| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 主要符号对照表 | 第10-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-33页 |
| ·本章引论 | 第12页 |
| ·能量工厂——电子传递链 | 第12-13页 |
| ·电子传递链简介 | 第12-13页 |
| ·电子传递链的组成 | 第13页 |
| ·NADH：泛醌氧化还原酶 | 第13-17页 |
| ·NADH：泛醌氧化还原酶的分类 | 第13-16页 |
| ·NADH：泛醌氧化还原酶的重要性 | 第16-17页 |
| ·II 型 NADH：泛醌氧化还原酶 | 第17-25页 |
| ·II 型 NADH：泛醌氧化还原酶简介 | 第17页 |
| ·II 型 NADH：泛醌氧化还原酶的分类 | 第17-19页 |
| ·II 型 NADH：泛醌氧化还原酶研究的起源 | 第19页 |
| ·原核生物的 II 型 NADH：泛醌氧化还原酶 | 第19-20页 |
| ·真核生物的 II 型 NADH：泛醌氧化还原酶 | 第20-22页 |
| ·关于人 II 型 NADH：泛醌氧化还原酶是否存在的讨论 | 第22-23页 |
| ·已知 II 型 NADH：泛醌氧化还原酶的生化特征 | 第23-24页 |
| ·II 型 NADH：泛醌氧化还原酶与膜的相互作用 | 第24-25页 |
| ·II 型 NADH：泛醌氧化还原酶的生理功能 | 第25页 |
| ·酿酒酵母 II 型 NADH：泛醌氧化还原酶——Ndi1 | 第25-31页 |
| ·Ndi1：潜在的抗生素药物靶点 | 第26-27页 |
| ·异源表达 Ndi1：未来的基因治疗手段 | 第27-28页 |
| ·Ndi1 研究中存在的若干问题 | 第28-31页 |
| ·本文研究工作的目的和意义 | 第31页 |
| ·本文各部分的主要内容 | 第31-33页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第33-53页 |
| ·本章引论 | 第33页 |
| ·Ndi1 的表达与纯化 | 第33-38页 |
| ·载体及菌种 | 第33-34页 |
| ·试剂及仪器 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌表达质粒的构建与筛选 | 第35页 |
| ·蛋白的表达与纯化方法 | 第35-38页 |
| ·Ndi1 的结晶与结构解析 | 第38-43页 |
| ·试剂及仪器 | 第38页 |
| ·晶体初步筛选方法 | 第38-39页 |
| ·晶体优化方法 | 第39-41页 |
| ·获得晶体相位的方法 | 第41页 |
| ·晶体防冻液的配制 | 第41-42页 |
| ·晶体衍射数据收集、处理和结构解析 | 第42-43页 |
| ·系统进化关系的全基因组分析方法 | 第43页 |
| ·酵母功能实验 | 第43-47页 |
| ·载体及表达质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·酵母培养基 | 第44页 |
| ·酵母菌种 | 第44-45页 |
| ·试剂及仪器 | 第45页 |
| ·酵母转化方法 | 第45-46页 |
| ·酵母生长检测方法 | 第46页 |
| ·酵母体内免疫共沉淀实验 | 第46页 |
| ·酵母膜组分分离实验 | 第46-47页 |
| ·Ndi1 蛋白的酶活检测 | 第47页 |
| ·电子顺磁共振实验 | 第47-53页 |
| ·仪器 | 第47页 |
| ·电子顺磁共振实验的原理 | 第47-49页 |
| ·自旋弛豫以及功率饱和现象 | 第49-51页 |
| ·电子顺磁共振实验检测半醌自由基 | 第51页 |
| ·功率饱和实验方法 | 第51-53页 |
| 第3章 Ndi1 蛋白的表达、纯化与结晶 | 第53-63页 |
| ·本章引论 | 第53页 |
| ·Ndi1 蛋白的纯化结果 | 第53-55页 |
| ·Ndi1 晶体的筛选与优化 | 第55-61页 |
| ·Ndi1 蛋白的结晶过程 | 第55-59页 |
| ·Ndi1 晶体的优化及防冻液选择 | 第59-61页 |
| ·Ndi1 蛋白-底物复合物的晶体生长 | 第61页 |
| ·本章小结与讨论 | 第61-63页 |
| 第4章 Ndi1 的晶体结构解析与生化特性研究 | 第63-80页 |
| ·本章引论 | 第63页 |
| ·Ndi1 的晶体数据收集与结构解析 | 第63-65页 |
| ·Ndi1 的生化特性研究 | 第65-78页 |
| ·Ndi1 的总体结构 | 第66-68页 |
| ·C 端结构域在 NDH-2 中高度保守 | 第68-69页 |
| ·Ndi1 以二聚体的形式存在 | 第69-75页 |
| ·Ndi1 依靠 CTD 附着在线粒体内膜上 | 第75-78页 |
| ·本章小结与讨论 | 第78-80页 |
| 第5章 Ndi1 介导的电子传递机制分析 | 第80-100页 |
| ·本章引论 | 第80-81页 |
| ·Ndi1 与 FAD、NADH、UQ 的结合 | 第81-89页 |
| ·FAD 在 Ndi1 中的结合方式 | 第81页 |
| ·NADH 在 Ndi1 中的结合方式 | 第81-84页 |
| ·UQ 在 Ndi1 中的结合方式 | 第84-89页 |
| ·Ndi1 介导的电子传递机制分析 | 第89-97页 |
| ·Ndi1-NADH-UQ 复合物的晶体结构 | 第89-90页 |
| ·Ndi1 介导的电子传递过程中存在半醌自由基 | 第90-93页 |
| ·Ndi1 介导的电子传递涉及两个半醌自由基 | 第93-97页 |
| ·本章小结与讨论 | 第97-100页 |
| ·UQII可以接受还原型 FAD 的电子 | 第97-98页 |
| ·Ndi1 的电子传递机制细节 | 第98-99页 |
| ·Ndi1 与底物分子反应的动力学机制 | 第99-100页 |
| 第6章 结论 | 第100-103页 |
| ·C 端结构域对 Ndi1 至关重要 | 第100页 |
| ·Ndi1 介导的电子传递机制 | 第100-101页 |
| ·尚待解决的问题及以后的研究方向 | 第101-103页 |
| 参考文献 | 第103-113页 |
| 致谢 | 第113-115页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第115页 |
