中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
缩略词 | 第12-15页 |
前言 | 第15-52页 |
1. 戊型肝炎病毒及其衣壳蛋白表位、抗体的研究进展 | 第15-36页 |
·戊型肝炎 | 第15-20页 |
·戊型肝炎病毒的生物学特性 | 第20-36页 |
2. 抗体与抗原的相互作用 | 第36-47页 |
·抗体及其空间结构 | 第36-39页 |
·抗体与抗原的相互作用 | 第39-47页 |
3. 噬菌体展示系统 | 第47-50页 |
·噬菌体展示系统基本原理及应用 | 第47-48页 |
·噬菌体展示肽库及其应用 | 第48-50页 |
4. 本论文研究的思路、目的和意义 | 第50-52页 |
材料与方法 | 第52-78页 |
1. 材料 | 第52-59页 |
·主要仪器 | 第52-53页 |
·主要试剂与材料 | 第53-54页 |
·常用溶液及培养基配制 | 第54-59页 |
2. 方法 | 第59-78页 |
·基因克隆 | 第59-61页 |
·重组蛋白的表达与纯化 | 第61-64页 |
·重组蛋白性质的分析方法 | 第64-65页 |
·细胞实验 | 第65-66页 |
·杂交瘤融合制备MAb | 第66-69页 |
·MAb性质鉴定 | 第69-71页 |
·木瓜蛋白酶制备MAb Fab片段 | 第71页 |
·恒河猴感染实验 | 第71-72页 |
·噬菌体随机7 肽库的操作 | 第72-74页 |
·生物传感器相关操作 | 第74-76页 |
·分析型超速离心机相关操作 | 第76-77页 |
·计算机辅助分析与设计 | 第77-78页 |
结果与分析 | 第78-112页 |
第一部分 抗HEV ORF2 MAb及其Fab片段的制备 | 第78-83页 |
1. MAb的筛选 | 第78-82页 |
2. MAb Fab片段的制备及纯化 | 第82-83页 |
第二部分 HEV中和表位的鉴定及表位特征研究 | 第83-107页 |
1. HEV MAb识别表位在NE2 蛋白上的空间位置关系 | 第83-86页 |
2. HEV 病毒外表面表位的鉴定 | 第86-87页 |
3. MAb 8C11 和8H3 的中和活性 | 第87-88页 |
4. 中和表位8C11 和8H3 也是HEV的免疫优势表位 | 第88-90页 |
5. HEV衣壳蛋白上8C11 表位的结合引发8H3 表位的构象变化 | 第90-98页 |
6. 8C11、8H3 中和表位的形成区域 | 第98-99页 |
7. 溶液中中和MAb与NE2 蛋白相互作用的AU技术分析 | 第99-107页 |
第三部分 HEV ORF2 中和表位模拟肽初步研究 | 第107-112页 |
1. 表位模拟肽的筛选及序列特征 | 第107页 |
2. MAb 8H3 筛选到的模拟7 肽的合成及结合活性检测 | 第107-108页 |
3. 表位模拟肽的克隆表达及活性鉴定 | 第108-112页 |
讨论 | 第112-122页 |
1. HEV衣壳蛋白的表位特征 | 第112-113页 |
2. HEV免疫优势中和表位区域 | 第113-114页 |
3. HEV两个中和表位与病毒感染机制的关系 | 第114页 |
4. HEV衣壳蛋白中和表位间的构象诱导 | 第114-116页 |
5. HEV感染的免疫学诊断 | 第116-117页 |
6. HEV疫苗的质控 | 第117页 |
7. HEV中和表位模拟肽的筛选 | 第117-118页 |
8. 抗体片段的生物学意义 | 第118-120页 |
9. AU技术分析HEV中和MAb与NE2 蛋白的相互作用 | 第120-122页 |
小结与展望 | 第122-124页 |
参考文献 | 第124-142页 |
致谢 | 第142-143页 |
附录 | 第143-145页 |
一、 在校期间发表论文 | 第143-145页 |
二、 在校期间获得奖励 | 第145页 |