
4 讨论 | 第116-118页 |
参考文献 | 第118-120页 |
ABSTRACT | 第120-123页 |
全文总结 | 第123-125页 |
致谢 | 第125页 |