| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-16页 |
| ·杉木研究进展 | 第11-12页 |
| ·杉木的生物学特性及其分布 | 第11页 |
| ·杉木遗传育种研究进展 | 第11-12页 |
| ·木材形成分子机制研究进展 | 第12-15页 |
| ·木质素的生物合成 | 第13页 |
| ·木质素生物合成的转录调控 | 第13-15页 |
| ·MYB 类转录因子 | 第13-14页 |
| ·其他转录因子 | 第14-15页 |
| ·研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 第二章 杉木转录组序列测定及其特征分析 | 第16-23页 |
| ·材料与方法 | 第16-17页 |
| ·植物材料和 RNA 提取 | 第16页 |
| ·测序文库的构建和转录组测序 | 第16页 |
| ·数据过滤和 de novo 拼接 | 第16-17页 |
| ·功能注释及分类 | 第17页 |
| ·代谢途径功能基因的分析 | 第17页 |
| ·结果与分析 | 第17-21页 |
| ·Illumina 双端测序和 de novo 拼接 | 第17-19页 |
| ·转录物功能注释及分类 | 第19-21页 |
| ·代谢途径功能基因的分析 | 第21页 |
| ·讨论 | 第21-23页 |
| 第三章 杉木 R2R3-MYB 基因克隆及序列分析 | 第23-34页 |
| ·材料与方法 | 第23-28页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第23页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 RNA | 第23-24页 |
| ·反转录 cDNA 第一链的合成 | 第24-25页 |
| ·目的基因全长 cDNA 的分离 | 第25-28页 |
| ·5' RACE 及 3' RACE | 第26页 |
| ·ClMYB 序列的验证 | 第26-27页 |
| ·凝胶回收 | 第27页 |
| ·连接反应 | 第27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第27-28页 |
| ·序列测定 | 第28页 |
| ·序列比较和分析 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-32页 |
| ·15 个 ClMYB 全长 cDNA 序列的分离 | 第28-29页 |
| ·ClMYB 全长 cDNA 的序列分析 | 第29-30页 |
| ·ClMYB 基因家族的进化树分析 | 第30-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第四章 杉木 ClMYB 基因的表达分析 | 第34-45页 |
| ·材料与方法 | 第34-36页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·激素处理 | 第34页 |
| ·应压木诱导处理 | 第34-35页 |
| ·总 RNA 的提取及 cDNA 第 1 链的合成 | 第35-36页 |
| ·ClMYB 基因组织特异性表达分析 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-43页 |
| ·不同器官和组织中 ClMYB 的表达差异 | 第36-39页 |
| ·不同木质部区域中 ClMYB1、 ClMYB2 的表达差异 | 第39页 |
| ·激素处理对 ClMYB1、 ClMYB2 表达的影响 | 第39-40页 |
| ·应压木形成中 ClMYB1、ClMYB2 的表达差异 | 第40-41页 |
| ·ClMYB1、 ClMYB2 与木质素合成相关酶的相关性分析 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 杉木 ClMYB1、ClMYB2 基因超表达载体的构建及烟草转化 | 第45-54页 |
| ·材料与方法 | 第45-50页 |
| ·菌株和质粒 | 第45页 |
| ·超表达载体的构建和鉴定 | 第45-47页 |
| ·重组农杆菌工程菌株获得 | 第47-48页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第47-48页 |
| ·重组质粒转化农杆菌感受态细胞及筛选鉴定 | 第48页 |
| ·农杆菌介导的烟草叶盘侵染 | 第48-49页 |
| ·农杆菌培养 | 第48页 |
| ·侵染 | 第48页 |
| ·共培养 | 第48页 |
| ·选择培养 | 第48-49页 |
| ·生根培养 | 第49页 |
| ·土壤种植 | 第49页 |
| ·转基因阳性植株的鉴定 | 第49-50页 |
| ·CTAB 法提取烟草 DNA 鉴定 | 第49页 |
| ·TRIzol 法提取烟草幼叶 RNA 鉴定 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-53页 |
| ·超表达载体的鉴定 | 第50页 |
| ·质粒 PCR 鉴定 | 第50页 |
| ·酶切鉴定 | 第50页 |
| ·测序鉴定结果 | 第50页 |
| ·转基因阳性植株的鉴定 | 第50-51页 |
| ·DNA 水平的 PCR 检测 | 第51页 |
| ·RNA 水平的 PCR 检测 | 第51页 |
| ·转基因烟草表型观察 | 第51-52页 |
| ·转基因烟草切片观察 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| 结论与展望 | 第54-56页 |
| ·主要研究成果 | 第54-55页 |
| ·研究展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
| 个人简介 | 第65页 |
| 论文发表情况 | 第65页 |
| 社会实践及学术交流活动 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
