中文摘要 | 第1-3页 |
Summary | 第3-7页 |
前言 | 第7-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-32页 |
1 MHC 的发现 | 第10-11页 |
2 猪 MHC 研究进展 | 第11-31页 |
·SLA 在染色体上的位置 | 第11-12页 |
·SLA 的特点 | 第12-13页 |
·SLA 的分类 | 第13-30页 |
·SLAⅠ类分子及其基因 | 第13-20页 |
·SLAⅠ类抗原分布 | 第13-14页 |
·SLAⅠ类分子的组成 | 第14-15页 |
·SLAⅠ类基因结构及调控 | 第15-17页 |
·SLAⅠ类区域基因 | 第17-20页 |
·SLAⅡ类分子及其基因 | 第20-27页 |
·SLAⅡ类抗原分布 | 第20-21页 |
·SLAⅡ类分子的组成 | 第21-22页 |
·SLAⅡ类基因结构及表达调控 | 第22-24页 |
·SLAⅡ类区域基因 | 第24-26页 |
·非 SLAⅡ类基因 | 第26-27页 |
·SLAⅢ类基因及研究概括 | 第27-30页 |
·SLAⅢ类基因 | 第27-28页 |
·SLAⅢ类区域研究概括 | 第28-30页 |
·SLA 的功能概述 | 第30-31页 |
·参与 T 细胞应答 | 第30页 |
·参与免疫应答的遗传控制 | 第30页 |
·约束免疫细胞间的相互作用 | 第30-31页 |
·参与抗原处理 | 第31页 |
·参与免疫调节 | 第31页 |
·参与免疫细胞的分化 | 第31页 |
3. SLA 的研究展望 | 第31-32页 |
第二章 实验研究 | 第32-52页 |
1. 材料与仪器 | 第32-33页 |
·材料 | 第32-33页 |
·菌种及质粒 | 第32页 |
·酶类及其他试剂 | 第32页 |
·培养基及常用溶液 | 第32-33页 |
·主要仪器及设备 | 第33页 |
2 方法与步骤 | 第33-44页 |
·引物的设计与合成 | 第33-34页 |
·脾脏组织 RNA 的提取 | 第34页 |
·SLA-DQA 基因的 RT-PCR | 第34-35页 |
·SLA-DQA 基因cDNA 的第一链合成 | 第34页 |
·SLA-DQA 基因cDNA 的 PCR 扩增 | 第34-35页 |
·目的基因的克隆 | 第35-36页 |
·PCR 产物的回收与纯化 | 第35页 |
·PCR 产物与载体的连接 | 第35-36页 |
·DH5α感受态细胞的制备 | 第36页 |
·连接产物转化感受态细胞 | 第36页 |
·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第36-37页 |
·阳性菌落的 PCR 鉴定 | 第36-37页 |
·阳性菌落的酶切鉴定 | 第37页 |
·目的基因的核苷酸序列测定 | 第37页 |
·重组表达载体的构建与鉴定 | 第37-41页 |
·目的基因的获得 | 第37-38页 |
·表达载体 PET-28a(+)质粒的制备 | 第38-39页 |
·表达载体 PET-28a(+)的酶切 | 第39页 |
·酶切产物的纯化 | 第39页 |
·目的基因与表达载体的连接与转化 | 第39-41页 |
·目的基因与表达载体的连接 | 第39-41页 |
·重组质粒的转化 | 第41页 |
·转化子的筛选 | 第41页 |
·菌液 PCR 的鉴定 | 第41页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第41页 |
·重组质粒的诱导表达 | 第41-42页 |
·重组质粒转化 E.coli BL21(DE3)受体菌 | 第41-42页 |
·IPTG 的诱导表达 | 第42页 |
·表达产物的 SDS-PAGE 检测 | 第42-44页 |
·所用溶液的配制 | 第42-43页 |
·聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第43-44页 |
3 结果 | 第44-47页 |
·RT-PCR 产物的电泳结果 | 第44页 |
·目的基因的克隆及鉴定 | 第44-47页 |
·重组质粒的 PCR、酶切鉴定 | 第44-45页 |
·重组质粒的序列分析 | 第45-46页 |
·重组表达载体的构建及鉴定 | 第46-47页 |
·表达产物的 SDS-PAGE 检测 | 第47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
·RNA 的提取及 RT-PCR | 第47页 |
·引物的设计及 PCR 的扩增 | 第47-48页 |
·基因的克隆 | 第48-49页 |
·大肠杆菌表达系统的选择 | 第49-50页 |
·影响蛋白表达的因素 | 第50页 |
5 结论 | 第50-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
个人简介 | 第60-61页 |
导师简介 | 第61-63页 |