| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-30页 |
| ·类胡萝卜素 | 第13-24页 |
| ·类胡萝卜素的普遍存在性 | 第13-14页 |
| ·类胡萝卜素的结构 | 第14-15页 |
| ·类胡萝卜素的营养与健康 | 第15-18页 |
| ·类胡萝卜素的合成 | 第18-22页 |
| ·类胡萝卜素的外源表达 | 第22-24页 |
| ·杜氏藻 | 第24-28页 |
| ·抗逆境和类胡萝卜素合成研究模式生物——杜氏藻 | 第24-25页 |
| ·杜氏藻类胡萝卜素的合成 | 第25-26页 |
| ·杜氏藻类胡萝卜素合成的调节机理 | 第26-27页 |
| ·杜氏藻是类胡萝卜素表达的有效宿主细胞 | 第27-28页 |
| ·本论文的研究内容和意义 | 第28-30页 |
| 第二章 杜氏藻类胡萝卜素合成代谢关键酶基因cDNA的分子克隆 | 第30-65页 |
| ·实验材料与仪器 | 第30-34页 |
| ·藻种和菌种 | 第30-31页 |
| ·实验试剂与测试服务 | 第31页 |
| ·培养基和试剂配制 | 第31-34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-52页 |
| ·杜氏藻的培养 | 第34页 |
| ·杜氏藻总RNA(DNA free)的提取 | 第34-36页 |
| ·杜氏盐藻DsPSY和巴氏杜氏藻DbPSY基因cDNA的克隆 | 第36-42页 |
| ·杜氏盐藻DsPDS和巴氏杜氏藻DbPDS基因cDNA的克隆 | 第42-46页 |
| ·杜氏盐藻DsLCY-B和巴氏杜氏藻DbLCY-B基因cDNA的克隆 | 第46-48页 |
| ·杜氏盐藻DsZDS和巴氏杜氏藻DbZDS基因cDNA的克隆 | 第48-52页 |
| ·实验结果与分析讨论 | 第52-63页 |
| ·杜氏盐藻和巴氏杜氏藻的总RNA | 第52页 |
| ·DsPSY和DbPSY基因cDNA的克隆 | 第52-54页 |
| ·DsPDS和DbPDS基因cDNA的克隆 | 第54-57页 |
| ·DsLCY-B和DbLCY-B基因cDNA的克隆 | 第57-59页 |
| ·DsZDS和DbZDS基因cDNA的克隆 | 第59-63页 |
| ·本章小结 | 第63-65页 |
| 第三章 杜氏藻类胡萝卜素合成酶的生物信息学分析 | 第65-97页 |
| ·实验材料 | 第65页 |
| ·实验方法 | 第65-67页 |
| ·蛋白的功能分析 | 第65-66页 |
| ·cDNA序列及其对应的蛋白序列的物理化学性质分析 | 第66页 |
| ·同源性分析 | 第66页 |
| ·蛋白亚细胞定位预测 | 第66页 |
| ·蛋白二级结构、信号肽以及跨膜区分析 | 第66页 |
| ·蛋白高级结构预测 | 第66-67页 |
| ·实验结果与分析讨论 | 第67-94页 |
| ·杜氏藻类胡萝卜素合成酶的功能结构域分析 | 第67-76页 |
| ·杜氏藻类胡萝卜素合成酶基因cDNA和蛋白序列的物理化学性质 | 第76-81页 |
| ·杜氏藻类胡萝卜素合成酶基因cDNA和蛋白序列的同源性分析 | 第81-88页 |
| ·杜氏藻类胡萝卜素合成酶亚细胞定位预测 | 第88-91页 |
| ·杜氏藻类胡萝卜素合成酶二级结构及相关功能区的预测 | 第91页 |
| ·杜氏藻类胡萝卜素合成酶高级结构的预测 | 第91-94页 |
| ·本章小结 | 第94-97页 |
| 第四章 杜氏藻LCY-B的外源表达与培养条件的优化 | 第97-124页 |
| ·实验材料与试剂仪器 | 第97-100页 |
| ·质粒和宿主细胞 | 第97页 |
| ·实验试剂与测试服务 | 第97-98页 |
| ·培养基和试剂配制 | 第98-100页 |
| ·主要仪器设备 | 第100页 |
