摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第7-9页 |
1 前言 | 第9-21页 |
·橡胶树种质资源概述 | 第9-10页 |
·部分重要产胶相关基因简介 | 第10-15页 |
·3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶基因(3-Hydroxy-3-MethylglutarylCoenzyme A Reductase,HMGR) | 第11-13页 |
·牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因(Geranylgeranyl Diphosphate Synthase,GGPS) | 第13页 |
·膜结合焦磷酸酶基因(vacuolar PPase,V-PPase) | 第13-14页 |
·巴西橡胶树顺式-异戊烯基转移酶基因(Hevea rubber transferase,HRT) | 第14-15页 |
·植物荧光原位杂交技术的研究进展 | 第15-18页 |
·荧光原位杂交技术的主要操作步骤 | 第16-18页 |
·染色体片的制备 | 第16页 |
·探针的制备 | 第16-17页 |
·杂交、洗脱及免疫检测 | 第17-18页 |
·多色荧光原位杂交技术 | 第18页 |
·植物基因定位方面的研究进展 | 第18页 |
·植物原位PCR技术及应用 | 第18-19页 |
·橡胶树基因定位研究进展 | 第19页 |
·本研究的目的意义和技术路线 | 第19-21页 |
·本研究的目的意义 | 第19-20页 |
·技术路线 | 第20-21页 |
2 材料和方法 | 第21-32页 |
·试验材料与试剂 | 第21-22页 |
·供试材料 | 第21页 |
·主要的仪器 | 第21页 |
·试剂 | 第21-22页 |
·试验方法 | 第22-32页 |
·染色体标本的制备 | 第22-23页 |
·载玻片的洗涤和包被 | 第22页 |
·材料的采集、处理及染色体标本的制备 | 第22-23页 |
·橡胶树DNA提取 | 第23-24页 |
·橡胶树DNA提取 | 第23-24页 |
·DNA质量检测 | 第24页 |
·特异引物合成与筛选 | 第24-26页 |
·特异PCR引物的设计与合成 | 第24-25页 |
·特异PCR反应体系及扩增程序 | 第25页 |
·PCR产物的回收纯化 | 第25-26页 |
·测序及序列比对 | 第26页 |
·FISH技术流程 | 第26-29页 |
·探针DNA的扩增及纯化 | 第26页 |
·探针的标记、检测与纯化 | 第26-28页 |
·FISH及信号检测 | 第28-29页 |
·原位PCR技术流程 | 第29-31页 |
·信号位置的确定 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-53页 |
·基因特异DNA序列的扩增与分析 | 第32-40页 |
·基因组DNA的提取 | 第32页 |
·基因特异DNA序列的PCR扩增与测序结果 | 第32-40页 |
·探针标记检测 | 第40-41页 |
·功能基因的染色体定位分析 | 第41-53页 |
·HMGRl基因的FISH检测与定位分析 | 第41-43页 |
·GGPS和V-PPase基因的双色FISH检测与定位分析 | 第43-44页 |
·HRT基因家族的染色体定位分析 | 第44-53页 |
·HRT1和HRT2基因的双色FISH检测与定位分析 | 第44-46页 |
·HPT3和HCPT-3基因的双色FISH、原位PCR检测与定位分析 | 第46-49页 |
·HBCPT基因的FISH和原位PCR检测与定位分析 | 第49-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
·染色体标本制备的探讨 | 第53页 |
·FISH信号问题 | 第53-54页 |
·FISH检测的灵敏度 | 第54页 |
·基因家族成员原位杂交的相互影响问题 | 第54-55页 |
·关于HRT1基因与RT基因的定位 | 第55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
附录 | 第63-65页 |
缩略语 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |