| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 插图和附表清单 | 第12-13页 |
| 第一章 绪言 | 第13-27页 |
| ·低氧胁迫的研究进展 | 第13-19页 |
| ·低氧对鱼类的影响 | 第13-14页 |
| ·鱼类面临低氧时的生理生化和行为对策 | 第14-15页 |
| ·影响鱼类耐低氧的因素 | 第15-16页 |
| ·低氧适应相关基因的研究 | 第16-19页 |
| ·差异表达基因的分离方法 | 第19-24页 |
| ·mRNA差异显示技术(Differential Display ReverseTranscription-PCR.DDRT-PCR) | 第19-20页 |
| ·抑制性差减杂交技术(Suppression Subtractive Hybridization.SSH) | 第20页 |
| ·cDNA微阵列技术(cDNA Microarray) | 第20-21页 |
| ·cDNA扩增片段长度多态性(cDNA-AFLP) | 第21-24页 |
| ·技术路线 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 第二章 低氧胁迫下雌核发育系白鲢的细胞学检测 | 第27-32页 |
| ·前言 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-28页 |
| ·实验结果与分析 | 第28-30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 鲢cDNA-AFLP体系的构建 | 第32-41页 |
| ·材料和方法 | 第32-36页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·总RNA的提取 | 第33页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第33-35页 |
| ·鲢cDNA序列的酶切分析 | 第35页 |
| ·接头的退火 | 第35-36页 |
| ·连接反应 | 第36页 |
| ·预扩增 | 第36页 |
| ·结果分析 | 第36-39页 |
| ·总RNA的提取 | 第36-37页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第37-38页 |
| ·酶切时间和酶切体系的影响 | 第38页 |
| ·连接体系的影响 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 雌核发育系鲢低氧胁迫差异表达基因的克隆和分析 | 第41-61页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-48页 |
| ·总RNA的提取 | 第41页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第41-42页 |
| ·双酶切 | 第42页 |
| ·接头的退火 | 第42页 |
| ·连接反应 | 第42页 |
| ·预扩增和选择性扩增 | 第42-44页 |
| ·cDNA-AFLP产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染显影 | 第44-45页 |
| ·差异条带的回收 | 第45页 |
| ·二次扩增 | 第45页 |
| ·二次扩增产物的回收 | 第45-46页 |
| ·回收片段的克隆和测序 | 第46-47页 |
| ·差异表达序列的生物信息学分析 | 第47页 |
| ·部分差异片段基因在低氧条件下的差异表达 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-57页 |
| ·预扩增产物的检测 | 第48-49页 |
| ·选择性扩增结果 | 第49-50页 |
| ·二次扩增检测 | 第50-51页 |
| ·差异表达基因的同源性分析 | 第51-53页 |
| ·差异表达基因的功能分析 | 第53-55页 |
| ·差异片段基因在低氧条件下的差异表达 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-61页 |
| ·细胞骨架蛋白与低氧的关系 | 第57页 |
| ·内质网应激与低氧的关系 | 第57-58页 |
| ·鱼类抗低氧的物质基础 | 第58-59页 |
| ·鱼类抗低氧的信号转导 | 第59-61页 |
| 第五章 雌核发育系鲢低氧胁迫相关热激蛋白70的克隆和表达分析 | 第61-71页 |
| ·材料与方法 | 第61-62页 |
| ·材料 | 第61页 |
| ·RACE引物设计 | 第61页 |
| ·鲢Hsp70全长cDNA的克隆 | 第61页 |
| ·序列拼接 | 第61-62页 |
| ·Hsp70全长序列的生物信息学分析 | 第62页 |
| ·各组织中鲢Hsp70 mRNA表达变化分析 | 第62页 |
| ·实验结果与分析 | 第62-70页 |
| ·SMART RACE法扩增鲢Hsp70 cDNA5’及3’末端 | 第62-63页 |
| ·鲢Hsp70的全长cDNA | 第63-66页 |
| ·鲢Hsp70蛋白理化性质分析及蛋白三级结构预测 | 第66-67页 |
| ·鲢Hsp70系统进化树分析 | 第67-68页 |
| ·鲢Hsp70在各组织中的表达特性 | 第68-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| 第六章 结论 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 附录A 攻读硕士学位期间发表论文及申报专利目录 | 第80-81页 |
| 附录B 雌核发育系鲢低氧胁迫cDNA-AFLP展示的差异表达基因片段序列 | 第81-87页 |