| ·实验方法 | 第100-108页 |
| ·重组质粒pACCRT-EIB-DbL的构建与表达 | 第100-104页 |
| ·pACCRT-EIB-DbL转化子类胡萝卜素的定性和定量分析 | 第104-106页 |
| ·pACCRT-EIB-DbL转化子累积β-胡萝卜素的生产工艺优化 | 第106-107页 |
| ·pACCRT-EIB-DbL转化子的发酵培养 | 第107-108页 |
| ·统计学分析 | 第108页 |
| ·实验结果与分析讨论 | 第108-123页 |
| ·质粒的构建与表达 | 第108-111页 |
| ·转化子类胡萝卜素的定性和定量分析 | 第111-114页 |
| ·转化子累积β-胡萝卜素的生产工艺优化 | 第114-117页 |
| ·转化子的发酵产β-胡萝卜素 | 第117-123页 |
| ·本章小结 | 第123-124页 |
| 第五章 杜氏藻番茄红素外源表达系统的构建 | 第124-152页 |
| ·实验材料与试剂仪器 | 第124-125页 |
| ·质粒和宿主细胞 | 第124页 |
| ·实验试剂与测试服务 | 第124页 |
| ·试剂配制 | 第124-125页 |
| ·主要仪器设备 | 第125页 |
| ·实验方法 | 第125-136页 |
| ·质粒pPaEIDbS-Ⅰ的构建 | 第125-128页 |
| ·质粒pPaEBDbDZ-Ⅰ的构建 | 第128-130页 |
| ·质粒pPaEDbSDZ-Ⅰ的构建 | 第130-135页 |
| ·SDS-PAGE检测转化子蛋白表达 | 第135页 |
| ·转化子培养及类胡萝卜素产物的定性和定量分析 | 第135-136页 |
| ·统计学分析 | 第136页 |
| ·实验结果与讨论 | 第136-150页 |
| ·质粒构建 | 第136-142页 |
| ·转化子蛋白表达 | 第142-143页 |
| ·类胡萝卜素的定性和定量分析 | 第143-150页 |
| ·本章小结 | 第150-152页 |
| 第六章 杜氏藻β-胡萝卜素外源表达系统的构建 | 第152-179页 |
| ·实验材料与试剂仪器 | 第152-153页 |
| ·质粒和宿主细胞 | 第152页 |
| ·实验试剂与测试服务 | 第152-153页 |
| ·试剂配制 | 第153页 |
| ·主要仪器设备 | 第153页 |
| ·实验方法 | 第153-164页 |
| ·质粒pPaEIBY-Ⅰ的构建 | 第153-155页 |
| ·质粒pPaEIBDbL-Ⅰ的构建 | 第155-156页 |
| ·质粒pPaEIDbSL-Ⅰ的构建 | 第156-158页 |
| ·质粒pPaEDbSDZL-Ⅰ的构建 | 第158-159页 |
| ·质粒pPaEIYDbS-Ⅰ的构建 | 第159-160页 |
| ·质粒pPaEYDbSDZ-Ⅰ的构建 | 第160-161页 |
| ·质粒pPaEBYDbDZ-Ⅰ的构建 | 第161-162页 |
| ·质粒pPaEBDbDZL-Ⅰ的构建 | 第162-164页 |
| ·SDS-PAGE检测转化子蛋白表达 | 第164页 |
| ·转化子培养及类胡萝卜素产物的定性和定量分析 | 第164页 |
| ·统计学分析 | 第164页 |
| ·实验结果与讨论 | 第164-177页 |
| ·质粒构建 | 第164-172页 |
| ·转化子蛋白表达 | 第172-173页 |
| ·类胡萝卜素的定性和定量分析 | 第173-177页 |
| ·本章小结 | 第177-179页 |
| 结论与展望 | 第179-185页 |
| 参考文献 | 第185-208页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第208-210页 |
| 致谢 | 第210-211页 |
| 答辩委员会对论文的评定意见 | 第211页 |
