| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-16页 |
| ·叶绿素 | 第9-10页 |
| ·叶绿素的生物合成及相关酶基因的克隆 | 第10-12页 |
| ·谷氨酸→胆色素原 | 第11页 |
| ·胆色素原→原卟啉Ⅸ | 第11-12页 |
| ·原卟啉Ⅸ→叶绿素酸酯 a | 第12页 |
| ·叶绿素酸酯 a→叶绿素 a 和叶绿素 b | 第12页 |
| ·原叶绿素酸酯氧化还原酶(POR) | 第12-13页 |
| ·原叶绿素酸酯氧化还原酶的生物学功能 | 第12-13页 |
| ·原叶绿素酸酯氧化还原酶基因的研究进展 | 第13页 |
| ·叶绿素酸酯 a 氧化酶（CAO） | 第13-14页 |
| ·叶绿素酸酯 a 氧化酶的生物学功能 | 第13-14页 |
| ·叶绿素酸酯 a 氧化酶基因的研究进展 | 第14页 |
| ·研究目的与意义 | 第14-15页 |
| ·技术路线 | 第15-16页 |
| 第二章 原叶绿素酸酯氧化还原酶基因和叶绿素酸酯 A 氧化酶基因的克隆与序列分析 | 第16-42页 |
| ·试验材料 | 第16-18页 |
| ·植物材料与菌株 | 第16页 |
| ·仪器与试剂 | 第16页 |
| ·基因克隆引物设计 | 第16-18页 |
| ·试验方法 | 第18-28页 |
| ·总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第18-19页 |
| ·基因保守区序列的 RT-PCR 扩增 | 第19-20页 |
| ·5' RACE 扩增 PjPORB 和 PjCAO 基因 5'端序列 | 第20-24页 |
| ·3' RACE 扩增 PjPORB 和 PjCAO 基因 3'端序列 | 第24-25页 |
| ·PjPORB 和 PjCAO 基因 ORF 的扩增 | 第25-26页 |
| ·PCR 产物回收 | 第26页 |
| ·回收产物与载体连接 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第26-27页 |
| ·连接产物转化及阳性克隆筛选 | 第27页 |
| ·菌检及测序 | 第27页 |
| ·基因序列生物学信息学分析 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-40页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第28页 |
| ·基因保守区的扩增 | 第28-29页 |
| ·基因 5’ RACE | 第29-30页 |
| ·基因 3’RACE | 第30-32页 |
| ·基因 ORF 区的扩增 | 第32-36页 |
| ·基因的序列分析 | 第36-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 PJPORB 和 PJCAO 基因的时空表达谱 | 第42-48页 |
| ·试验材料 | 第42-43页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·仪器与试剂 | 第42-43页 |
| ·定量 RT-PCR 引物设计 | 第43页 |
| ·试验方法 | 第43-44页 |
| ·提取总 RNA | 第43页 |
| ·cDNA 链的合成 | 第43页 |
| ·实时定量 RT-PCR | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-46页 |
| ·PjPORB 基因表达分析 | 第44-45页 |
| ·PjCAO 基因表达分析 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 农杆菌介导 PJPORB 和 PJCAO 基因遗传转化拟南芥 | 第48-63页 |
| ·试验材料 | 第48-49页 |
| ·植物材料与菌株 | 第48页 |
| ·试剂与仪器设备 | 第48页 |
| ·植物表达载体构建引物的设计 | 第48-49页 |
| ·试验方法 | 第49-55页 |
| ·质粒的提取 | 第49-50页 |
| ·ORF 区酶切位点的添加 | 第50页 |
| ·基因和 pC1301 的限制性酶切处理 | 第50-51页 |
| ·酶切产物的回收 | 第51-52页 |
| ·酶切产物的连接 | 第52页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌及阳性克隆筛选 | 第52页 |
| ·菌检及测序 | 第52页 |
| ·电击法农杆菌感受态的制备 | 第52-53页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌及阳性克隆筛选 | 第53页 |
| ·农杆菌菌液提取质粒及 PCR 验证 | 第53页 |
| ·拟南芥植株的培养 | 第53-54页 |
| ·浸花法介导拟南芥的遗传转化 | 第54页 |
| ·转基因种子的筛选 | 第54页 |
| ·转基因再生植株的验证 | 第54-55页 |
| ·纯系转基因植株的获得 | 第55页 |
| ·转基因植株叶绿素含量 (SPAD 值)的测定 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-61页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第55-58页 |
| ·转基因种子的抗性筛选 | 第58-59页 |
| ·转基因再生植株的验证 | 第59-61页 |
| ·T1 代转基因再生植株的获得 | 第61页 |
| ·T1 代转基因植株的叶绿素含量(SPAD 值) | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 结论与展望 | 第63-65页 |
| ·研究结论 | 第63页 |
| ·研究展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 个人简介 | 第68-69页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
