| 中文摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 1 引言 | 第15-34页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征概述 | 第15-26页 |
| ·病原学 | 第16-22页 |
| ·PRRSV 的分类地位及生物学特性 | 第16-17页 |
| ·PRRSV 的基因组结构 | 第17-19页 |
| ·PRRSV 基因组编码的主要蛋白 | 第19-22页 |
| ·PRRSV 基因组编码的非结构蛋白 | 第19-20页 |
| ·PRRSV 基因组编码的结构蛋白 | 第20-22页 |
| ·PRRSV 致病机制与免疫学 | 第22-24页 |
| ·PRRSV 的致病机制 | 第22-23页 |
| ·PRRSV 的免疫学 | 第23-24页 |
| ·PRRSV 的流行病学 | 第24页 |
| ·PRRSV 的实验室诊断技术 | 第24-26页 |
| ·PRRSV 的抗原学诊断技术 | 第24-25页 |
| ·病毒分离 | 第24页 |
| ·RT-PCR 技术 | 第24-25页 |
| ·免疫胶体金技术 | 第25页 |
| ·PRRSV 的血清学诊断技术 | 第25-26页 |
| ·间接免疫荧光试验(IFA) | 第25页 |
| ·免疫过氧化物酶单层试验 | 第25页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第25-26页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征的蛋白质组学研究进展 | 第26-31页 |
| ·蛋白质组学概述 | 第26页 |
| ·蛋白质组学研究常用技术 | 第26-30页 |
| ·双向电泳 | 第26页 |
| ·双向差异凝胶电泳 | 第26-27页 |
| ·iTRAQ 技术 | 第27-29页 |
| ·基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 | 第29页 |
| ·高效液相色谱 | 第29-30页 |
| ·蛋白质组学应用于 PRRSV 的研究 | 第30-31页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征的感染性 cDNA 克隆研究进展 | 第31-33页 |
| ·反向遗传学操作技术体系的提出 | 第31页 |
| ·正链 RNA 病毒的感染性 cDNA 克隆构建的原理和方法 | 第31-32页 |
| ·PRRSV 感染性 cDNA 克隆的研究进展 | 第32页 |
| ·PRRSV 感染性 cDNA 克隆的应用 | 第32-33页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-56页 |
| ·实验材料 | 第34-36页 |
| ·细胞、毒株和抗体 | 第34页 |
| ·实验动物 | 第34页 |
| ·主要试剂与药品 | 第34页 |
| ·菌种和载体 | 第34-35页 |
| ·主要试剂配制 | 第35-36页 |
| ·主要设备及仪器 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-56页 |
| ·病毒 TCID50测定 | 第36页 |
| ·攻毒实验 | 第36-37页 |
| ·体温的测量 | 第37页 |
| ·血清抗体水平的检测 | 第37页 |
| ·组织器官病理变化及病理学切片观察 | 第37-38页 |
| ·病毒接种与收获细胞 | 第38页 |
| ·间接免疫荧光实验（IFA） | 第38-39页 |
| ·蛋白样品处理 | 第39-46页 |
| ·细胞收集 | 第39页 |
| ·样品裂解与蛋白浓度测定 | 第39-40页 |
| ·SDS-PAGE检测样品的制备 | 第40页 |
| ·SDS-PAGE蛋白质电泳（参照分子克隆实验指南操作）(萨姆布鲁克,2002) | 第40-41页 |
| ·蛋白酶解 | 第41页 |
| ·iTRAQ 标记 | 第41页 |
| ·强离子交换分离 | 第41页 |
| ·高效液相色谱-电喷雾串联质谱法分析和数据库检索 | 第41-42页 |
| ·GO 分析 | 第42页 |
| ·COG 注释 | 第42页 |
| ·显著性Pathway分析 | 第42-43页 |
| ·蛋白信号转导网络的构建 | 第43-45页 |
| ·免疫印迹 | 第45-46页 |
| ·引物设计及合成 | 第46-48页 |
| ·RNA 提取及 RT-PCR | 第48-50页 |
| ·PRRSV 中间载体的构建 | 第50-52页 |
| ·转化 | 第50-51页 |
| ·阳性重组子的鉴定和测序（PCR 方法鉴定阳性重组子） | 第51页 |
| ·阳性重组子的鉴定和测序（质粒酶切鉴定阳性重组子） | 第51-52页 |
| ·PRRSV 基因组 B 片段 XhoI 位点的突变 | 第52-54页 |
| ·全长 cDNA 克隆的构建 | 第54页 |
| ·PRRSV ZCYZ 相关毒株序列的进化树分析 | 第54-55页 |
| ·体外转染 | 第55页 |
| ·PRRSV ZCYZ 株感染性克隆的鉴定 | 第55页 |
| ·动物实验 | 第55-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-74页 |
| ·体温测定 | 第56页 |
| ·攻毒后 PRRSV 抗体检测结果 | 第56页 |
| ·攻毒后猪的病理解剖结果与组织学变化 | 第56-59页 |
| ·PRRSV 分离株感染 MARC-145 细胞的 IFA | 第59-60页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白质电泳结果 | 第60页 |
| ·数据分析结果 | 第60页 |
| ·GO 分析结果 | 第60-61页 |
| ·COG 注释结果 | 第61-62页 |
| ·显著性 Pathway 分析结果 | 第62-65页 |
| ·SX-1 vs MARC-145 组差异蛋白显著性 Pathway | 第62-63页 |
| ·SD1 vs MARC-145 组差异蛋白显著性 Pathway | 第63-64页 |
| ·ZCYZ vs MARC-145 组差异蛋白显著性 Pathway | 第64-65页 |
| ·不同组别之间上调差异蛋白和下调差异蛋白参与的显著性 Pathway 统计 | 第65页 |
| ·蛋白信号转导网络的构建 | 第65-69页 |
| ·SX-1 vs MARC-145 组 Signal-Net | 第67-68页 |
| ·SD1 vs MARC-145 组 Signal-Net | 第68页 |
| ·ZCYZ vs MARC-145 组 Signal-Net | 第68-69页 |
| ·Western Blot 结果 | 第69-70页 |
| ·ZCYZ 全基因组各段扩增结果 | 第70页 |
| ·PRRSV ZCYZ 相关毒株序列和进化树分析结果 | 第70-71页 |
| ·PRRSV 感染性 cDNA 克隆的拯救结果 | 第71-73页 |
| ·动物实验结果 | 第73-74页 |
| 4 讨论 | 第74-78页 |
| ·SX-1 vs MARC-145 组 | 第74-76页 |
| ·SD1 vs MARC-145 组 | 第76页 |
| ·ZCYZ vs MARC-145 组 | 第76页 |
| ·不同组别之间参与 Pathway 的比较 | 第76页 |
| ·ZCYZ 感染性克隆的构建及拯救 | 第76-78页 |
| 5 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 附录 | 第86-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第121页 |
