| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-15页 |
| ·SDF-1的结构 | 第9-10页 |
| ·SDF-1的生物学功能 | 第10-14页 |
| ·SDF-1与干细胞治疗缺氧缺血性脑损伤 | 第10-12页 |
| ·SDF-1与肿瘤 | 第12-13页 |
| ·SDF-1与器官发生及胚胎发育 | 第13页 |
| ·SDF-1与炎症性疾病 | 第13-14页 |
| ·SDF-1与HIV感染 | 第14页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第14-15页 |
| 第二章 非融合重组载体pET-15b-SDF1α的构建 | 第15-31页 |
| ·实验思路 | 第15-18页 |
| ·原核表达载体的构成元件及pET系列载体 | 第15-16页 |
| ·重组子的构建 | 第16-18页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·菌种与质粒 | 第18页 |
| ·试剂 | 第18页 |
| ·仪器设备 | 第18-19页 |
| ·培养基及主要试剂配制 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-23页 |
| ·hSDF-1αcDNA序列PCR引物设计与合成 | 第19页 |
| ·hSDF-1α基因的PCR扩增及胶回收 | 第19-21页 |
| ·pET15b质粒DNA的小量制备 | 第21页 |
| ·双酶切PCR产物和载体质粒pET15b | 第21-22页 |
| ·目的片段与载体质粒pET15b的连接 | 第22页 |
| ·DH5a感受态细胞的制备 | 第22页 |
| ·连接体系pET-15b-SDF1α转化大肠杆菌感受态细胞DH5a | 第22-23页 |
| ·重组质粒的提取及双酶切鉴定 | 第23页 |
| ·重组质粒测序鉴定 | 第23页 |
| ·实验结果及讨论 | 第23-30页 |
| ·hSDF-1α基因的PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·PCR产物的胶回收 | 第24-25页 |
| ·双酶切PCR产物和载体质粒pET15b并胶回收 | 第25-27页 |
| ·双酶切的目的基因与载体连接前鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的连接和转化 | 第28页 |
| ·重组质粒的双酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组质粒测序鉴定 | 第29-30页 |
| ·本章小结 | 第30-31页 |
| 第三章 重组蛋白hSDF-1α的诱导表达及初步分离纯化 | 第31-46页 |
| ·实验思路 | 第31-36页 |
| ·pET系列载体宿主的选择 | 第31页 |
| ·包涵体形式存在的重组蛋白的处理 | 第31-33页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第33-36页 |
| ·实验材料 | 第36-39页 |
| ·菌种及层析柱 | 第36页 |
| ·实验试剂 | 第36-37页 |
| ·仪器设备 | 第37页 |
| ·培养基及主要试剂配制 | 第37-39页 |
| ·实验方法 | 第39-42页 |
| ·菌种BL21(DE3)的培养及诱导表达 | 第39页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白的表达形式鉴定 | 第40页 |
| ·包涵体的制备和洗涤 | 第40页 |
| ·包涵体的变性和复性 | 第40页 |
| ·重组蛋白hSDF-1α的纯化 | 第40-41页 |
| ·重组蛋白hSDF-1α的脱盐及冻干 | 第41-42页 |
| ·实验结果与讨论 | 第42-45页 |
| ·重组菌E.Coli BL21(DE3)/pET15b-SDF-1α的表达分析 | 第42-43页 |
| ·重组蛋白hSDF-1α的初步分离纯化 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白hSDF-1α的脱盐 | 第44-45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 第四章 重组蛋白hSDF-1α的活性鉴定 | 第46-50页 |
| ·实验思路 | 第46-47页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·细胞和试剂 | 第47页 |
| ·仪器设备 | 第47页 |
| ·培养基及试剂配制 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-48页 |
| ·THP-1细胞的复苏 | 第47页 |
| ·THP-1细胞的传代培养 | 第47-48页 |
| ·重组hSDF-1α的活性鉴定 | 第48页 |
| ·实验结果与讨论 | 第48-49页 |
| ·THP-1细胞的培养 | 第48页 |
| ·重组hSDF-1α的活性鉴定结果 | 第48-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
