致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-23页 |
·猪瘟研究进展 | 第9-15页 |
·病毒的发现 | 第9页 |
·病毒的病原学特征 | 第9-12页 |
·病毒的流行病学 | 第12-13页 |
·猪瘟病毒致病机制 | 第13-14页 |
·临床症状 | 第14页 |
·猪瘟诊断 | 第14-15页 |
·猪瘟疫苗研究进展 | 第15-20页 |
·传统疫苗 | 第16页 |
·新型疫苗 | 第16-19页 |
·疫苗免疫失败原因 | 第19-20页 |
·猪瘟的免疫防制策略 | 第20页 |
·BmNPV-家蚕表达系统简介 | 第20-23页 |
·杆状病毒表达载体系统概述 | 第20-21页 |
·BmNPV-家蚕表达系统 | 第21-22页 |
·BmNPV-家蚕表达系统的优势与特点 | 第22-23页 |
2 引言 | 第23-24页 |
3 材料与方法 | 第24-36页 |
·载体与试剂 | 第24页 |
·毒株、菌株、细胞株及家蚕蚕种 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24页 |
·基本实验操作技术 | 第24-28页 |
·细胞培养 | 第24-25页 |
·病毒基因组的提取 | 第25页 |
·重组质粒转化大肠杆菌 DH5α感受态细胞 | 第25-26页 |
·质粒的提取 | 第26页 |
·常用试剂、溶液和培养基的配制 | 第26-28页 |
·引物的设计和合成 | 第28-29页 |
·猪瘟病毒 E2 基因的扩增 | 第29-30页 |
·重组供体质粒的构建 | 第30-31页 |
·重组杆状病毒质粒的构建 | 第31页 |
·重组病毒的拯救和鉴定 | 第31-32页 |
·重组病毒的滴度测定 | 第32-33页 |
·重组病毒在昆虫细胞中表达重组蛋白及鉴定 | 第33页 |
·重组蛋白定量方法的建立 | 第33页 |
·重组病毒感染蚕蛹 | 第33-34页 |
·WesternBlot 鉴定昆虫细胞中和蚕蛹中重组蛋白的表达 | 第34-35页 |
·蚕蛹中重组蛋白表达量的测定 | 第35-36页 |
4 结果与分析 | 第36-44页 |
·猪瘟病毒 E2 基因的扩增 | 第36页 |
·重组供体质粒的构建及鉴定 | 第36-37页 |
·重组杆状病毒质粒的构建与鉴定 | 第37页 |
·重组杆状病毒的拯救、重组病毒在昆虫细胞中表达重组蛋白及鉴定 | 第37-38页 |
·重组蛋白定量方法的建立 | 第38-40页 |
·重组病毒感染蚕蛹 | 第40-41页 |
·蚕蛹中重组蛋白的鉴定 | 第41页 |
·蚕蛹中重组蛋白表达量的测定 | 第41-44页 |
5 结论与讨论 | 第44-45页 |
·结论 | 第44页 |
·讨论 | 第44-45页 |
6 参考文献 | 第45-50页 |
7 英文摘要 | 第50-52页 |
附录 | 第52-54页 |