| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-21页 |
| 第一章 文献综述 | 第21-44页 |
| ·土壤重金属污染及危害 | 第21-23页 |
| ·土壤重金属污染的标准 | 第21-22页 |
| ·土壤重金属污染的危害 | 第22-23页 |
| ·土壤重金属污染的修复方法 | 第23-30页 |
| ·植物修复 | 第25页 |
| ·微生物修复 | 第25-26页 |
| ·木霉菌修复铜污染 | 第26-30页 |
| ·细胞铜代谢机理研究 | 第30-39页 |
| ·铜的跨膜运输 | 第31-34页 |
| ·胞内铜转运 | 第34-37页 |
| ·细胞内铜毒性解除 | 第37页 |
| ·宏基因组学方法应用于铜代谢相关基因的研究 | 第37-39页 |
| ·腺嘌呤脱氨酶研究进展 | 第39-42页 |
| ·酶胺水解酶家族概述 | 第39-40页 |
| ·腺嘌呤脱氨酶研究进展 | 第40-41页 |
| ·次黄嘌呤、黄嘌呤铜复合物 | 第41-42页 |
| ·本研究的意义、主要研究内容 | 第42-44页 |
| 第二章 里氏木霉ATMT突变株构建及高吸附铜突变株筛选 | 第44-56页 |
| ·材料与方法 | 第44页 |
| ·菌株、质粒、试剂 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-53页 |
| ·铜对野生株致死浓度测定 | 第44-45页 |
| ·ATMT 构建高耐受铜突变株方法的改进 | 第45-48页 |
| ·突变株 AT01 铜吸附特性研究 | 第48-51页 |
| ·AT01 铜吸附的亚细胞观察 | 第51-53页 |
| ·结论与讨论 | 第53-56页 |
| ·优化后的 ATMT 方法大提高了目标突变株的构建效率 | 第53-55页 |
| ·液胞是木霉菌吸附铜的重要亚细胞结构 | 第55-56页 |
| 第三章 里氏木霉菌吸附铜相关基因 Tad1 克隆与功能分析 | 第56-67页 |
| ·材料与方法 | 第56页 |
| ·菌株、质粒、试剂 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-65页 |
| ·T-DNA 插入侧翼序列的扩增 | 第56-59页 |
| ·Tad1 原核表达分析 | 第59-62页 |
| ·酶活测定 | 第62-63页 |
| ·Tad1 基因功能分析 | 第63-65页 |
| ·结论与讨论 | 第65-67页 |
| ·首次明确 Tad1 基因表达变化与木霉菌吸附铜密切相关 | 第65-66页 |
| ·T-DNA 整合导致 Tad1 基因表达上调 | 第66-67页 |
| 第四章 Tad1 基因调控铜吸附与铜代谢相关基因网络 | 第67-82页 |
| ·材料与方法 | 第67页 |
| ·菌株、质粒、试剂 | 第67页 |
| ·实验方法 | 第67页 |
| ·结果与分析 | 第67-80页 |
| ·差异基因表达分析 | 第67-69页 |
| ·表达上调基因分析 | 第69-70页 |
| ·胁迫应激相关基因 | 第70页 |
| ·铜代谢动态平衡调控相关基因 | 第70-71页 |
| ·嘌呤代谢相关基因 | 第71-73页 |
| ·RP-HPLC 测定胞内核苷浓度 | 第73-75页 |
| ·Tad1 基因调控里氏木霉胞内铜代谢网络 | 第75-76页 |
| ·部分跨膜转运及信号转导蛋白功能分析 | 第76-80页 |
| ·结论与讨论 | 第80-82页 |
| ·Tad1 基因过表达导致胞内铜离子浓度降低，引起细胞泵入铜离子 | 第80-81页 |
| ·基因芯片技术是揭示木霉菌调控铜代谢网络的重要工具 | 第81-82页 |
| 第五章 里氏木霉铜转运及代谢相关基因功能分析 | 第82-99页 |
| ·材料与方法 | 第82页 |
| ·菌株、质粒、试剂 | 第82页 |
| ·实验方法 | 第82页 |
| ·结果与分析 | 第82-97页 |
| ·里氏木霉 Tmac1 基因的克隆 | 第82-84页 |
| ·Tmac1 基因敲除子筛选及验证 | 第84-86页 |
| ·Tmac1 基因互补子及荧光定位突变株的筛选及验证 | 第86-87页 |
| ·Tmac1 基因表达水平 | 第87-88页 |
| ·Tmac1 基因功能分析 | 第88-90页 |
| ·Tmac1 基因调控的目标基因 Tctr3 的克隆 | 第90-91页 |
| ·Tctr3 蛋白功能分析 | 第91-92页 |
| ·胞内其它铜代谢相关蛋白功能分析 | 第92-97页 |
| ·结论与讨论 | 第97-99页 |
| ·首次证明在里氏木霉菌中存在酵母菌铜代谢系统 | 第97页 |
| ·Trace、Trccs、Tratx、Trcox 四个基因可作为监测胞内铜离子变化指标 | 第97-98页 |
| ·Mac1 和 Ace1 在酵母菌和木霉菌中调控铜代谢机理存在差异 | 第98-99页 |
| 第六章 全文总结与展望 | 第99-104页 |
| ·主要结论 | 第99-102页 |
| ·论文创新点 | 第102页 |
| ·展望 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-119页 |
| 攻读博士学位期间发表的论著与教材 | 第119-122页 |
| 一、攻读博士学位期间发表和拟发表论文 | 第119-120页 |
| 二、会议论文 | 第120-121页 |
| 三、教材编写 | 第121-122页 |
| 附录 实验仪器、设备与实验方法 | 第122-138页 |
| 一、实验耗材、仪器、设备 | 第122-123页 |
| 二、试剂 | 第123-124页 |
| 三、培养基 | 第124-126页 |
| 四、实验方法 | 第126-138页 |
| 致谢 | 第138页 |
