摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-16页 |
缩略词表 | 第16-17页 |
第一章 研究背景及综述 | 第17-44页 |
·纤维材料的结构特征 | 第18-20页 |
·纤维素的生物降解 | 第20-24页 |
·膨胀因子及其膨胀作用 | 第24-32页 |
·真菌纤维素酶的分子生物学研究 | 第32-35页 |
·纤维素酶基因的异源表达 | 第35-41页 |
·论文的立题依据和工作思路 | 第41-44页 |
第二章 木霉Swollenin基因的克隆及序列分析 | 第44-68页 |
·引言 | 第44页 |
·试剂与材料 | 第44-45页 |
·仪器 | 第45页 |
·试验方法 | 第45-51页 |
·结果与讨论 | 第51-67页 |
·木霉总RNA的提取 | 第51-52页 |
·瑞氏木霉QM9414的swol cDNA的克隆及验证 | 第52-54页 |
·RT-PCR扩增拟康氏木霉Swollenin cDNA的部分序列 | 第54-59页 |
·RACE法克隆拟康氏木霉Swollenin全长cDNA | 第59-66页 |
·不同来源的真菌Swollenin蛋白理化性质预测和比较 | 第66-67页 |
·本章小结 | 第67-68页 |
第三章 丝状真菌Swollenin蛋白结构分析及同源模建 | 第68-97页 |
·引言 | 第68页 |
·材料和软件 | 第68-69页 |
·实验方法 | 第69页 |
·结果与分析 | 第69-95页 |
·Swollenin的同源性分析 | 第69-72页 |
·Swollenin的序列和结构域分析 | 第72-73页 |
·信号肽的分析 | 第73-75页 |
·SWOI蛋白的其他化学修饰 | 第75页 |
·Swollenin的二级结构预测 | 第75-78页 |
·木霉Swollenin的三维结构模型的同源模建 | 第78-95页 |
·本章小结 | 第95-97页 |
第四章 木霉Swollenin在不同宿主中的异源表达 | 第97-116页 |
·引言 | 第97页 |
·材料与方法 | 第97-101页 |
·结果与讨论 | 第101-115页 |
·构建带有His和HA tag的Swollenin cDNA序列 | 第101-103页 |
·Swollenin木霉表达载体的构建 | 第103-106页 |
·木霉转化子的转化、筛选及鉴定 | 第106-107页 |
·Swollenin在其它宿主中异源表达体系的构建及表达分析 | 第107-115页 |
·本章小结 | 第115-116页 |
第五章 重组木霉Swollenin的分离纯化和性质研究 | 第116-131页 |
·导言 | 第116页 |
·主要材料、试剂与药品 | 第116-117页 |
·主要实验仪器 | 第117页 |
·实验方法 | 第117-119页 |
·实验结果及分析 | 第119-129页 |
·木霉Swollenin重组表达蛋白的纯化 | 第119-124页 |
·Swollenin的活性检测 | 第124-125页 |
·Swollenin对棉纤维的膨胀作用 | 第125-127页 |
·Swollenin与纤维素酶的协同降解 | 第127-129页 |
·本章小结 | 第129-131页 |
第六章 Clostridium thermocellum内切酶CelA的异源表达和突变研究 | 第131-141页 |
·引言 | 第131-132页 |
·材料与方法 | 第132-133页 |
·结果与讨论 | 第133-140页 |
·CelA在枯草芽孢杆菌中表达的质粒构建 | 第133-135页 |
·CelA的枯草芽孢杆菌表达及重组蛋白的纯化 | 第135-136页 |
·突变体CelA的酶活测定和动力学参数 | 第136-137页 |
·CelA突变对最适作用pH和最适作用温度的影响 | 第137-138页 |
·翻转型糖苷水解酶的作用机制探讨 | 第138-140页 |
·小结 | 第140-141页 |
全文总结 | 第141-143页 |
参考文献 | 第143-160页 |
致谢 | 第160-162页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第162-163页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第163-164页 |
附: | 第164-185页 |
外文写作Part Ⅰ | 第164-173页 |
外文写作Part Ⅱ | 第173-185页 |