| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一章 血吸虫体被表膜蛋白的研究进展 | 第17-23页 |
| 1 血吸虫体被表膜结构与功能 | 第17-19页 |
| ·血吸虫体被表膜结构 | 第17-18页 |
| ·血吸虫体被表膜功能 | 第18-19页 |
| 2 重要的血吸虫体被表膜抗原分子 | 第19-22页 |
| ·血吸虫四跨膜蛋白 | 第19-22页 |
| ·血吸虫 23kD 抗原 | 第20-21页 |
| ·血吸虫 TSP-2 抗原 | 第21-22页 |
| ·血吸虫其他表膜抗原 | 第22页 |
| 3 结语 | 第22-23页 |
| 第二章 血吸虫核酸疫苗研究进展 | 第23-33页 |
| 1 核酸疫苗的免疫机制与特点 | 第23-25页 |
| ·核酸疫苗的免疫机制 | 第24页 |
| ·核酸疫苗的特点 | 第24-25页 |
| 2 核酸疫苗在血吸虫病中的研究进展 | 第25-31页 |
| ·单价疫苗 | 第25-29页 |
| ·酶类抗原 | 第25-27页 |
| ·肌球蛋白组抗原 | 第27-28页 |
| ·血吸虫的发育调节和性别性别相关抗原 | 第28-29页 |
| ·钙相关蛋白 | 第29页 |
| ·多价复合疫苗 | 第29-31页 |
| 3 DNA 疫苗的佐剂 | 第31-32页 |
| 4 核酸疫苗问题与展望 | 第32-33页 |
| 第三章 日本血吸虫 SjTSP_1LHD 重组蛋白免疫效果初步评估 | 第33-58页 |
| 1 试验材料 | 第34-37页 |
| ·实验动物及尾蚴 | 第34页 |
| ·模板、质粒与菌种 | 第34页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第34-35页 |
| ·主要试剂配制 | 第35-37页 |
| ·DNA 电泳试剂 | 第35页 |
| ·重组蛋白表达和纯化试剂 | 第35-37页 |
| ·主要引物 | 第37页 |
| 2 试验方法 | 第37-46页 |
| ·日本血吸虫实时定量 PCR 模板的制备 | 第37-39页 |
| ·虫体的收集 | 第37-38页 |
| ·虫体 mRNA 的提取 | 第38页 |
| ·mRNA 中的基因组 DNA 的消化 | 第38页 |
| ·消化后 mRNA 的纯化 | 第38-39页 |
| ·不同时期虫体 cDNA 的制备 | 第39页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第39-40页 |
| ·SjTSP_1LHD 基因克隆与原核表达载体的构建 | 第40-42页 |
| ·SjTSP_1LHD 基因的生物信息学分析 | 第40页 |
| ·SjTSP1HD 基因克隆 | 第40-41页 |
| ·原核表达质粒的构建与鉴定 | 第41-42页 |
| ·重组原核质粒的诱导表达条件摸索 | 第42页 |
| ·重组蛋白的表达时相分析 | 第42页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第42-43页 |
| ·重组蛋白的 western blotting 分析 | 第43页 |
| ·免疫荧光染色实验 | 第43-44页 |
| ·实时定量分析 | 第44页 |
| ·BALA/c 小鼠的免疫保护试验 | 第44-46页 |
| ·ELISA 方法检测重组蛋白免疫组抗体水平 | 第45页 |
| ·细胞因子分析 | 第45页 |
| ·减虫率和肝脏减卵率的计算 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-55页 |
| ·SjTSP_1LHD 基因的生物信息学分析及其大胞外区编码 DNA 序列的克隆 | 第46-48页 |
| ·基因在不同发育阶段虫体内的转录水平分析 | 第48-49页 |
| ·重组质粒 SjTSP_1LHD-pET-32a(+)的构建及鉴定 | 第49页 |
| ·重组质粒的表达及其重组蛋白的纯化 | 第49-50页 |
| ·重组蛋白的抗原性分析 | 第50-51页 |
| ·重组蛋白在虫体的组织定位 | 第51-52页 |
| ·BALA/c 小鼠的免疫保护试验结果 | 第52-55页 |
| ·ELISA 方法检测实验组小鼠重组 SjTSP_1LHD 特异性抗体水平 | 第52-54页 |
| ·细胞因子 IFN-γ和 IL-4 分析 | 第54-55页 |
| ·SjTSP1HD 在小鼠体内诱导的免疫保护效果 | 第55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 第四章 日本血吸虫抱雌沟蛋白核酸疫苗的研究 | 第58-75页 |
| 1 试验材料 | 第59-61页 |
| ·实验动物及尾蚴 | 第59页 |
| ·SjGCP 重组质粒、表达载体及工程菌种 | 第59页 |
| ·主要试剂 | 第59-60页 |
| ·主要仪器设备 | 第60页 |
| ·主要试剂配制 | 第60-61页 |
| ·DNA 电泳试剂 | 第60页 |
| ·SjGCP 重组蛋白表达和纯化试剂 | 第60-61页 |
| 2 试验方法 | 第61-68页 |
| ·原核重组抗原 pGEX-4T-2-SjGCP 制备 | 第61-64页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第61-62页 |
| ·质粒的转化 | 第62页 |
| ·重组质粒的小量抽提 | 第62-63页 |
| ·重组原核质粒的诱导表达 | 第63页 |
| ·重组原核蛋白 SjGCP 的 GST 亲和层析纯化 | 第63-64页 |
| ·DNA 疫苗 pVAX1/SjGCP 的构建 | 第64-67页 |
| ·引物设计与合成 | 第64页 |
| ·SjGCP 基因的扩增 | 第64-65页 |
| ·PCR 产物切胶回收纯化 | 第65页 |
| ·真核表达载体的构建与鉴定 | 第65-66页 |
| ·重组真核质粒的大量抽提 | 第66-67页 |
| ·BALA/c 小鼠免疫保护试验 | 第67-68页 |
| ·BALA/c 小鼠的分组、免疫和感染 | 第67页 |
| ·减虫率与肝脏、粪便减卵率的计算 | 第67页 |
| ·ELISA 方法检测试验组小鼠特异性抗体水平 | 第67页 |
| ·流式细胞术技术分析细胞免疫情况 | 第67-68页 |
| 3 结果 | 第68-72页 |
| ·pGEX-4T-2-SjGCP 的原核表达与纯化 | 第68-69页 |
| ·真核表达载体的构建和鉴定 | 第69-70页 |
| ·BALA/c 小鼠免疫保护试验结果 | 第70-72页 |
| ·BALA/c 小鼠血清中抗 SjGCP 特异性抗体 IgG 的检测 | 第70-71页 |
| ·淋巴细胞亚群 CD4＋、CD8＋及细胞因子 IL-4、IFN-γ检测 | 第71-72页 |
| ·减虫率与肝脏、粪便减卵率的计算 | 第72页 |
| 4 讨论 | 第72-75页 |
| 全文总结 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 附录 | 第85-86页 |
| 攻读学位期间发表学术论文 | 第86页 |
