目录 | 第1-6页 |
CONTENTS | 第6-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 引言 | 第12-19页 |
·大豆疫霉根腐病的研究进展 | 第12-14页 |
·大豆疫霉根腐病的危害 | 第12页 |
·大豆疫霉菌的生物学特征及生理小种分化 | 第12-13页 |
·大豆疫霉根腐病抗性基因的研究 | 第13页 |
·大豆疫霉根腐病抗病育种的研究 | 第13-14页 |
·病程相关蛋白研究进展 | 第14-17页 |
·病程相关蛋白在植物中的表达模式 | 第15-16页 |
·病程相关蛋白的抑菌活性 | 第16页 |
·病程相关蛋白的抑菌机制 | 第16-17页 |
·研究的目的及意义 | 第17-18页 |
·技术路线 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-43页 |
·实验材料及试剂 | 第19页 |
·供试品种及菌种 | 第19页 |
·菌种及载体 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-43页 |
·病原菌的扩繁 | 第19页 |
·材料的培养与处理 | 第19-20页 |
·大豆总 RNA 的提取与纯化 | 第20页 |
·PR10 和 PRP 基因原核表达研究 | 第20-32页 |
·PR10 和 PRP 基因的亚细胞定位研究 | 第32-35页 |
·转基因烟草的抗病性鉴定 | 第35-36页 |
·大豆遗传转化及功能分析 | 第36-43页 |
3 结果与分析 | 第43-59页 |
·大豆总 RNA 的提取 | 第43页 |
·PR10 和 PRP 基因的原核表达分析 | 第43-50页 |
·目的基因的 PCR 扩增 | 第43-44页 |
·pMDTM18-T-PR10/PRP 载体构建 | 第44-45页 |
·重组表达载体 pET-29b(+)-PR10/PRP 的构建 | 第45-46页 |
·His-PR10/PRP 重组蛋白的诱导表达 | 第46-47页 |
·His-PR10/PRP 重组蛋白包涵体纯化 | 第47-48页 |
·His-PR10/PRP 融合蛋白的透析复性 | 第48-49页 |
·His-PR10/PRP 融合蛋白的浓度测定 | 第49页 |
·抑菌试验 | 第49-50页 |
·PR10 和 PRP 基因的亚细胞定位研究 | 第50-54页 |
·目的基因的 PCR 扩增 | 第50-51页 |
·重组表达载体 pCAMBIA3301-PR10/PRP 的构建 | 第51-52页 |
·重组载体转化农杆菌 | 第52-53页 |
·荧光显微镜观察洋葱表皮 | 第53-54页 |
·转基因烟草的抗病性鉴定 | 第54-55页 |
·T1代转基因烟草的 PCR 检测 | 第54-55页 |
·T1代转基因烟草的抗性鉴定 | 第55页 |
·大豆的遗传转化及功能分析 | 第55-59页 |
·子叶节法进行大豆遗传转化 | 第55-56页 |
·转基因植株的 PCR 检测 | 第56-57页 |
·转基因植株 Real time-PCR 检测 | 第57页 |
·转基因大豆的 Southern 杂交检测 | 第57-58页 |
·离体叶片接种法鉴定 T1代转基因大豆的抗病性 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-62页 |
·抗病相关蛋白与植物抗病性的关系 | 第59-60页 |
·PR10 和 PRP 蛋白的抑菌特性分析 | 第60页 |
·大豆遗传转化过程中出现的问题 | 第60-62页 |
5 结论 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第72页 |