| 提要 | 第1-9页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-42页 |
| 综述一 草地畜牧业发展重要性 | 第11-18页 |
| 1 饲料产业现状和存在的问题 | 第11-12页 |
| 2 草地畜牧业的概况 | 第12-13页 |
| 3 草地在国民经济发展中的地位 | 第13-15页 |
| ·草地资源的组成 | 第13页 |
| ·草地的作用 | 第13-15页 |
| 4 草地畜牧业发展现状分析 | 第15-16页 |
| 5 发展草地畜牧业的需求 | 第16-18页 |
| 综述二 植物抗寒和紫花苜蓿抗寒基因研究 | 第18-42页 |
| 1 植物抗寒基因工程研究进展 | 第18-19页 |
| 2 抗寒力的相关因素机理 | 第19-24页 |
| 3 抗寒相关基因研究进展 | 第24-26页 |
| 4 紫花苜蓿的生物学特性和重要性 | 第26-29页 |
| 5 苜蓿抗寒性的形成及国内外研究进展 | 第29-31页 |
| 6 影响苜蓿抗寒性的相关因素 | 第31-33页 |
| 7 生态学特征与苜蓿抗寒性 | 第33-34页 |
| 8 苜蓿的秋眠性的研究判定 | 第34-37页 |
| 9 苜蓿转基因技术的研究现状 | 第37-39页 |
| 10 特异性抗寒基因 CAS | 第39-40页 |
| 11 研究目的和意义 | 第40-42页 |
| 第二部分 研究内容 | 第42-70页 |
| 实验一 耐寒基因CA519 的克隆与生物信息学分析 | 第42-56页 |
| 1 材料和方法 | 第42-49页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-54页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第49页 |
| ·RT-PCR 结果 | 第49页 |
| ·重组克隆载体pMD-18T-CAS 的酶切与 PCR 鉴定 | 第49-50页 |
| ·重组克隆载体pMD-18T-CAS 的序列测定 | 第50页 |
| ·CAS19 基因的生物信息学分析 | 第50-52页 |
| ·CAS19 基因的结构功能域分析 | 第52-53页 |
| ·CAS19 与其它 CAS 氨基酸序列的多序列比较 | 第53-54页 |
| ·CAS19与已克隆的CAS冷诱导蛋白的系统进化树分析 | 第54页 |
| 3 小结 | 第54-56页 |
| 实验二 PBCAS19 转基因烟草的获得及其耐寒性分析 | 第56-70页 |
| 1 材料与方法 | 第56-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-67页 |
| ·PBCAS19 表达载体的构建 | 第62-63页 |
| ·烟草的遗传转化及初步筛选 | 第63-67页 |
| ·T0 代转基因烟草的获得及分子检测 | 第63-65页 |
| ·T0 代转基因植株的 PCR 及 PCR-Southern 鉴定 | 第65-66页 |
| ·T0 代转基因植株的 RT-PCR 检测 | 第66-67页 |
| 3 展望 | 第67-68页 |
| 4 小结 | 第68页 |
| 5 讨论 | 第68-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 中文摘要 | 第80-82页 |
| 英文摘要 | 第82-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 导师简介 | 第86-87页 |
| 作者简介 | 第87页 |
