第一章 前言 | 第1-14页 |
1·1 碱性磷酸酶的研究概况 | 第10-12页 |
1·2 本论文的研究意义及研究内容 | 第12-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-24页 |
2·1 材料与试剂 | 第14页 |
2·2 仪器 | 第14-15页 |
2·3 方法 | 第15-24页 |
2·3·1 碱性磷酸酶的分离纯化 | 第15-16页 |
2·3·2 酶的纯度鉴定 | 第16-17页 |
2·3·3 酶理化性质的测定 | 第17-18页 |
2·3·3·1 酶分子量的测定 | 第17页 |
2·3·3·2 酶分子的亚基数及亚基分子量的测定 | 第17页 |
2·3·3·3 酶分子紫外吸收光谱的测定 | 第17-18页 |
2·3·4 酶催化反应动力学的研究 | 第18-19页 |
2·3·4·1 蛋白浓度的测定 | 第18页 |
2·3·4·2 酶活力及比活力的测定 | 第18页 |
2·3·4·3 酶促反应的最适温度 | 第18-19页 |
2·3·4·4 酶促反应的最适pH值 | 第19页 |
2·3·4·5 酶促反应初速度的测定 | 第19页 |
2·3·4·6 酶促反应动力学参数的测定 | 第19页 |
2·3·4·7 酶催化pNPP水解反应的活化能的测定 | 第19页 |
2·3·5 效应物对酶活力的影响 | 第19-20页 |
2·3·6 构象与酶活力的关系 | 第20-21页 |
2·3·6·1 变性剂对酶分子构象的改变 | 第20页 |
2·3·6·2 变性剂对酶活力的影响 | 第20页 |
2·3·6·3 变性剂作用时间对酶剩余活力的影响 | 第20-21页 |
2·3·7 酶活性中心必需基团的研究 | 第21页 |
2·3·7·1 酶的化学修饰 | 第21页 |
2·3·7·2 酶活性中心必需基团的定量分析 | 第21页 |
2·3·8 酶在盐酸胍中的失活动力学 | 第21-22页 |
2·3·9 合浦珠母贝插核后其外套膜上碱性磷酸酶比活力的变化 | 第22页 |
2·3·10 一些药剂对合浦珠母贝外套膜小片上碱性磷酸酶活力的影响 | 第22-24页 |
2·3·10·1 PVP浓度梯度对酶活力的影响 | 第22-23页 |
2·3·10·2 ATP浓度梯度对酶活力对影响 | 第23页 |
2·3·10·3 促珠泌素浓度梯度对酶活力的影响 | 第23页 |
2·3·10·4 混合药物对酶活力的影响 | 第23-24页 |
第三章 试验结果 | 第24-49页 |
3·1 碱性磷酸酶的分离纯化及纯度鉴定 | 第24-26页 |
3·1·1 酶的分离纯化 | 第24页 |
3·1·2 酶的纯度鉴定 | 第24-26页 |
3·2 酶理化性质的测定 | 第26-28页 |
3·2·1 酶分子量的测定 | 第26页 |
3·2·2 酶分子的亚基数及亚基分子量的测定 | 第26-27页 |
3·2·3 酶分子紫外吸收光谱的测定 | 第27-28页 |
3·3 酶催化反应动力学的研究 | 第28-30页 |
3·3·1 酶促反应的最适温度和最适pH值 | 第28页 |
3·3·2 酶促反应动力学参数的测定 | 第28-29页 |
3·3·3 酶催化pNPP水解反应的活化能的测定 | 第29-30页 |
3·4 效应物对酶活力的影响 | 第30-36页 |
3·4·1 产物及其类似物对酶活力的影响 | 第30-31页 |
3·4·2 金属离子对酶活力的影响 | 第31-33页 |
3·4·3 DTT对酶活力的影响 | 第33-35页 |
3·4·4 EDTA对酶活力的影响 | 第35-36页 |
3·5 构象与酶活力的关系 | 第36-39页 |
3·5·1 变性剂对酶分子构象的改变 | 第36-37页 |
3·5·2 变性剂对酶活力的影响 | 第37-38页 |
3·5·3 变性剂作用时间对酶剩余活力的影响 | 第38-39页 |
3·6 酶活性中心必需基团的研究 | 第39-43页 |
3·6·1 酶的化学修饰 | 第39-40页 |
3·6·2 酶活性中心必需基团的定量分析 | 第40-43页 |
3·6·2·1 酶活性中心必需的组氨酸残基的定量分析 | 第40-41页 |
3·6·2·2 酶活性中心必需的色氨酸残基的定量分析 | 第41-43页 |
3·7 盐酸胍对酶的抑制动力学 | 第43-46页 |
3·7·1 动力学模型的建立 | 第43-44页 |
3·7·2 固定底物pNPP浓度下,盐酸胍等酶的失活动力学 | 第44-45页 |
3·7·3 固定盐酸胍浓度,改变底物pNPP浓度下的催化水解反应动力学 | 第45-46页 |
3·8 合浦珠母贝插核后其外套膜上碱性磷酸酶比活力的变化 | 第46-47页 |
3·9 一些药剂对合浦珠母贝外套膜小片上碱性磷酸酶比活力的影响 | 第47-49页 |
3·9·1 PVP浓度梯度对酶活力的影响 | 第47页 |
3·9·2 ATP浓度梯度对酶活力对影响 | 第47-48页 |
3·9·3 促珠泌素浓度梯度对酶活力的影响 | 第48页 |
3·9·4 混合药物对酶活力的影响 | 第48-49页 |
第四章 讨论 | 第49-55页 |
4·1 酶分子理化性质的研究 | 第49-50页 |
4·2 效应物对酶活力的影响 | 第50-52页 |
4·3 酶分子构象与酶活力关系的研究 | 第52-53页 |
4·4 酶活性中心必需基团的研究 | 第53页 |
4·5 插核对合浦珠母贝外套膜上碱性磷酸酶比活力的影响 | 第53-54页 |
4·6 一些药物对外套膜小片上碱性磷酸酶活力的影响 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
致谢 | 第60页 |