| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-16页 |
| 符号说明 | 第16-17页 |
| 前言 | 第17-19页 |
| 技术路线图 | 第19-22页 |
| 第一章 MicroRNA质粒的构建和有效质粒筛选 | 第22-58页 |
| ·材料 | 第22-26页 |
| ·细胞 | 第22页 |
| ·质粒和细菌 | 第22-23页 |
| ·引物 | 第23-25页 |
| ·主要试剂/试剂盒 | 第25页 |
| ·主要仪器及设备 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-38页 |
| ·表达microRNA质粒的构建和鉴定 | 第26-32页 |
| ·质粒瞬时转染CNE-2细胞 | 第32-33页 |
| ·质粒瞬时转染效应初筛 | 第33-38页 |
| ·统计学处理 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-53页 |
| ·表达microRNA质粒的构建和鉴定 | 第38-43页 |
| ·质粒瞬时转染的效率 | 第43页 |
| ·质粒瞬时转染效应初筛结果 | 第43-53页 |
| ·讨论 | 第53-57页 |
| ·MicroRNA与RNA干扰 | 第53-55页 |
| ·转染MicroRNA抑制目标基因表达 | 第55-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第二章 MicroRNA质粒抑制CNE-2细胞的体外实验 | 第58-69页 |
| ·材料 | 第58-60页 |
| ·细胞 | 第58页 |
| ·质粒和细菌 | 第58页 |
| ·引物 | 第58-59页 |
| ·主要试剂/试剂盒 | 第59-60页 |
| ·主要仪器及设备 | 第60页 |
| ·方法 | 第60-63页 |
| ·串联miR-hT2035和miR-V1025质粒的构建和鉴定 | 第60页 |
| ·稳定转染各种质粒细胞系的建立 | 第60-61页 |
| ·稳定转染效果的观察 | 第61-62页 |
| ·统计学处理 | 第62-63页 |
| ·结果 | 第63-66页 |
| ·靶向两个基因的microRNA质粒的构建和鉴定 | 第63-64页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR检测稳定转染后mRNA水平 | 第64-65页 |
| ·Western Blotting检测稳定转染后靶向基因的蛋白表达水平 | 第65页 |
| ·双层软琼脂集落形成实验结果 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 第三章 稳定转染microRNA质粒的裸鼠体内实验 | 第69-85页 |
| ·材料 | 第69-70页 |
| ·细胞和裸鼠 | 第69页 |
| ·主要试剂 | 第69-70页 |
| ·主要仪器及设备 | 第70页 |
| ·方法 | 第70-72页 |
| ·裸鼠鼻咽癌动物模型的建立 | 第70页 |
| ·裸鼠动物模型鼻咽癌生长情况观察 | 第70-71页 |
| ·裸鼠动物模型鼻咽癌组织的蛋白表达检测 | 第71页 |
| ·裸鼠动物模型鼻咽癌组织的MVD检测 | 第71页 |
| ·统计学处理 | 第71-72页 |
| ·结果 | 第72-79页 |
| ·裸鼠鼻咽癌动物模型的建立 | 第72-73页 |
| ·转染质粒对裸鼠移植瘤生长的影响 | 第73-75页 |
| ·病理学检查 | 第75-76页 |
| ·蛋白表达的检测 | 第76-77页 |
| ·MVD检测 | 第77-79页 |
| ·讨论 | 第79-84页 |
| ·鼻咽癌的基因治疗 | 第79-83页 |
| ·microRNA治疗鼻咽癌体内实验的初步研究 | 第83-84页 |
| ·小结 | 第84-85页 |
| 第四章 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-90页 |
| 综述 | 第90-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 成果 | 第106页 |
