中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
英文缩略语 | 第11-12页 |
前言 | 第12-21页 |
1 热休克蛋白及其在肿瘤免疫研究中的进展 | 第12-14页 |
·热休克蛋白的结构和功能 | 第12页 |
·热休克蛋白与抗原呈递 | 第12-13页 |
·热休克蛋白与肿瘤免疫 | 第13-14页 |
2 MUC1 的结构及在机体免疫调节中的作用 | 第14-15页 |
·MUC1 的结构 | 第14-15页 |
·MUC1 在机体免疫调节中的作用 | 第15页 |
3 HSP_(s-)多肽肿瘤疫苗的研究进展 | 第15-17页 |
·天然HSP-多肽肿瘤疫苗 | 第15-16页 |
·人工合成HSP-多肽肿瘤疫苗 | 第16页 |
·HSP-多肽融合蛋白肿瘤疫苗 | 第16-17页 |
4 以MUC1 为靶点的肿瘤疫苗研制的进展 | 第17-18页 |
5 超抗原 | 第18-21页 |
·超抗原的概念 | 第18-19页 |
·超抗原与T 细胞结合的特征 | 第19页 |
·超抗原的生物学意义 | 第19-21页 |
第一部分 HSP65-MUC1 VNTR_2融合蛋白的表达、纯化及抗肿瘤活性研究 | 第21-35页 |
一、实验材料 | 第21-22页 |
·菌株和质粒 | 第21页 |
·试剂 | 第21-22页 |
二、实验方法 | 第22-28页 |
·BCG HSP65 编码序列的获取 | 第22-23页 |
·HSP65-pMD18-T 克隆载体的构建 | 第23页 |
·HSP65-pMD18-T 克隆载体的转化 | 第23-24页 |
·HSP65-pMD18-T 阳性克隆的鉴定 | 第24页 |
·HSP65-pET28a 重组质粒的构建 | 第24页 |
·人MUC1 蛋白VNTRs 单个重复序列的获得 | 第24页 |
·MUC1 VNTR1-pMD18-T 阳性克隆的鉴定 | 第24页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2-pET28a 重组表达质粒的构建 | 第24-25页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2 融合蛋白的表达 | 第25-26页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2 融合蛋白的纯化 | 第26页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2 蛋白的免疫印迹检测 | 第26-27页 |
·MUC1 转染细胞Western blot 鉴定 | 第27页 |
·MUC1 转染细胞肿瘤组织免疫组化鉴定 | 第27-28页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2 蛋白对MUC1-816 肿瘤的免疫预防的效果 | 第28页 |
三、实验结果 | 第28-33页 |
·结核分支杆菌HSP65 基因扩增 | 第28页 |
·重叠PCR 获取人MUC1 VNTR1 序列 | 第28-29页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2 蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化 | 第29-30页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2 蛋白的Western 印迹鉴定 | 第30页 |
·MUC1-816 转染细胞Western blot 鉴定 | 第30-31页 |
·MUC1-816 转染细胞肿瘤组织免疫组化鉴定 | 第31页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2 蛋白对MUC1-816 肿瘤的体内免疫预防的实验结果. | 第31-33页 |
讨论 | 第33-35页 |
第二部分 SEA/SEB 对 HSP65-MUC1 VNTR2融合蛋白特异性细胞免疫应答作用的研究 | 第35-50页 |
一、实验材料 | 第35-36页 |
·试剂 | 第35-36页 |
·细胞和动物 | 第36页 |
·仪器 | 第36页 |
二、实验方法 | 第36-40页 |
·动物分组与免疫 | 第36-37页 |
·细胞免疫反应的检测 | 第37-38页 |
·细胞毒性实验 | 第38-39页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2 结合超抗原SE 对MUC1-816 肿瘤的体内预防作用 | 第39页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2 结合超抗原SE 对816 肿瘤的体内预防作用 | 第39页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2 结合超抗原SE 对MUC1-816 肿瘤的体内治疗作用 | 第39-40页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2结合超抗原SE对MUC1-816肿瘤体内治疗的病理学观察 | 第40页 |
三、 实验结果 | 第40-47页 |
·ELISPOT 检测MUC1 VNTR2 特异性T 细胞 | 第40-41页 |
·细胞毒性实验 | 第41-42页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2 结合超抗原SE 对MUC1-816 肿瘤的体内预防作用 | 第42-43页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2 结合超抗原SE 对816 肿瘤的体内预防作用 | 第43页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2 结合超抗原SE 对MUC1-816 肿瘤的体内治疗作用 | 第43-46页 |
·HSP65-MUC1 VNTR2结合超抗原SE对MUC1-816肿瘤体内治疗的病理学观察 | 第46-47页 |
讨论 | 第47-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-54页 |
附录 | 第54-55页 |
综述 | 第55-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
在学期间主要发表或待发表的文章 | 第59页 |