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SEA/SEB对HSP65-MUC1 VNTR2融合蛋白特异性细胞免疫应答作用的研究

中文摘要第1-8页
Abstract第8-11页
英文缩略语第11-12页
前言第12-21页
 1 热休克蛋白及其在肿瘤免疫研究中的进展第12-14页
   ·热休克蛋白的结构和功能第12页
   ·热休克蛋白与抗原呈递第12-13页
   ·热休克蛋白与肿瘤免疫第13-14页
 2 MUC1 的结构及在机体免疫调节中的作用第14-15页
   ·MUC1 的结构第14-15页
   ·MUC1 在机体免疫调节中的作用第15页
 3 HSP_(s-)多肽肿瘤疫苗的研究进展第15-17页
   ·天然HSP-多肽肿瘤疫苗第15-16页
   ·人工合成HSP-多肽肿瘤疫苗第16页
   ·HSP-多肽融合蛋白肿瘤疫苗第16-17页
 4 以MUC1 为靶点的肿瘤疫苗研制的进展第17-18页
 5 超抗原第18-21页
   ·超抗原的概念第18-19页
   ·超抗原与T 细胞结合的特征第19页
   ·超抗原的生物学意义第19-21页
第一部分 HSP65-MUC1 VNTR_2融合蛋白的表达、纯化及抗肿瘤活性研究第21-35页
 一、实验材料第21-22页
   ·菌株和质粒第21页
   ·试剂第21-22页
 二、实验方法第22-28页
   ·BCG HSP65 编码序列的获取第22-23页
   ·HSP65-pMD18-T 克隆载体的构建第23页
   ·HSP65-pMD18-T 克隆载体的转化第23-24页
   ·HSP65-pMD18-T 阳性克隆的鉴定第24页
   ·HSP65-pET28a 重组质粒的构建第24页
   ·人MUC1 蛋白VNTRs 单个重复序列的获得第24页
   ·MUC1 VNTR1-pMD18-T 阳性克隆的鉴定第24页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2-pET28a 重组表达质粒的构建第24-25页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2 融合蛋白的表达第25-26页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2 融合蛋白的纯化第26页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2 蛋白的免疫印迹检测第26-27页
   ·MUC1 转染细胞Western blot 鉴定第27页
   ·MUC1 转染细胞肿瘤组织免疫组化鉴定第27-28页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2 蛋白对MUC1-816 肿瘤的免疫预防的效果第28页
 三、实验结果第28-33页
   ·结核分支杆菌HSP65 基因扩增第28页
   ·重叠PCR 获取人MUC1 VNTR1 序列第28-29页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2 蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化第29-30页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2 蛋白的Western 印迹鉴定第30页
   ·MUC1-816 转染细胞Western blot 鉴定第30-31页
   ·MUC1-816 转染细胞肿瘤组织免疫组化鉴定第31页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2 蛋白对MUC1-816 肿瘤的体内免疫预防的实验结果.第31-33页
 讨论第33-35页
第二部分 SEA/SEB 对 HSP65-MUC1 VNTR2融合蛋白特异性细胞免疫应答作用的研究第35-50页
 一、实验材料第35-36页
   ·试剂第35-36页
   ·细胞和动物第36页
   ·仪器第36页
 二、实验方法第36-40页
   ·动物分组与免疫第36-37页
   ·细胞免疫反应的检测第37-38页
   ·细胞毒性实验第38-39页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2 结合超抗原SE 对MUC1-816 肿瘤的体内预防作用第39页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2 结合超抗原SE 对816 肿瘤的体内预防作用第39页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2 结合超抗原SE 对MUC1-816 肿瘤的体内治疗作用第39-40页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2结合超抗原SE对MUC1-816肿瘤体内治疗的病理学观察第40页
 三、 实验结果第40-47页
   ·ELISPOT 检测MUC1 VNTR2 特异性T 细胞第40-41页
   ·细胞毒性实验第41-42页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2 结合超抗原SE 对MUC1-816 肿瘤的体内预防作用第42-43页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2 结合超抗原SE 对816 肿瘤的体内预防作用第43页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2 结合超抗原SE 对MUC1-816 肿瘤的体内治疗作用第43-46页
   ·HSP65-MUC1 VNTR2结合超抗原SE对MUC1-816肿瘤体内治疗的病理学观察第46-47页
 讨论第47-50页
结论第50-51页
参考文献第51-54页
附录第54-55页
综述第55-58页
致谢第58-59页
在学期间主要发表或待发表的文章第59页

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