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鸭α-干扰素基因疫苗高密度发酵及免疫鸭抗鸭瘟强毒人工感染的研究

目录第1-6页
本论文的创新型研究工作第6-7页
中文摘要第7-8页
ABSTRACT第8-10页
1 前言第10-15页
   ·干扰素的研究概况第10-13页
     ·干扰素的分类及理化特性第10-11页
     ·干扰素产生的机理第11页
     ·干扰素的生物学活性第11-12页
       ·抗病毒作用第12页
       ·抗肿瘤作用第12页
       ·免疫调节作用第12页
     ·鸭干扰素研究进展第12-13页
       ·鸭I干扰素第12-13页
       ·鸭II干扰素第13页
   ·基因工程菌的高密度发酵第13-14页
   ·实验目的及意义第14-15页
2 材料与方法第15-22页
   ·实验材料第15-17页
     ·毒株、菌株、质粒及疫苗第15页
     ·实验动物第15页
     ·主要实验仪器第15-16页
     ·主要实验试剂及其配制第16-17页
   ·实验方法第17-22页
     ·发酵罐培养pcDNA-SDIFN-α基因工程菌条件优化第17-19页
       ·培养基第17页
       ·种子液制备第17页
       ·发酵罐中分批补料培养第17-18页
       ·正交实验设计第18页
       ·菌体浓度测定第18-19页
       ·菌体湿重测定第19页
       ·质粒拷贝测定第19页
     ·基因枪“子弹”的准备第19页
     ·pcDNA-SDIFN-α的免疫及人工感染鸭瘟强毒第19-20页
     ·样品采集和处理第20页
     ·血液中鸭瘟病毒DNA的抽提第20-21页
     ·组织中鸭瘟病毒DNA的抽提第21页
     ·TaqMan探针实时荧光定量PCR检测DPV的反应体系和扩增条件第21页
     ·TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR检测鸭瘟病毒DNA标准曲线第21-22页
3 实验结果第22-33页
   ·正交实验结果第22-23页
   ·TaqMan探针实时荧光定量PCR对鸭外周血中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第23-27页
     ·pcDNA-SDIFN-α基因枪免疫后不同途径攻毒鸭外周血中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第23-25页
       ·基因枪免疫后皮下攻毒鸭外周血中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第23页
       ·基因枪免疫后滴鼻攻毒鸭外周血中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第23-24页
       ·基因枪免疫后口服攻毒鸭外周血中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第24-25页
     ·pcDNA-SDIFN-α肌肉注射免疫后不同途径攻毒鸭外周血中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第25-27页
       ·肌肉注射免疫后皮下攻毒鸭外周血中的鸭瘟病毒DNA的定量检第25页
       ·肌肉注射免疫后滴鼻攻毒鸭外周血中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第25-26页
       ·肌肉注射免疫后口服攻毒鸭外周血中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第26-27页
   ·TaqMan探针实时荧光定量PCR对病死鸭各组织器官中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第27-33页
     ·pcDNA-SDIFN-α基因枪免疫后不同途径攻毒病死鸭各组织器官中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第27-29页
       ·基因枪免疫后皮下攻毒病死鸭各组织器官中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第27-28页
       ·基因枪免疫后滴鼻攻毒病死鸭各组织器官中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第28页
       ·基因枪免疫后口服攻毒病死鸭各组织器官中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第28-29页
     ·pcDNA-SDIFN-α肌肉注射免疫后不同途径攻毒病死鸭各组织器官中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第29-33页
       ·肌肉注射免疫皮下攻毒组病死鸭各组织器官中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第29-30页
       ·肌肉注射免疫滴鼻攻毒组病死鸭各组织器官中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第30-31页
       ·肌肉注射免疫口服攻毒组病死鸭各组织器官中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第31-33页
4 讨论第33-40页
   ·发酵培养条件第33-34页
     ·温度第33页
     ·pH值第33页
     ·溶氧浓度第33页
     ·接种量第33-34页
     ·发酵方式的选择第34页
   ·实时荧光定量PCR技术第34-35页
   ·pcDNA-SDIFN-α基因枪轰击和肌肉注射免疫后不同途径攻毒鸭外周血中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第35-37页
   ·免疫途径对pcDNA-IFN-α基因疫苗免疫效果的影响第37-38页
   ·免疫剂量对pcDNA-IFN-α基因疫苗免疫效果的影响第38页
   ·攻击鸭瘟强毒剂量的选择第38-39页
   ·TaqMan探针实时荧光定量PCR对病死鸭各组织器官中的鸭瘟病毒DNA的定量检测第39页
   ·鸭瘟强毒感染康复鸭带毒问题第39-40页
5 结论第40-41页
参考文献第41-45页
致谢第45-46页
攻读学位期间发表的学术论文目录第46页

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