| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 1前言 | 第13-47页 |
| ·鱼类免疫机制研究进展 | 第14-29页 |
| ·鱼类免疫系统概述 | 第14-16页 |
| ·鱼类细胞因子－白介素－1β | 第16-22页 |
| ·鱼类免疫机制研究进展 | 第22-29页 |
| ·SNAREs 蛋白在免疫应答中作用的研究进展 | 第29-36页 |
| ·SNAREs 蛋白在胞吐和分泌过程中的功能 | 第29-33页 |
| ·SNARE 蛋白参与调控免疫细胞的胞吐 | 第33-36页 |
| ·T淋巴细胞中钾离子通道的研究进展 | 第36-46页 |
| ·T 淋巴细胞中钾离子通道的结构和种类 | 第36-41页 |
| ·T 淋巴细胞中钾离子通道的表达变化 | 第41-42页 |
| ·T 淋巴细胞中钾离子通道的生理作用 | 第42-46页 |
| ·本研究的目的意义 | 第46-47页 |
| 2 大菱鲆(Scophthalmus maximus)抗鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染的免疫应答反应的研究 | 第47-63页 |
| ·材料与仪器 | 第48-49页 |
| ·仪器与设备 | 第48-49页 |
| ·材料与试剂 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-53页 |
| ·大菱鲆血清和脾、头肾及血液白细胞的制备 | 第49-50页 |
| ·大菱鲆白细胞吞噬鳗弧菌活性的测定 | 第50-51页 |
| ·大菱鲆白细胞杀菌活性的测定 | 第51页 |
| ·大菱鲆白细胞呼吸爆发活性的测定 | 第51-52页 |
| ·大菱鲆血清中促炎症细胞因子IL-1β含量的测定 | 第52-53页 |
| ·大菱鲆淋巴细胞增殖测定 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-58页 |
| ·大菱鲆白细胞吞噬鳗弧菌活性 | 第53-54页 |
| ·大菱鲆白细胞杀菌活性 | 第54-55页 |
| ·大菱鲆呼吸爆发活性 | 第55-56页 |
| ·大菱鲆细胞因子IL-1β分泌 | 第56-57页 |
| ·大菱鲆淋巴细胞增殖 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-61页 |
| ·结论 | 第61-63页 |
| 3 大菱鲆 SNARE 蛋白基因的克隆和序列分析 | 第63-88页 |
| ·材料与仪器 | 第65页 |
| ·仪器与设备 | 第65页 |
| ·材料与试剂 | 第65页 |
| ·实验方法 | 第65-70页 |
| ·大菱鲆SNARE 基因扩增引物设计 | 第65-66页 |
| ·RNA 的提取 | 第66页 |
| ·cDNA 合成 | 第66-67页 |
| ·PCR 扩增 | 第67页 |
| ·PCR 产物克隆 | 第67-68页 |
| ·测序结果验证 | 第68-69页 |
| ·序列分析 | 第69-70页 |
| ·结果 | 第70-85页 |
| ·RNA 的提取 | 第70-71页 |
| ·PCR 扩增结果 | 第71-72页 |
| ·测序结果 | 第72-76页 |
| ·同源性分析 | 第76-77页 |
| ·一级结构分析 | 第77-80页 |
| ·二级结构预测 | 第80-83页 |
| ·三维结构预测展示 | 第83-84页 |
| ·疏水性分析 | 第84-85页 |
| ·讨论 | 第85-87页 |
| ·结论 | 第87-88页 |
| 4大菱鲆 VAMP-2蛋白参与细胞因子 IL－1β分泌的调控 | 第88-101页 |
| ·材料与仪器 | 第89-90页 |
| ·仪器与设备 | 第89页 |
| ·材料与试剂 | 第89-90页 |
| ·实验方法 | 第90-93页 |
| ·鳗弧菌免疫鱼体 | 第90页 |
| ·血清和白细胞的制备 | 第90-91页 |
| ·血清中IL-1β含量的测定 | 第91页 |
| ·IL-1β和 VAMP-2 的 RT-PCR | 第91-92页 |
| ·VAMP-2 的免疫印迹 | 第92-93页 |
| ·VAMP-2 的激光共聚焦显微镜扫描 | 第93页 |
| ·结果 | 第93-98页 |
| ·受感染鱼白细胞IL-1β分泌 | 第93-95页 |
| ·VAMP-2 基因在大菱鲆白细胞中表达 | 第95-96页 |
| ·受鳗弧菌刺激的鱼体白细胞中 VAMP-2 蛋白的表达量增加 | 第96-97页 |
| ·VAMP-2 定位于大菱鲆白细胞的分泌小泡上 | 第97-98页 |
| ·讨论 | 第98-100页 |
| ·结论 | 第100-101页 |
| 5 大菱鲆钾离子通道参与调控淋巴细胞增殖的研究 | 第101-115页 |
| ·材料与仪器 | 第101-102页 |
| ·仪器与设备 | 第101-102页 |
| ·材料与试剂 | 第102页 |
| ·实验方法 | 第102-105页 |
| ·MTT 法检测钾离子通道阻断剂 TEA 和4-AP 对鳗弧菌感染72 小时后大菱鲆外周血淋巴细胞增殖的影响 | 第102-103页 |
| ·鳗弧菌感染前后大菱鲆外周血淋巴细胞钾离子通道变化的检测 | 第103-105页 |
| ·结果 | 第105-112页 |
| ·淋巴细胞的贴壁 | 第105-106页 |
| ·通道阻断剂 TEA 和 4-AP 对淋巴细胞增殖的影响 | 第106-109页 |
| ·受鳗弧菌感染前后大菱鲆淋巴细胞钾离子通道特性 | 第109页 |
| ·通道阻断剂 TEA 和 4-AP 对淋巴细胞钾离子通道的影响 | 第109-112页 |
| ·讨论 | 第112-114页 |
| ·结论 | 第114-115页 |
| 本论文创新点 | 第115-116页 |
| 发表文章 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-142页 |
| 致谢 | 第142页 |
