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CcARF基因在山核桃嫁接过程中的功能分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
目录第8-10页
引言第10-11页
1 文献综述第11-20页
   ·植物激素对嫁接的调控作用第11-12页
   ·植物生长素响应因子(ARF)基因的研究进展第12-20页
     ·ARF 的结构特征第12-17页
     ·ARF 的生物学功能第17-18页
     ·ARF 的调控机制第18-20页
2 材料与方法第20-33页
   ·材料准备第20-21页
     ·植物材料第20-21页
     ·主要仪器第21页
     ·试剂及来源第21页
   ·实验方法第21-33页
     ·总 RNA 的提取第21-23页
       ·Trizol 法第21-22页
       ·RNAiso Plus 法第22页
       ·改良 CTAB+Trizol 法第22-23页
     ·总 RNA 提取质量检测第23页
     ·CcARF 基因验证第23-27页
       ·引物设计第24页
       ·第一链 cDNA 的扩增第24页
       ·PCR 扩增第24-25页
       ·阳性片段回收第25页
       ·PCR 回收产物与 PMD18-T 载体连接第25-26页
       ·连接产物转化第26页
       ·细菌培养与验证第26页
       ·质粒提取第26-27页
       ·序列分析第27页
     ·CcARF 基因生物信息学分析第27页
     ·CcARF 基因在转录水平表达分析第27-29页
       ·不同嫁接时期山核桃嫁接茎总 RNA 的提取第27页
       ·内参与基因引物设计第27页
       ·cDNA 第一链的合成第27-28页
       ·引物与模板的验证第28页
       ·Real Time RT-PCR第28-29页
     ·CcARF 基因在翻译水平表达分析第29-31页
       ·山核桃蛋白提取第29页
       ·蛋白检测第29页
       ·Western blot第29-31页
     ·吲哚乙酸氧化酶活性的测定第31-33页
       ·山核桃嫁接后不同时期不同激素处理砧木与接穗 IAA 氧化酶液提取第31页
       ·标准曲线制作第31页
       ·酶活性检测第31-32页
       ·酶活性计算公式第32-33页
3 结果与分析第33-53页
   ·山核桃总 RNA 不同方法提取比较分析第33-34页
   ·CcARF 基因验证分析第34-40页
     ·PCR 扩增第34页
     ·菌液验证第34-35页
     ·质粒提取第35页
     ·CcARF 基因序列分析第35-37页
     ·CcARF 基因序列生物信息学分析第37-40页
       ·CcARF 的氨基酸组成及理化性质第37-38页
       ·CcARF 的跨膜分析第38页
       ·CcARF 基因的同源性分析与系统进化树构建第38-40页
   ·CcARF 基因在转录水平表达分析第40-48页
     ·山核桃嫁接茎的总 RNA第40-42页
     ·模板与引物验证第42-43页
     ·CcARF 在山核桃嫁接的不同时期不同激素处理的表达分析第43-48页
   ·CcARF 基因在翻译水平表达分析第48-49页
   ·吲哚乙酸氧化酶活性分析第49-53页
4 讨论第53-55页
5 结论与展望第55-57页
参考文献第57-61页
附录第61-62页
作者简介第62-63页
致谢第63页

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