| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-25页 |
| ·氨肽酶概述 | 第13-17页 |
| ·氨肽酶的性质 | 第13页 |
| ·氨肽酶的来源 | 第13-14页 |
| ·氨肽酶的分类 | 第14页 |
| ·氨肽酶的应用 | 第14-15页 |
| ·氨肽酶的研究近况 | 第15-17页 |
| ·蛋白水解概述 | 第17-20页 |
| ·蛋白水解 | 第17页 |
| ·蛋白水解研究进展 | 第17-18页 |
| ·蛋白酶解技术 | 第18-20页 |
| ·低值鱼和鳀鱼简介 | 第20-21页 |
| ·低值鱼简介 | 第20-21页 |
| ·鳀鱼简介 | 第21页 |
| ·课题意义及研究内容 | 第21-25页 |
| ·课题研究意义 | 第21-22页 |
| ·研究内容 | 第22-25页 |
| 第二章 亮氨酸氨肽酶的基因合成及表达载体的构建 | 第25-37页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·菌种与质粒 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-32页 |
| ·亮氨酸氨肽酶 Bk-lap 的基因合成设计 | 第26-27页 |
| ·Bk-lap 的基因合成 | 第27-29页 |
| ·克隆载体 BSK-LAP 的构建 | 第29-31页 |
| ·表达载体 pET28a-LAP 的构建 | 第31-32页 |
| ·实验结果 | 第32-36页 |
| ·Bk-lap 的基因合成 | 第32-33页 |
| ·克隆载体 BSK-LAP 的构建 | 第33-34页 |
| ·表达载体 pET28a-LAP 的构建 | 第34-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 亮氨酸氨肽酶的表达及纯化 | 第37-49页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·菌种 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37-38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-44页 |
| ·重组菌株 pET28a-LAP-BL21 的表达 | 第38-41页 |
| ·pET28a-LAP-BL21 表达条件的初步探索 | 第41页 |
| ·亮氨酸氨肽酶 BkLAP 的纯化 | 第41-42页 |
| ·纯化 BkLAP 蛋白活性测定 | 第42-44页 |
| ·结果讨论 | 第44-48页 |
| ·pET28a-LAP-BL21 表达条件的初步探索 | 第44-46页 |
| ·亮氨酸氨肽酶 BkLAP 的纯化 | 第46-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 亮氨酸氨肽酶的酶学特性研究 | 第49-59页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·试剂 | 第49页 |
| ·缓冲液 | 第49-50页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-51页 |
| ·酶活力测定 | 第50页 |
| ·最适 pH | 第50页 |
| ·最适温度 | 第50页 |
| ·金属离子的影响 | 第50-51页 |
| ·BkLAP 的底物特异性 | 第51页 |
| ·圆二色谱分析 | 第51页 |
| ·结果讨论 | 第51-57页 |
| ·pH 变化对 BkLAP 活性以及二级结构的影响 | 第51-53页 |
| ·温度变化对 BkLAP 活性以及二级结构的影响 | 第53-54页 |
| ·不同二价阳离子对 BkLAP 活性以及二级结构的影响 | 第54-56页 |
| ·BkLAP 的底物特异性 | 第56-57页 |
| ·本章小结 | 第57-59页 |
| 第五章 亮氨酸氨肽酶水解鳀鱼蛋白的研究 | 第59-67页 |
| ·实验材料 | 第59-60页 |
| ·实验材料 | 第59页 |
| ·主要试剂 | 第59页 |
| ·主要仪器 | 第59-60页 |
| ·实验方法 | 第60-62页 |
| ·福林酚试剂法酶活检测 | 第60页 |
| ·商品酶与 BkLAP 的复合水解实验设计 | 第60-61页 |
| ·水解度的测定 | 第61页 |
| ·游离氨基酸成分分析 | 第61-62页 |
| ·分子量分布分析 | 第62页 |
| ·结果讨论 | 第62-66页 |
| ·福林酚试剂法检测蛋白酶结果 | 第62-63页 |
| ·风味蛋白酶与 BkLAP 复合水解鳀鱼蛋白结果 | 第63页 |
| ·蛋白水解液分子量分布分析 | 第63-64页 |
| ·游离氨基酸成分分析 | 第64-66页 |
| ·本章小结 | 第66-67页 |
| 结论与展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 附录 | 第75-81页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 附件 | 第84页 |
