| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-24页 |
| ·双因子调控系统概述 | 第10-13页 |
| ·双因子调控系统的发现 | 第11-12页 |
| ·双因子调控系统的种类 | 第12-13页 |
| ·GacS/GacA双因子调控系统分子调控机制 | 第13-14页 |
| ·GacS/GacA双因子调控基本特征 | 第13-14页 |
| ·GacS/GacA双因子分子调控机制 | 第14页 |
| ·双因子调控系统研究概况 | 第14-16页 |
| ·双因子调控系统与细菌表型的关系 | 第14-15页 |
| ·双因子调控系统调控细菌游动行为 | 第15-16页 |
| ·双因子调控系统与细菌生防关系 | 第16-17页 |
| ·双因子调控系统调控细菌生物防治 | 第16-17页 |
| ·小RNA研究进展 | 第17-19页 |
| ·小RNA的发现 | 第18页 |
| ·小RNA的特征 | 第18页 |
| ·小RNA的功能 | 第18页 |
| ·小RNA的作用机制 | 第18-19页 |
| ·基因敲除技术研究进展 | 第19-21页 |
| ·基因敲除技术概述 | 第19页 |
| ·基因敲除主要方法 | 第19-21页 |
| ·水生拉恩氏菌ML12概况 | 第21-22页 |
| ·ML12生防细菌概况 | 第21页 |
| ·ML12细菌基因组基因研究概况 | 第21-22页 |
| ·本课题选题依据,研究目的及意义 | 第22-24页 |
| ·本研究选题依据 | 第22页 |
| ·本研究研究目的 | 第22页 |
| ·本研究研究内容 | 第22-23页 |
| ·本研究技术路线 | 第23页 |
| ·本研究拟解决的关键问题及创新点 | 第23-24页 |
| 第二章 ML12菌株gacA、csrB自杀载体构建及突变体获得 | 第24-49页 |
| 1 材料与方法 | 第24-38页 |
| ·供试菌株、质粒及引物 | 第24-25页 |
| ·实验仪器设备 | 第25-26页 |
| ·实验所用培养基 | 第26-27页 |
| ·实验所用抗生素及其浓度 | 第27页 |
| ·实验所需化学试剂 | 第27-28页 |
| ·实验所用引物合成及序列分析软件 | 第28页 |
| ·实验所用各种缓冲液及相关药品配制方法 | 第28-29页 |
| ·CTAB法小量提取细菌基因组DNA | 第29页 |
| ·质粒DNA提取及纯化 | 第29-30页 |
| ·酶切反应体系及连接反应体系 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌DH5α、DH5αλ-pir感受态细胞的小量制备 | 第31页 |
| ·质粒热击转化 | 第31-32页 |
| ·克隆产物菌落PCR鉴定 | 第32页 |
| ·重组质粒酶切验证 | 第32页 |
| ·三亲杂交(获得第一次重组子) | 第32-33页 |
| ·突变体筛选(获得第二次重组子) | 第33页 |
| ·反应调控因子gacA和小RNA csrB在细菌ML12染色体上的定位 | 第33-38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-49页 |
| ·gacA缺失突变体构建 | 第38-43页 |
| ·小RNA csrB缺失突变体构建 | 第43-47页 |
| ·结论与讨论 | 第47-49页 |
| 第三章 ML12菌株gacA、csrB缺失突变体生物学性状检测 | 第49-65页 |
| 1 材料与方法 | 第49-52页 |
| ·实验供试菌株 | 第49页 |
| ·接种病原菌的植物材料 | 第49-50页 |
| ·细菌菌落形态变化 | 第50页 |
| ·细菌培养液pH检测 | 第50页 |
| ·生物膜(biofilm)定性和定量检测 | 第50页 |
| ·细菌泳动(swimming)和群集(swarming) | 第50-51页 |
| ·室内平板拮抗效果检测 | 第51页 |
| ·温室防治向日葵根癌病效果检测 | 第51页 |
| ·植物促生作用检测 | 第51页 |
| ·细菌对病原真菌番茄灰霉的拮抗效果检测 | 第51-52页 |
| ·细菌溶磷能力的定性检测 | 第52页 |
| ·数据统计分析 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-62页 |
| ·ML12菌株gacA、csrB缺失突变体菌落形态差异 | 第52页 |
| ·ML12菌株gacA、csrB缺失突变体培养液pH值变化 | 第52-53页 |
| ·ML12菌株gacA、csrB缺失突变体形成生物膜能力比较 | 第53-54页 |
| ·ML12菌株gacA、csrB缺失突变体泳动和群集能力比较 | 第54-56页 |
| ·ML12菌株gacA、csrB缺失突变体对根癌菌C58拮抗作用 | 第56-58页 |
| ·ML12菌株gacA、csrB缺失突变体防治向日葵根癌病效果检测 | 第58页 |
| ·ML12菌株gacA、csrB缺失突变体对番茄灰霉拮抗作用检测 | 第58-59页 |
| ·ML12菌株gacA、csrB缺失突变体对向日葵促生作用 | 第59-60页 |
| ·ML12菌株gacA、csrB缺失突变体溶磷能力定性检测 | 第60-62页 |
| 3 结论与讨论 | 第62-65页 |
| 第四章 总结 | 第65-66页 |
| 1 研究小结 | 第65页 |
| 2 后期研究展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简介 | 第74-75页 |
| 附录 | 第75-80页 |
