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木霉纤维膨胀因子基因克隆表达及其与纤维素内切酶CelA催化功能机制的研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-16页
缩略词表第16-17页
第一章 研究背景及综述第17-44页
   ·纤维材料的结构特征第18-20页
   ·纤维素的生物降解第20-24页
   ·膨胀因子及其膨胀作用第24-32页
   ·真菌纤维素酶的分子生物学研究第32-35页
   ·纤维素酶基因的异源表达第35-41页
   ·论文的立题依据和工作思路第41-44页
第二章 木霉Swollenin基因的克隆及序列分析第44-68页
   ·引言第44页
   ·试剂与材料第44-45页
   ·仪器第45页
   ·试验方法第45-51页
   ·结果与讨论第51-67页
     ·木霉总RNA的提取第51-52页
     ·瑞氏木霉QM9414的swol cDNA的克隆及验证第52-54页
     ·RT-PCR扩增拟康氏木霉Swollenin cDNA的部分序列第54-59页
     ·RACE法克隆拟康氏木霉Swollenin全长cDNA第59-66页
     ·不同来源的真菌Swollenin蛋白理化性质预测和比较第66-67页
   ·本章小结第67-68页
第三章 丝状真菌Swollenin蛋白结构分析及同源模建第68-97页
   ·引言第68页
   ·材料和软件第68-69页
   ·实验方法第69页
   ·结果与分析第69-95页
     ·Swollenin的同源性分析第69-72页
     ·Swollenin的序列和结构域分析第72-73页
     ·信号肽的分析第73-75页
     ·SWOI蛋白的其他化学修饰第75页
     ·Swollenin的二级结构预测第75-78页
     ·木霉Swollenin的三维结构模型的同源模建第78-95页
   ·本章小结第95-97页
第四章 木霉Swollenin在不同宿主中的异源表达第97-116页
   ·引言第97页
   ·材料与方法第97-101页
   ·结果与讨论第101-115页
     ·构建带有His和HA tag的Swollenin cDNA序列第101-103页
     ·Swollenin木霉表达载体的构建第103-106页
     ·木霉转化子的转化、筛选及鉴定第106-107页
     ·Swollenin在其它宿主中异源表达体系的构建及表达分析第107-115页
   ·本章小结第115-116页
第五章 重组木霉Swollenin的分离纯化和性质研究第116-131页
   ·导言第116页
   ·主要材料、试剂与药品第116-117页
   ·主要实验仪器第117页
   ·实验方法第117-119页
   ·实验结果及分析第119-129页
     ·木霉Swollenin重组表达蛋白的纯化第119-124页
     ·Swollenin的活性检测第124-125页
     ·Swollenin对棉纤维的膨胀作用第125-127页
     ·Swollenin与纤维素酶的协同降解第127-129页
   ·本章小结第129-131页
第六章 Clostridium thermocellum内切酶CelA的异源表达和突变研究第131-141页
   ·引言第131-132页
   ·材料与方法第132-133页
   ·结果与讨论第133-140页
     ·CelA在枯草芽孢杆菌中表达的质粒构建第133-135页
     ·CelA的枯草芽孢杆菌表达及重组蛋白的纯化第135-136页
     ·突变体CelA的酶活测定和动力学参数第136-137页
     ·CelA突变对最适作用pH和最适作用温度的影响第137-138页
     ·翻转型糖苷水解酶的作用机制探讨第138-140页
   ·小结第140-141页
全文总结第141-143页
参考文献第143-160页
致谢第160-162页
攻读学位期间发表的学术论文目录第162-163页
学位论文评阅及答辩情况表第163-164页
附:第164-185页
 外文写作Part Ⅰ第164-173页
 外文写作Part Ⅱ第173-185页

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