摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
引言 | 第8-19页 |
1 研究背景 | 第8-15页 |
·黑曲霉 | 第8-9页 |
·真菌中的异戊烯基化吲哚生物碱 | 第9-10页 |
·吲哚类异戊烯基转移酶 | 第10-15页 |
·酶法合成异戊烯基化芳香化合物的潜在应用前景 | 第15页 |
2 本研究工作的总体思路 | 第15-17页 |
中英文缩略词表 | 第17-19页 |
第一章 材料与方法 | 第19-35页 |
1 材料 | 第19-22页 |
·菌株 | 第19页 |
·质粒 | 第19页 |
·工具酶与主要试剂 | 第19页 |
·主要溶液及配制 | 第19-21页 |
·主要仪器设备 | 第21-22页 |
2 方法 | 第22-35页 |
·基因克隆 | 第22-28页 |
·蛋白表达 | 第28-32页 |
·酶功能研究 | 第32-35页 |
第二章 结果与分析 | 第35-61页 |
1 黑曲霉中异戊烯基转移酶基因的克隆 | 第35-42页 |
·黑曲霉gDNA的提取 | 第35页 |
·异戊烯基转移酶基因(An13g01840)的克隆 | 第35-38页 |
·验证目的基因的编码序列 | 第38-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
2 目的蛋白的诱导表达 | 第42-53页 |
·在大肠杆菌中诱导表达 | 第43-49页 |
·在酿酒酵母中的诱导表达 | 第49-51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
3 蛋白功能研究 | 第53-60页 |
·酶功能鉴定 | 第53-56页 |
·酶学性质研究 | 第56-58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
4 总结与展望 | 第60-61页 |
·总结 | 第60页 |
·展望 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
附录 | 第65-78页 |
附录Ⅰ 研究工作中涉及的质粒 | 第66-67页 |
附录Ⅱ 同来源An13g01840编码蛋白的氨基酸序列的比对分析 | 第67-68页 |
附录Ⅲ 导表达SDS-PAGE分析图 | 第68-74页 |
附录Ⅲ-1 phC11在E.coli XL1 Blue中诱导表达的SDS-PAGE分析 | 第68-69页 |
附录Ⅲ-2 pHC12在E.coli M15中诱导表达的SDS-PAGE分析 | 第69-70页 |
附录Ⅲ-3 pHC13在E.coli XL1 Blue中诱导表达的SDS-PAGE分析 | 第70-71页 |
附录Ⅲ-4 pHC14在E.coli SoluBL21中诱导表达的SDS-PAGE分析 | 第71-72页 |
附录Ⅲ-5 pHC15在E.coli SoluBL21中诱导表达的SDS-PAGE分析 | 第72-73页 |
附录Ⅲ-6 pHC16在E.coli SoluBL21中诱导表达的SDS-PAGE分析 | 第73-74页 |
附录Ⅳ 受试底物的化学结构式 | 第74-75页 |
附录Ⅴ 受试底物的酶反应全产物HPLC分析图谱 | 第75-76页 |
附录Ⅵ 真菌来源吲哚类异戊烯基转移酶氨基酸序列的对比分析 | 第76-78页 |
在校期间发表的学术论文 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |