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短短芽孢杆菌XDH的鉴定及其抗菌物质的分离、纯化与部分性质研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
英文缩略表第13-14页
1 前言第14-22页
   ·细菌的分类鉴定第14-15页
     ·16SrRNA 的概念第14-15页
     ·16SrRNA 序列分析在细菌鉴定中的应用第15页
   ·短芽孢杆菌及其产生的活性物质第15-18页
     ·短芽孢杆菌属第15-16页
     ·短芽孢杆菌产生的活性物质第16-18页
       ·几丁质酶第16-17页
       ·短杆菌肽第17-18页
   ·色谱技术在物质分离纯化的应用第18-20页
     ·凝胶色谱在物质分离纯化中的应用第18-19页
     ·高效液相色谱(HPLC)在物质分离纯化中的应用第19-20页
   ·质谱(MS)分析在物质结构鉴定中的应用第20-21页
   ·本研究的目的意义第21-22页
2 材料与方法第22-38页
   ·材料第22-25页
     ·供试菌株第22页
     ·培养基第22页
       ·固体培养基第22页
       ·摇瓶发酵培养基第22页
       ·发酵种子培养基第22页
     ·病原菌第22-23页
     ·引物第23页
     ·主要软件第23页
     ·主要药品试剂第23-24页
     ·主要仪器第24-25页
   ·方法第25-38页
     ·a’311 菌体形态观察及生理生化指标测定第25-28页
       ·菌落及菌体形态观察第25页
       ·葡萄糖氧化发酵试验第25页
       ·需氧性测定试验第25页
       ·柠檬酸盐利用试验第25-26页
       ·硝酸盐还原试验第26页
       ·接触酶试验第26页
       ·V-P 试验第26页
       ·酪朊水解试验第26-27页
       ·淀粉水解试验第27页
       ·明胶液化试验第27页
       ·酪氨酸水解试验第27页
       ·M.R.试验第27页
       ·糖醇类发酵试验第27-28页
     ·a’311菌株16S rDNA序列分析第28-30页
       ·DNA 提取第28页
       ·16S rDNA片段扩增第28-29页
       ·DNA 纯化第29页
       ·质粒载体与目的DNA连接第29页
       ·感受态细胞制备第29页
       ·转化第29-30页
       ·重组质粒鉴定第30页
       ·测序第30页
       ·16S rDNA序列分析第30页
     ·a’311 菌株的发酵第30-32页
       ·指示菌生长曲线测定第30-31页
       ·发酵液效价测定第31-32页
       ·发酵培养基选择第32页
       ·发酵时间选择第32页
     ·a’311 菌株抗菌物质的分离纯化第32-34页
       ·硫酸铵盐析第32页
       ·Sephadex G-100 柱层析第32-33页
       ·Sephadex G-50 柱层析第33页
       ·分析高效液相色谱第33页
       ·制备高效液相色谱第33-34页
     ·抗菌物质的性质研究第34-38页
       ·溶解性第34页
       ·紫外吸收第34页
       ·茚三酮反应第34页
       ·捷克八溶剂系统纸层析第34-35页
       ·质谱分析第35页
       ·蛋白酶对抗菌物质活性影响第35页
       ·温度对抗菌物质活性影响第35-36页
       ·pH 对抗菌物质活性影响第36页
       ·紫外线对抗菌物质活性影响第36页
       ·抑菌谱测定第36页
       ·抗菌物质对病原细菌MIC和MBC的测定第36-38页
3 结果与分析第38-64页
   ·a’311菌株鉴定结果第38-42页
     ·菌体形态及生理生化指标测定结果第38-40页
     ·165 rDNA 序列及其系统进化树第40-42页
   ·a’311 菌株发酵结果第42-46页
     ·指示菌的生长曲线第42页
     ·发酵液的效价测定标准曲线第42-44页
     ·发酵培养基第44-45页
     ·发酵时间第45-46页
   ·a’311菌株抗菌物质的分离纯化结果第46-54页
     ·硫酸铵盐析结果第46页
     ·SephadexG-100 柱层析结果第46-47页
     ·SephadexG-50 柱层析结果第47-48页
     ·高效液相色谱(HPLC)分析结果第48-52页
     ·高效液相色谱(HPLC)制备结果第52-54页
   ·抗菌物质的性质研究结果第54-64页
     ·溶解性第54-55页
     ·紫外吸收第55页
     ·茚三酮反应第55-56页
     ·捷克八溶剂系统纸层析结果第56页
     ·质谱分析结果第56-59页
     ·蛋白酶对抗菌物质活性的影响第59页
     ·温度对抗菌物质活性的影响第59-60页
     ·pH 对抗菌物质活性的影响第60-61页
     ·紫外照射对抗菌物质活性的影响第61-62页
     ·抑菌谱第62页
     ·抗菌物质对病原细菌MIC 和MBC第62-64页
4 讨论第64-67页
   ·关于a’311 菌株的鉴定第64页
   ·关于a’311 菌株的发酵第64-65页
   ·关于a’311 抗菌物的分离纯化第65页
   ·关于a’311 抗菌物质的性质研究第65-66页
   ·关于a’311 抗菌物质的结构解析第66页
   ·关于a’311 抗菌物质的应用第66-67页
5 结论第67-69页
参考文献第69-78页
附录第78-79页
致谢第79-80页
硕士期间发表的论文第80页

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