| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-30页 |
| ·抗菌肽结构与分类 | 第10-15页 |
| ·抗菌肽的构成特点及其基因结构 | 第10-11页 |
| ·抗菌肽分类 | 第11-15页 |
| ·据抗菌肽生物合成途径分类 | 第13页 |
| ·据抗菌肽三维结构分类 | 第13页 |
| ·据抗菌肽分布分类 | 第13-15页 |
| ·抗菌肽的作用机理 | 第15-22页 |
| ·抗菌肽的抗细菌作用 | 第16-18页 |
| ·细胞膜攻击机制 | 第16-17页 |
| ·线粒体攻击作用 | 第17页 |
| ·抗菌肽的免疫调节活性 | 第17页 |
| ·其它机制 | 第17-18页 |
| ·抗菌肽的抗真菌作用 | 第18页 |
| ·抗菌肽的抗肿瘤作用 | 第18-20页 |
| ·抗菌肽的抗病毒作用 | 第20-21页 |
| ·抗菌肽抗病毒的膜攻击机制 | 第20页 |
| ·抗菌肽抑制病毒基因表达 | 第20-21页 |
| ·抗菌肽的抗寄生虫作用 | 第21页 |
| ·抗菌肽的协同作用 | 第21-22页 |
| ·抗菌肽的生产 | 第22-25页 |
| ·提取天然抗菌肽 | 第22-23页 |
| ·化学合成抗菌肽 | 第23-24页 |
| ·利用基因工程生产抗菌肽 | 第24-25页 |
| ·抗菌肽原核表达策略 | 第24-25页 |
| ·抗菌肽真核表达策略 | 第25页 |
| ·抗菌肽的应用概况 | 第25-28页 |
| ·抗菌肽的转基因研究 | 第25-26页 |
| ·抗菌肽在医疗方面的应用 | 第26-27页 |
| ·抗菌肽在农业上的应用 | 第27页 |
| ·抗菌肽在养殖业中的应用 | 第27-28页 |
| ·小结 | 第28-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-46页 |
| ·实验材料 | 第30-36页 |
| ·实验动物 | 第30页 |
| ·载体与菌株 | 第30页 |
| ·试剂 | 第30-35页 |
| ·酶 | 第30页 |
| ·常规试剂 | 第30-32页 |
| ·RNA 提取用试剂 | 第32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备、转化及诱导用液 | 第32页 |
| ·质粒 DNA 提取用液 | 第32-33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所用溶液 | 第33页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳所用溶液 | 第33-34页 |
| ·细胞培养用溶液 | 第34-35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-46页 |
| ·引物设计及合成 | 第36-37页 |
| ·total RNA 提取 | 第37页 |
| ·PMAP-37 基因的 RT-PCR 扩增 | 第37页 |
| ·扩增产物的纯化 | 第37-38页 |
| ·重组测序质粒 PMD19-T Simple-PMAP37 的构建 | 第38-39页 |
| ·纯化后扩增产物与 pMD19-T simple 测序载体的连接 | 第38-39页 |
| ·连接产物的转化 | 第39页 |
| ·重组测序质粒 PMD19-T Simple-PMAP37 的筛选和初步鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组测序质粒小量提取-碱裂解法 | 第39-40页 |
| ·重组测序质粒的双酶切鉴定 | 第40页 |
| ·序列分析 | 第40页 |
| ·重组表达质粒 pBV220-PMAP37 构建 | 第40-41页 |
| ·重组表达质粒 pBV220-PMAP37 的筛选和初步鉴定 | 第41页 |
| ·基因工程重组菌的诱导表达 | 第41页 |
| ·SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS－PAGE) | 第41-42页 |
| ·制胶 | 第41页 |
| ·上样与电泳 | 第41-42页 |
| ·染色与脱色 | 第42页 |
| ·表达产物纯化 | 第42页 |
| ·发酵 | 第42页 |
| ·表达产物的纯化、复性 | 第42页 |
| ·天然抗菌肽提取 | 第42-44页 |
| ·猪小肠抗菌肽提取 | 第42-43页 |
| ·提取绵羊白细胞抗菌肽 | 第43-44页 |
| ·抗菌肽生物学功能分析 | 第44-45页 |
| ·抑菌活性分析 | 第44页 |
| ·高温对抗菌肽抑菌活性的影响 | 第44页 |
| ·pH 值对抗菌肽抑菌活性的影响 | 第44页 |
| ·蛋白酶对抗菌肽的抑菌活性的影响 | 第44-45页 |
| ·抗菌肽与抗生素抑菌活性的比较 | 第45页 |
| ·动物实验 | 第45-46页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第46-59页 |
| ·实验结果 | 第46-57页 |
| ·total RNA 提取 | 第46页 |
| ·PMAP-37 基因的 RT-PCR 扩增结果 | 第46页 |
| ·扩增产物的纯化 | 第46页 |
| ·重组测序质粒 PMD19-T Simple-PMAP37 的构建和初步鉴定 | 第46-47页 |
| ·序列分析 | 第47-48页 |
| ·重组表达质粒pBV220-PMAP37构建和初步鉴定 | 第48页 |
| ·诱导后基因工程重组表达菌的 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第48-50页 |
| ·白细胞抗菌肽蛋白电泳及浓度测定 | 第50页 |
| ·抗菌肽的生物学功能分析 | 第50-54页 |
| ·抗菌肽的抑菌活性 | 第50页 |
| ·高温对抗菌肽的抑菌活性的影响 | 第50-52页 |
| ·pH 值对抗菌肽的抑菌活性的影响 | 第52页 |
| ·蛋白酶对抗菌肽的抑菌活性的影响 | 第52-53页 |
| ·天然抗菌肽与抗生素抑菌活性的比较 | 第53-54页 |
| ·动物实验观测结果 | 第54-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 附录 A 英文缩写表 | 第66-67页 |
| 附录 B 原核表达载体 pBV220 的图谱 | 第67-68页 |
| 附录 C 在读期间发表论文 | 第68页 |
