| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-24页 |
| ·纤维素降解型微生物和纤维素酶研究进展 | 第11-14页 |
| ·降解纤维素微生物的种类 | 第11-12页 |
| ·纤维素酶系统的组成和协同作用 | 第12-13页 |
| ·糖基水解酶家族(Glycoside hydrolase families) | 第13页 |
| ·细菌纤维素酶和真菌纤维素酶的区别 | 第13-14页 |
| ·纤维素酶活力的表征 | 第14-15页 |
| ·外切酶酶活测定方法 | 第14页 |
| ·内切酶酶活测定方法 | 第14页 |
| ·β-葡萄糖苷酶酶活测定方法 | 第14-15页 |
| ·纤维素酶总活力的测定 | 第15页 |
| ·枯草杆菌表达系统 | 第15-20页 |
| ·枯草杆菌表达系统概述 | 第15-16页 |
| ·枯草杆菌表达系统中的载体 | 第16-17页 |
| ·枯草杆菌中的分泌表达特点 | 第17-20页 |
| ·纤维素酶在枯草芽孢杆菌中的表达 | 第20-24页 |
| ·游离的纤维素酶在枯草杆菌中的表达 | 第20-21页 |
| ·纤维小体在枯草杆菌中的重构 | 第21-22页 |
| ·整合生物工艺(Consolidated bioprocessing)菌种的构建 | 第22-24页 |
| 第2章 材料与方法 | 第24-38页 |
| ·实验材料 | 第24-28页 |
| ·菌株与载体 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·实验仪器 | 第25-26页 |
| ·培养基,主要溶液的配制 | 第26-28页 |
| ·实验及分析方法 | 第28-38页 |
| ·基因组的制备 | 第28页 |
| ·PCR获得目的基因 | 第28-30页 |
| ·目的基因克隆 | 第30-32页 |
| ·大肠杆菌表达载体的构建和重组菌诱导表达 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌-枯草杆菌穿梭质粒pP43JM2的构建 | 第33页 |
| ·枯草杆菌表达载体的构建和重组菌的培养 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第34-35页 |
| ·酶活测定 | 第35-38页 |
| 第3章 实验结果 | 第38-69页 |
| ·细菌纤维素外切酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达 | 第38-53页 |
| ·热纤梭菌(Clostridium thermocellum)的纤维素外切酶基因的克隆与表达 | 第38-47页 |
| ·解纤维梭菌(Clostridium cellulolyticum)纤维素外切酶基因的克隆与表达 | 第47-51页 |
| ·野油菜黄单孢菌中外切酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达 | 第51-53页 |
| ·枯草杆菌表达系统的建立和外切酶在枯草杆菌中的表达 | 第53-63页 |
| ·大肠杆菌-枯草杆菌穿梭质粒pP43JM2的构建 | 第53-55页 |
| ·热纤梭菌外切酶基因在枯草杆菌中的表达 | 第55-63页 |
| ·内切葡聚糖酶在枯草杆菌中的表达 | 第63-66页 |
| ·协同作用 | 第66-69页 |
| ·外切酶之间的协同作用 | 第66-67页 |
| ·外切酶与内切酶之间的协同作用 | 第67-69页 |
| 第4章 结论和展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
