短短芽孢杆菌XDH的鉴定及其抗菌物质的分离、纯化与部分性质研究
| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 1 前言 | 第14-22页 |
| ·细菌的分类鉴定 | 第14-15页 |
| ·16SrRNA 的概念 | 第14-15页 |
| ·16SrRNA 序列分析在细菌鉴定中的应用 | 第15页 |
| ·短芽孢杆菌及其产生的活性物质 | 第15-18页 |
| ·短芽孢杆菌属 | 第15-16页 |
| ·短芽孢杆菌产生的活性物质 | 第16-18页 |
| ·几丁质酶 | 第16-17页 |
| ·短杆菌肽 | 第17-18页 |
| ·色谱技术在物质分离纯化的应用 | 第18-20页 |
| ·凝胶色谱在物质分离纯化中的应用 | 第18-19页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)在物质分离纯化中的应用 | 第19-20页 |
| ·质谱(MS)分析在物质结构鉴定中的应用 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-38页 |
| ·材料 | 第22-25页 |
| ·供试菌株 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·固体培养基 | 第22页 |
| ·摇瓶发酵培养基 | 第22页 |
| ·发酵种子培养基 | 第22页 |
| ·病原菌 | 第22-23页 |
| ·引物 | 第23页 |
| ·主要软件 | 第23页 |
| ·主要药品试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-38页 |
| ·a’311 菌体形态观察及生理生化指标测定 | 第25-28页 |
| ·菌落及菌体形态观察 | 第25页 |
| ·葡萄糖氧化发酵试验 | 第25页 |
| ·需氧性测定试验 | 第25页 |
| ·柠檬酸盐利用试验 | 第25-26页 |
| ·硝酸盐还原试验 | 第26页 |
| ·接触酶试验 | 第26页 |
| ·V-P 试验 | 第26页 |
| ·酪朊水解试验 | 第26-27页 |
| ·淀粉水解试验 | 第27页 |
| ·明胶液化试验 | 第27页 |
| ·酪氨酸水解试验 | 第27页 |
| ·M.R.试验 | 第27页 |
| ·糖醇类发酵试验 | 第27-28页 |
| ·a’311菌株16S rDNA序列分析 | 第28-30页 |
| ·DNA 提取 | 第28页 |
| ·16S rDNA片段扩增 | 第28-29页 |
| ·DNA 纯化 | 第29页 |
| ·质粒载体与目的DNA连接 | 第29页 |
| ·感受态细胞制备 | 第29页 |
| ·转化 | 第29-30页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第30页 |
| ·测序 | 第30页 |
| ·16S rDNA序列分析 | 第30页 |
| ·a’311 菌株的发酵 | 第30-32页 |
| ·指示菌生长曲线测定 | 第30-31页 |
| ·发酵液效价测定 | 第31-32页 |
| ·发酵培养基选择 | 第32页 |
| ·发酵时间选择 | 第32页 |
| ·a’311 菌株抗菌物质的分离纯化 | 第32-34页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第32页 |
| ·Sephadex G-100 柱层析 | 第32-33页 |
| ·Sephadex G-50 柱层析 | 第33页 |
| ·分析高效液相色谱 | 第33页 |
| ·制备高效液相色谱 | 第33-34页 |
| ·抗菌物质的性质研究 | 第34-38页 |
| ·溶解性 | 第34页 |
| ·紫外吸收 | 第34页 |
| ·茚三酮反应 | 第34页 |
| ·捷克八溶剂系统纸层析 | 第34-35页 |
| ·质谱分析 | 第35页 |
| ·蛋白酶对抗菌物质活性影响 | 第35页 |
| ·温度对抗菌物质活性影响 | 第35-36页 |
| ·pH 对抗菌物质活性影响 | 第36页 |
| ·紫外线对抗菌物质活性影响 | 第36页 |
| ·抑菌谱测定 | 第36页 |
| ·抗菌物质对病原细菌MIC和MBC的测定 | 第36-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-64页 |
| ·a’311菌株鉴定结果 | 第38-42页 |
| ·菌体形态及生理生化指标测定结果 | 第38-40页 |
| ·165 rDNA 序列及其系统进化树 | 第40-42页 |
| ·a’311 菌株发酵结果 | 第42-46页 |
| ·指示菌的生长曲线 | 第42页 |
| ·发酵液的效价测定标准曲线 | 第42-44页 |
| ·发酵培养基 | 第44-45页 |
| ·发酵时间 | 第45-46页 |
| ·a’311菌株抗菌物质的分离纯化结果 | 第46-54页 |
| ·硫酸铵盐析结果 | 第46页 |
| ·SephadexG-100 柱层析结果 | 第46-47页 |
| ·SephadexG-50 柱层析结果 | 第47-48页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)分析结果 | 第48-52页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)制备结果 | 第52-54页 |
| ·抗菌物质的性质研究结果 | 第54-64页 |
| ·溶解性 | 第54-55页 |
| ·紫外吸收 | 第55页 |
| ·茚三酮反应 | 第55-56页 |
| ·捷克八溶剂系统纸层析结果 | 第56页 |
| ·质谱分析结果 | 第56-59页 |
| ·蛋白酶对抗菌物质活性的影响 | 第59页 |
| ·温度对抗菌物质活性的影响 | 第59-60页 |
| ·pH 对抗菌物质活性的影响 | 第60-61页 |
| ·紫外照射对抗菌物质活性的影响 | 第61-62页 |
| ·抑菌谱 | 第62页 |
| ·抗菌物质对病原细菌MIC 和MBC | 第62-64页 |
| 4 讨论 | 第64-67页 |
| ·关于a’311 菌株的鉴定 | 第64页 |
| ·关于a’311 菌株的发酵 | 第64-65页 |
| ·关于a’311 抗菌物的分离纯化 | 第65页 |
| ·关于a’311 抗菌物质的性质研究 | 第65-66页 |
| ·关于a’311 抗菌物质的结构解析 | 第66页 |
| ·关于a’311 抗菌物质的应用 | 第66-67页 |
| 5 结论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 附录 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第80页 |