| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-32页 |
| 第一节 促性腺激素释放激素（GnRH）的研究进展 | 第15-24页 |
| ·GnRH 的发生 | 第15-16页 |
| ·GnRH 的分类与系统进化 | 第16-19页 |
| ·不同类型 GnRH 的分布和功能 | 第19-21页 |
| ·GnRH 基因的表达与调控 | 第21-23页 |
| ·GnRH 的应用 | 第23-24页 |
| 第二节 促性腺激素释放激素受体的研究进展 | 第24-26页 |
| 第三节 基因启动子的研究进展 | 第26-32页 |
| 1 启动子元件 | 第26-28页 |
| 2 启动子研究思路 | 第28-29页 |
| 3 与启动子相关的研究 | 第29-30页 |
| 4 获得启动子序列的方法 | 第30-32页 |
| 第二章 许氏平鲉 GnRH 基因的克隆和表达分析 | 第32-77页 |
| 第一节 许氏平鲉 GnRH-I 基因克隆和表达分析 | 第32-51页 |
| 1 材料和方法 | 第32-42页 |
| ·实验材料 | 第32-34页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第35-36页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-I 基因核心片段的克隆 | 第36-37页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-I 基因 3’UTR 的获得 | 第37-38页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-I 基因 5’UTR 的获得 | 第38页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-I 基因组序列的获得 | 第38-39页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-I 基因的序列分析 | 第39-40页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-I 基因的组织和发育时期的表达 | 第40-42页 |
| 2 结果 | 第42-50页 |
| ·总 RNA 的提取与检测 | 第42页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-I 基因核心片段以及 5’UTR 和 3’UTR 的分析 | 第42-43页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-I 基因组 DNA 序列的克隆和分析 | 第43-45页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-I 基因的聚类分析 | 第45-47页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-I 蛋白的结构预测 | 第47-48页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-I 基因的组织和发育时期表达分析 | 第48-50页 |
| 3 讨论 | 第50-51页 |
| 第二节 许氏平鲉 GnRH-II 基因克隆和表达分析 | 第51-58页 |
| 1 材料和方法 | 第51页 |
| 2 结果 | 第51-57页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-II 基因核心片段以及 5’UTR 和 3’UTR 的分析 | 第51-52页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-II 基因组 DNA 序列的克隆和分析 | 第52-54页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-II 基因的聚类分析 | 第54页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-II 蛋白的结构预测 | 第54-55页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-II 基因的组织和发育时期表达分析 | 第55-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| 第三节 许氏平鲉 GnRH-III 基因克隆和表达分析 | 第58-65页 |
| 1 材料和方法 | 第58页 |
| 2 结果 | 第58-63页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-III 基因核心片段以及 5’UTR 和 3’UTR 的获得 | 第58-59页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-III 基因组 DNA 序列的克隆 | 第59-61页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-III 基因的聚类分析 | 第61页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-III 蛋白的结构预测 | 第61-62页 |
