摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
目录 | 第8-10页 |
引言 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-20页 |
·植物激素对嫁接的调控作用 | 第11-12页 |
·植物生长素响应因子(ARF)基因的研究进展 | 第12-20页 |
·ARF 的结构特征 | 第12-17页 |
·ARF 的生物学功能 | 第17-18页 |
·ARF 的调控机制 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-33页 |
·材料准备 | 第20-21页 |
·植物材料 | 第20-21页 |
·主要仪器 | 第21页 |
·试剂及来源 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-33页 |
·总 RNA 的提取 | 第21-23页 |
·Trizol 法 | 第21-22页 |
·RNAiso Plus 法 | 第22页 |
·改良 CTAB+Trizol 法 | 第22-23页 |
·总 RNA 提取质量检测 | 第23页 |
·CcARF 基因验证 | 第23-27页 |
·引物设计 | 第24页 |
·第一链 cDNA 的扩增 | 第24页 |
·PCR 扩增 | 第24-25页 |
·阳性片段回收 | 第25页 |
·PCR 回收产物与 PMD18-T 载体连接 | 第25-26页 |
·连接产物转化 | 第26页 |
·细菌培养与验证 | 第26页 |
·质粒提取 | 第26-27页 |
·序列分析 | 第27页 |
·CcARF 基因生物信息学分析 | 第27页 |
·CcARF 基因在转录水平表达分析 | 第27-29页 |
·不同嫁接时期山核桃嫁接茎总 RNA 的提取 | 第27页 |
·内参与基因引物设计 | 第27页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第27-28页 |
·引物与模板的验证 | 第28页 |
·Real Time RT-PCR | 第28-29页 |
·CcARF 基因在翻译水平表达分析 | 第29-31页 |
·山核桃蛋白提取 | 第29页 |
·蛋白检测 | 第29页 |
·Western blot | 第29-31页 |
·吲哚乙酸氧化酶活性的测定 | 第31-33页 |
·山核桃嫁接后不同时期不同激素处理砧木与接穗 IAA 氧化酶液提取 | 第31页 |
·标准曲线制作 | 第31页 |
·酶活性检测 | 第31-32页 |
·酶活性计算公式 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-53页 |
·山核桃总 RNA 不同方法提取比较分析 | 第33-34页 |
·CcARF 基因验证分析 | 第34-40页 |
·PCR 扩增 | 第34页 |
·菌液验证 | 第34-35页 |
·质粒提取 | 第35页 |
·CcARF 基因序列分析 | 第35-37页 |
·CcARF 基因序列生物信息学分析 | 第37-40页 |
·CcARF 的氨基酸组成及理化性质 | 第37-38页 |
·CcARF 的跨膜分析 | 第38页 |
·CcARF 基因的同源性分析与系统进化树构建 | 第38-40页 |
·CcARF 基因在转录水平表达分析 | 第40-48页 |
·山核桃嫁接茎的总 RNA | 第40-42页 |
·模板与引物验证 | 第42-43页 |
·CcARF 在山核桃嫁接的不同时期不同激素处理的表达分析 | 第43-48页 |
·CcARF 基因在翻译水平表达分析 | 第48-49页 |
·吲哚乙酸氧化酶活性分析 | 第49-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
5 结论与展望 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
附录 | 第61-62页 |
作者简介 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |