| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 多不饱和脂肪酸（PUFAs）简介及相关去饱和酶研究进展 | 第13-30页 |
| 1 PUFAs 的命名、分类、来源及生理功能 | 第13-16页 |
| 2 LCPUFAs 生物合成途径 | 第16-19页 |
| ·LCPUFAs 生物合成途径 | 第16-18页 |
| ·微藻LCPUFAs 生物合成 | 第18-19页 |
| 3 脂肪酸去饱和酶 | 第19-30页 |
| ·脂肪酸去饱和酶简介 | 第19-22页 |
| ·脂肪酸去饱和酶分类 | 第22页 |
| ·脂肪酸去饱和酶的结构 | 第22-24页 |
| ·脂肪酸去饱和酶的作用机制 | 第24-25页 |
| ·脂肪酸去饱和酶的研究 | 第25-27页 |
| ·脂肪酸去饱和酶的活性调控 | 第27-28页 |
| ·脂肪酸去饱和酶研究的展望 | 第28-30页 |
| 第二章 氮营养限制对三角褐指藻生长生理及其脂肪酸组成的影响 | 第30-44页 |
| 1 前言 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-37页 |
| ·三角褐指藻的分类、形态特征、藻种培养及分离鉴定 | 第31-35页 |
| ·分类 | 第31页 |
| ·形态特征 | 第31页 |
| ·藻种来源 | 第31页 |
| ·藻种培养 | 第31-32页 |
| ·藻种分离纯化与鉴定 | 第32-35页 |
| ·实验处理 | 第35-37页 |
| ·藻细胞处理及计数 | 第35页 |
| ·色素的测定 | 第35-36页 |
| ·脂肪酸组成及含量的分析 | 第36页 |
| ·数据处理 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-42页 |
| ·三角褐指藻DNA 图谱 | 第37页 |
| ·不同时间的氮营养胁迫对三角褐指藻生长的影响 | 第37-38页 |
| ·不同时间的氮营养胁迫对三角褐指藻光合色素的影响 | 第38-39页 |
| ·不同时间的氮胁迫对三角褐指藻脂肪酸组成的影响 | 第39-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 三角褐指藻Δ5 去饱和酶基因的原核表达 | 第44-55页 |
| 1 前言 | 第44-45页 |
| 2 实验步骤 | 第45-50页 |
| ·三角褐指藻的藻种来源以及培养条件 | 第45页 |
| ·表达载体 | 第45页 |
| ·三角褐指藻类Δ5 脂肪酸去饱和酶的基因克隆 | 第45-48页 |
| ·试剂与仪器 | 第45-46页 |
| ·三角褐指藻RNA 的提取 | 第46-47页 |
| ·三角褐指藻cDNA 第一链的合成 | 第47页 |
| ·cDNA 第二链的合成与PCR 扩增 | 第47-48页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第48-50页 |
| ·酶切 | 第48-49页 |
| ·连接 | 第49-50页 |
| ·Δ5 脂肪酸去饱和酶基因诱导表达 | 第50页 |
| ·平板实验 | 第50页 |
| 3 结果 | 第50-53页 |
| ·Δ5 脂肪酸去饱和酶基因分离 | 第50-51页 |
| ·重组质粒构建 | 第51-52页 |
| ·蛋白诱导表达 | 第52页 |
| ·Δ5 脂肪酸去饱和酶表达对大肠杆菌的影响 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 Δ5-脂肪酸去饱和酶在酵母中的真核表达 | 第55-64页 |
| 1 前言 | 第55-56页 |
| 2 方法步骤 | 第56-60页 |
| ·藻种培养 | 第56页 |
| ·试剂与仪器(参见第二章2.1.4.1) | 第56页 |
| ·培养条件(表1-6) | 第56页 |
| ·表达载体和宿主 | 第56页 |
| ·表达载体 | 第56页 |
| ·表达宿主 | 第56页 |
| ·Δ5 脂肪酸去饱和酶基因克隆（参见第三章2.3） | 第56页 |
| ·表达载体的构建 | 第56-58页 |
| ·引物设计 | 第56-57页 |
| ·酶切 | 第57页 |
| ·连接 | 第57-58页 |
| ·酿酒酵母感受态细胞的制备及转化 | 第58-59页 |
| ·酵母菌株的诱导表达及脂肪酸分析 | 第59-60页 |
| ·诱导表达 | 第59页 |
| ·脂肪酸提取及分析 | 第59-60页 |
| 3 实验结果 | 第60-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-77页 |
| 附录 0 | 第77-78页 |
| 附录 1 | 第78-79页 |
| 附录 2 | 第79-80页 |
| 附录 3 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 个人简历 | 第83页 |
| 发表的学术论文 | 第83页 |