| ·许氏平鲉 GnRH-III 基因的组织和发育时期表达分析 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 第四节 许氏平鲉 GnRH-III 的原核表达 | 第65-77页 |
| 1 材料和方法 | 第65-71页 |
| ·实验试剂 | 第65-67页 |
| ·pET-32a/GnRH-III 的重组 | 第67-68页 |
| ·重组表达质粒 pET-32a/GnRH-III 在 BL21（pLysS）中的诱导表达 | 第68-70页 |
| ·诱导时间的优化 | 第70页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第70-71页 |
| ·表达蛋白的含量分析 | 第71页 |
| 2 结果 | 第71-74页 |
| ·pET-32a/GnRH-III 重组质粒的构建 | 第71-72页 |
| ·pET-32a/GnRH-III 在 BL21 中的诱导表达及时间的优化 | 第72-73页 |
| ·蛋白表达形式的确定及其纯化 | 第73页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第73-74页 |
| 3 讨论 | 第74-77页 |
| 第三章 许氏平鲉 GnRH 受体基因的克隆和表达分析 | 第77-96页 |
| 第一节 许氏平鲉 GnRHR-I 型基因的克隆和表达分析 | 第77-90页 |
| 1 材料和方法 | 第77-81页 |
| ·实验材料 | 第77页 |
| ·许氏平鲉 GnRHR-I 核心片段的克隆 | 第77-78页 |
| ·许氏平鲉 GnRHR-I 3’RACE PCR 扩增 | 第78-79页 |
| ·许氏平鲉 GnRHR-I 5’RACE PCR 扩增 | 第79页 |
| ·许氏平鲉 GnRHR-I 基因的序列分析 | 第79-80页 |
| ·许氏平鲉 GnRHR-I 基因的组织表达 | 第80-81页 |
| 2 结果 | 第81-90页 |
| ·许氏平鲉 GnRHR-I 基因核心片段以及 5’UTR 和 3’UTR 的获得 | 第81-82页 |
| ·许氏平鲉 GnRHR-I 型基因核苷酸序列分析 | 第82-83页 |
| ·许氏平鲉 GnRHR-I 预测蛋白质的分析 | 第83-87页 |
| ·许氏平鲉 GnRHR-I 多序列比对与系统进化分析 | 第87-88页 |
| ·GnRHR-I 型基因的组织表达分析 | 第88-90页 |
| 第二节 许氏平鲉 GnRHR-II 型基因的克隆和表达分析 | 第90-93页 |
| 1 材料和方法 | 第90-92页 |
| ·实验材料 | 第90页 |
| ·许氏平鲉 GnRHR-II 核心片段的克隆 | 第90页 |
| ·许氏平鲉 GnRHR-II 3’RACE PCR 扩增 | 第90-91页 |
| ·许氏平鲉 GnRHR-II 5’RACE PCR 扩增 | 第91页 |
| ·许氏平鲉 GnRHR-II 基因的组织表达 | 第91-92页 |
| 2 结果 | 第92-93页 |
| ·许氏平鲉 GnRHR-II 基因核心片段的获得 | 第92页 |
| ·GnRHR-II 型基因的组织表达分析 | 第92-93页 |
| 第三节 讨论 | 第93-96页 |
| 第四章 舌鳎 GnRH-III 基因的克隆和表达分析 | 第96-106页 |
| 1 材料和方法 | 第96-99页 |
| ·不同组织的取材 | 第96页 |
| ·早期发育时期的取材 | 第96-97页 |
| ·半滑舌鳎 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第97页 |
| ·半滑舌鳎 csGnRH-III 基因核心片段的克隆 | 第97页 |
| ·半滑舌鳎 csGnRH-III 基因 3’UTR 以及 5’UTR 的获得 | 第97-98页 |
| ·半滑舌鳎 csGnRH-III 基因组序列的获得 | 第98页 |
| ·半滑舌鳎 csGnRH-III 基因的序列分析 | 第98页 |
| ·半滑舌鳎 csGnRH-III 基因上游序列的获得 | 第98页 |
| ·半滑舌鳎 csGnRH-III 基因的组织和发育时期的表达 | 第98-99页 |
| 2 结果 | 第99-103页 |
| ·半滑舌鳎 csGnRH-III 全长 cDNA 序列的克隆 | 第99页 |
| ·半滑舌鳎 csGnRH-III 基因组序列的分析 | 第99-102页 |
| ·半滑舌鳎 csGnRH-III 组织和发育时期的表达 | 第102-103页 |
| 3 讨论 | 第103-106页 |
| 第五章 许氏平鲉 3 个 GnRH 基因启动子的克隆以及生物信息学分析 | 第106-119页 |
| 1 材料与方法 | 第106-109页 |
| ·实验材料与试剂 | 第106页 |
| ·实验方法 | 第106-109页 |
| 2 结果 | 第109-115页 |
| ·基因启动子序列的克隆 | 第109-113页 |
| ·启动子区域序列的生物信息学分析 | 第113-115页 |
| 3 讨论 | 第115-119页 |
| 参考文献 | 第119-133页 |
| 个人简历 | 第133页 |
| 文章发表和撰写情况 | 第133-134页 |
| 致谢 | 第134页 |
