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大豆疫霉根腐病抗性相关基因PR10和PRP功能的初步研究

目录第1-6页
CONTENTS第6-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 引言第12-19页
   ·大豆疫霉根腐病的研究进展第12-14页
     ·大豆疫霉根腐病的危害第12页
     ·大豆疫霉菌的生物学特征及生理小种分化第12-13页
     ·大豆疫霉根腐病抗性基因的研究第13页
     ·大豆疫霉根腐病抗病育种的研究第13-14页
   ·病程相关蛋白研究进展第14-17页
     ·病程相关蛋白在植物中的表达模式第15-16页
     ·病程相关蛋白的抑菌活性第16页
     ·病程相关蛋白的抑菌机制第16-17页
   ·研究的目的及意义第17-18页
   ·技术路线第18-19页
2 材料与方法第19-43页
   ·实验材料及试剂第19页
     ·供试品种及菌种第19页
     ·菌种及载体第19页
     ·主要试剂第19页
   ·实验方法第19-43页
     ·病原菌的扩繁第19页
     ·材料的培养与处理第19-20页
     ·大豆总 RNA 的提取与纯化第20页
     ·PR10 和 PRP 基因原核表达研究第20-32页
     ·PR10 和 PRP 基因的亚细胞定位研究第32-35页
     ·转基因烟草的抗病性鉴定第35-36页
     ·大豆遗传转化及功能分析第36-43页
3 结果与分析第43-59页
   ·大豆总 RNA 的提取第43页
   ·PR10 和 PRP 基因的原核表达分析第43-50页
     ·目的基因的 PCR 扩增第43-44页
     ·pMDTM18-T-PR10/PRP 载体构建第44-45页
     ·重组表达载体 pET-29b(+)-PR10/PRP 的构建第45-46页
     ·His-PR10/PRP 重组蛋白的诱导表达第46-47页
     ·His-PR10/PRP 重组蛋白包涵体纯化第47-48页
     ·His-PR10/PRP 融合蛋白的透析复性第48-49页
     ·His-PR10/PRP 融合蛋白的浓度测定第49页
     ·抑菌试验第49-50页
   ·PR10 和 PRP 基因的亚细胞定位研究第50-54页
     ·目的基因的 PCR 扩增第50-51页
     ·重组表达载体 pCAMBIA3301-PR10/PRP 的构建第51-52页
     ·重组载体转化农杆菌第52-53页
     ·荧光显微镜观察洋葱表皮第53-54页
   ·转基因烟草的抗病性鉴定第54-55页
     ·T1代转基因烟草的 PCR 检测第54-55页
     ·T1代转基因烟草的抗性鉴定第55页
   ·大豆的遗传转化及功能分析第55-59页
     ·子叶节法进行大豆遗传转化第55-56页
     ·转基因植株的 PCR 检测第56-57页
     ·转基因植株 Real time-PCR 检测第57页
     ·转基因大豆的 Southern 杂交检测第57-58页
     ·离体叶片接种法鉴定 T1代转基因大豆的抗病性第58-59页
4 讨论第59-62页
   ·抗病相关蛋白与植物抗病性的关系第59-60页
   ·PR10 和 PRP 蛋白的抑菌特性分析第60页
   ·大豆遗传转化过程中出现的问题第60-62页
5 结论第62-63页
致谢第63-64页
参考文献第64-72页
攻读硕士学位期间发表的论文第72页

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