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五指山猪SLA-DQA基因的克隆及在大肠杆菌的表达

中文摘要第1-3页
Summary第3-7页
前言第7-10页
第一章 文献综述第10-32页
 1 MHC 的发现第10-11页
 2 猪 MHC 研究进展第11-31页
   ·SLA 在染色体上的位置第11-12页
   ·SLA 的特点第12-13页
   ·SLA 的分类第13-30页
     ·SLAⅠ类分子及其基因第13-20页
       ·SLAⅠ类抗原分布第13-14页
       ·SLAⅠ类分子的组成第14-15页
       ·SLAⅠ类基因结构及调控第15-17页
       ·SLAⅠ类区域基因第17-20页
     ·SLAⅡ类分子及其基因第20-27页
       ·SLAⅡ类抗原分布第20-21页
       ·SLAⅡ类分子的组成第21-22页
       ·SLAⅡ类基因结构及表达调控第22-24页
       ·SLAⅡ类区域基因第24-26页
       ·非 SLAⅡ类基因第26-27页
     ·SLAⅢ类基因及研究概括第27-30页
       ·SLAⅢ类基因第27-28页
       ·SLAⅢ类区域研究概括第28-30页
   ·SLA 的功能概述第30-31页
     ·参与 T 细胞应答第30页
     ·参与免疫应答的遗传控制第30页
     ·约束免疫细胞间的相互作用第30-31页
     ·参与抗原处理第31页
     ·参与免疫调节第31页
     ·参与免疫细胞的分化第31页
 3. SLA 的研究展望第31-32页
第二章 实验研究第32-52页
 1. 材料与仪器第32-33页
   ·材料第32-33页
     ·菌种及质粒第32页
     ·酶类及其他试剂第32页
     ·培养基及常用溶液第32-33页
   ·主要仪器及设备第33页
 2 方法与步骤第33-44页
   ·引物的设计与合成第33-34页
   ·脾脏组织 RNA 的提取第34页
   ·SLA-DQA 基因的 RT-PCR第34-35页
     ·SLA-DQA 基因cDNA 的第一链合成第34页
     ·SLA-DQA 基因cDNA 的 PCR 扩增第34-35页
   ·目的基因的克隆第35-36页
     ·PCR 产物的回收与纯化第35页
     ·PCR 产物与载体的连接第35-36页
     ·DH5α感受态细胞的制备第36页
     ·连接产物转化感受态细胞第36页
   ·阳性克隆的筛选与鉴定第36-37页
     ·阳性菌落的 PCR 鉴定第36-37页
     ·阳性菌落的酶切鉴定第37页
     ·目的基因的核苷酸序列测定第37页
   ·重组表达载体的构建与鉴定第37-41页
     ·目的基因的获得第37-38页
     ·表达载体 PET-28a(+)质粒的制备第38-39页
     ·表达载体 PET-28a(+)的酶切第39页
     ·酶切产物的纯化第39页
     ·目的基因与表达载体的连接与转化第39-41页
       ·目的基因与表达载体的连接第39-41页
       ·重组质粒的转化第41页
     ·转化子的筛选第41页
       ·菌液 PCR 的鉴定第41页
       ·重组质粒的酶切鉴定第41页
   ·重组质粒的诱导表达第41-42页
     ·重组质粒转化 E.coli BL21(DE3)受体菌第41-42页
     ·IPTG 的诱导表达第42页
   ·表达产物的 SDS-PAGE 检测第42-44页
     ·所用溶液的配制第42-43页
     ·聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第43-44页
 3 结果第44-47页
   ·RT-PCR 产物的电泳结果第44页
   ·目的基因的克隆及鉴定第44-47页
     ·重组质粒的 PCR、酶切鉴定第44-45页
     ·重组质粒的序列分析第45-46页
     ·重组表达载体的构建及鉴定第46-47页
   ·表达产物的 SDS-PAGE 检测第47页
 4 讨论第47-50页
   ·RNA 的提取及 RT-PCR第47页
   ·引物的设计及 PCR 的扩增第47-48页
   ·基因的克隆第48-49页
   ·大肠杆菌表达系统的选择第49-50页
   ·影响蛋白表达的因素第50页
 5 结论第50-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-60页
个人简介第60-61页
导师简介第61-63页

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