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巴西橡胶树4个胶乳生物合成相关基因的物理定位研究

摘要第1-6页
Abstract第6-7页
目录第7-9页
1 前言第9-21页
   ·橡胶树种质资源概述第9-10页
   ·部分重要产胶相关基因简介第10-15页
     ·3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶基因(3-Hydroxy-3-MethylglutarylCoenzyme A Reductase,HMGR)第11-13页
     ·牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因(Geranylgeranyl Diphosphate Synthase,GGPS)第13页
     ·膜结合焦磷酸酶基因(vacuolar PPase,V-PPase)第13-14页
     ·巴西橡胶树顺式-异戊烯基转移酶基因(Hevea rubber transferase,HRT)第14-15页
   ·植物荧光原位杂交技术的研究进展第15-18页
     ·荧光原位杂交技术的主要操作步骤第16-18页
       ·染色体片的制备第16页
       ·探针的制备第16-17页
       ·杂交、洗脱及免疫检测第17-18页
     ·多色荧光原位杂交技术第18页
     ·植物基因定位方面的研究进展第18页
   ·植物原位PCR技术及应用第18-19页
   ·橡胶树基因定位研究进展第19页
   ·本研究的目的意义和技术路线第19-21页
     ·本研究的目的意义第19-20页
     ·技术路线第20-21页
2 材料和方法第21-32页
   ·试验材料与试剂第21-22页
     ·供试材料第21页
     ·主要的仪器第21页
     ·试剂第21-22页
   ·试验方法第22-32页
     ·染色体标本的制备第22-23页
       ·载玻片的洗涤和包被第22页
       ·材料的采集、处理及染色体标本的制备第22-23页
     ·橡胶树DNA提取第23-24页
       ·橡胶树DNA提取第23-24页
       ·DNA质量检测第24页
     ·特异引物合成与筛选第24-26页
       ·特异PCR引物的设计与合成第24-25页
       ·特异PCR反应体系及扩增程序第25页
       ·PCR产物的回收纯化第25-26页
       ·测序及序列比对第26页
     ·FISH技术流程第26-29页
       ·探针DNA的扩增及纯化第26页
       ·探针的标记、检测与纯化第26-28页
       ·FISH及信号检测第28-29页
     ·原位PCR技术流程第29-31页
     ·信号位置的确定第31-32页
3 结果与分析第32-53页
   ·基因特异DNA序列的扩增与分析第32-40页
     ·基因组DNA的提取第32页
     ·基因特异DNA序列的PCR扩增与测序结果第32-40页
   ·探针标记检测第40-41页
   ·功能基因的染色体定位分析第41-53页
     ·HMGRl基因的FISH检测与定位分析第41-43页
     ·GGPS和V-PPase基因的双色FISH检测与定位分析第43-44页
     ·HRT基因家族的染色体定位分析第44-53页
       ·HRT1和HRT2基因的双色FISH检测与定位分析第44-46页
       ·HPT3和HCPT-3基因的双色FISH、原位PCR检测与定位分析第46-49页
       ·HBCPT基因的FISH和原位PCR检测与定位分析第49-53页
4 讨论第53-55页
   ·染色体标本制备的探讨第53页
   ·FISH信号问题第53-54页
   ·FISH检测的灵敏度第54页
   ·基因家族成员原位杂交的相互影响问题第54-55页
   ·关于HRT1基因与RT基因的定位第55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-63页
附录第63-65页
缩略语第65-66页
致谢第66页

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