生物转化法生产β-丙氨酸的研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-16页 |
| 第一章 综述 | 第16-30页 |
| ·β-丙氨酸的理化性质 | 第16-17页 |
| ·β-丙氨酸在生物体内的主要合成代谢途径 | 第17-21页 |
| ·β-丙氨酸在不同生物中的代谢 | 第18-21页 |
| ·微生物体内的代谢 | 第18-20页 |
| ·动物体内的代谢 | 第20-21页 |
| ·植物体内的代谢 | 第21页 |
| ·β-丙氨酸的生理功能 | 第21-23页 |
| ·合成泛酸、肌肽等物质 | 第22页 |
| ·SNCD系统中一种有效的神经传递素 | 第22页 |
| ·N-β-丙氨酰多巴胺(NBAD)的前体 | 第22-23页 |
| ·神经传导抑制结构类似物 | 第23页 |
| ·β-丙氨酸的主要应用 | 第23-26页 |
| ·肌肽 | 第23-24页 |
| ·氟化甲基β-丙氨酸衍生物 | 第24页 |
| ·喜树碱β-丙氨酸酯 | 第24页 |
| ·聚β-丙氨酸 | 第24-25页 |
| ·泛酸钙的合成 | 第25页 |
| ·人工合成糖配基库 | 第25页 |
| ·β-丙氨酸金属配合物 | 第25-26页 |
| ·β-丙氨酸的生产 | 第26-28页 |
| ·丙烯腈法 | 第26页 |
| ·β-氨基丙腈法 | 第26-27页 |
| ·琥珀酰亚胺(丁二酰亚胺)降解法 | 第27页 |
| ·丙烯酸法 | 第27-28页 |
| ·选题背景和意义 | 第28-30页 |
| 第二章 分析方法的建立 | 第30-43页 |
| ·材料与方法 | 第30-34页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·仪器设备 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-34页 |
| ·纸层析法定性分析产物β-丙氨酸 | 第31页 |
| ·酸性高锰酸钾滴定法定量分析底物丙烯酸 | 第31-32页 |
| ·HPLC-ELSD法测定β-丙氨酸 | 第32-33页 |
| ·离子交换法样品预处理 | 第33-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-40页 |
| ·纸层析法定性分析产物β-丙氨酸 | 第34-35页 |
| ·酸性高锰酸钾滴定法定量分析底物丙烯酸 | 第35-36页 |
| ·0.1mol／L高锰酸钾溶液的配制及标定 | 第35-36页 |
| ·高锰酸钾滴定标准曲线 | 第36页 |
| ·HPLC-ELSD法测定β-丙氨酸 | 第36-40页 |
| ·标样β-丙氨酸测定 | 第36-37页 |
| ·流动相的选择 | 第37页 |
| ·HPLC-ELSD测定β-丙氨酸的标准曲线 | 第37-39页 |
| ·HPLC-ELSD测定β-丙氨酸的回收率 | 第39页 |
| ·样品预处理中β-丙氨酸的回收率 | 第39-40页 |
| ·β-丙氨酸转化率计算方法 | 第40页 |
| ·本章小结 | 第40-43页 |
| ·纸层析法定性分析产物β-丙氨酸 | 第40-41页 |
| ·酸性高锰酸钾滴定法定量分析底物丙烯酸 | 第41页 |
| ·高效液相色谱法测定β-丙氨酸 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第三章 菌种选育 | 第43-53页 |
| ·材料与方法 | 第43-47页 |
| ·菌种来源 | 第43页 |
| ·土壤来源 | 第43页 |
| ·培养基及培养条件 | 第43-45页 |
| ·土壤筛选培养液 | 第43页 |
| ·斜面培养基及培养条件 | 第43-44页 |
| ·平板筛选培养基及培养条件 | 第44页 |
| ·摇瓶培养基及培养条件 | 第44-45页 |
| ·转化液配制 | 第45页 |
| ·主要材料 | 第45页 |
| ·主要仪器设备 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-47页 |
| ·耐丙烯酸菌株的富集方法 | 第46页 |
| ·耐丙烯酸菌株的筛选 | 第46页 |
| ·转化方法 | 第46页 |
| ·耐丙烯酸菌株产物的检测 | 第46-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-50页 |
| ·耐丙烯酸菌株的富集 | 第47-48页 |
| ·耐丙烯酸菌株的筛选 | 第48-49页 |
| ·最佳菌株的确定 | 第49-50页 |
| ·本章小结 | 第50-53页 |
| 第四章 菌种诱变选育 | 第53-64页 |
| ·材料与方法 | 第53-56页 |
| ·菌种来源 | 第53页 |
| ·培养基及培养条件 | 第53-54页 |
| ·斜面培养基及培养条件 | 第53页 |
| ·平板筛选培养基及培养条件 | 第53页 |
| ·发酵残液培养基及培养条件 | 第53页 |
| ·摇瓶培养基及培养条件 | 第53-54页 |
| ·转化液配制 | 第54页 |
| ·主要材料 | 第54页 |
| ·主要仪器设备 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| ·菌种活化 | 第54页 |
| ·出发菌的耐丙烯酸检测 | 第54页 |
| ·相对酶活的测定 | 第54-55页 |
| ·诱变处理 | 第55页 |
| ·~(60)Coγ射线诱变 | 第55页 |
| ·紫外线诱变 | 第55页 |
| ·耐丙烯酸突变株的筛选 | 第55页 |
| ·突变株的稳定性考察 | 第55-56页 |
| ·分析方法 | 第56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-62页 |
| ·出发菌耐丙烯酸的能力 | 第56页 |
| ·酶活计算 | 第56-57页 |
| ·诱变处理结果 | 第57-62页 |
| ·~(60)Coγ射线诱变处理 | 第57-60页 |
| ·紫外线诱变结果 | 第60-62页 |
| ·突变株稳定性研究 | 第62页 |
| ·本章小结 | 第62-64页 |
| 第五章 酶合成条件的优化 | 第64-79页 |
| ·材料与方法 | 第64-67页 |
| ·菌种来源 | 第64页 |
| ·斜面培养基及培养条件 | 第64页 |
| ·摇瓶培养基及培养条件 | 第64页 |
| ·转化液配制 | 第64页 |
| ·主要材料 | 第64页 |
| ·主要仪器设备 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-67页 |
| ·摇瓶发酵工艺的确定 | 第65-66页 |
| ·发酵培养基的优化 | 第66-67页 |
| ·结果与讨论 | 第67-78页 |
| ·摇瓶发酵工艺的优化 | 第67-71页 |
| ·生长曲线的绘制 | 第67-68页 |
| ·生长周期对产酶的影响 | 第68页 |
| ·转速对产酶的影响 | 第68-69页 |
| ·温度对发酵的影响 | 第69页 |
| ·底物丙烯酸对产酶影响 | 第69-71页 |
| ·发酵培养基的优化 | 第71-78页 |
| ·单因素实验 | 第71-74页 |
| ·碳源研究结果 | 第71-72页 |
| ·氮源研究结果 | 第72-73页 |
| ·无机盐实验 | 第73-74页 |
| ·正交实验 | 第74-77页 |
| ·最佳发酵条件优化组合的验证 | 第77-78页 |
| ·本章小结 | 第78-79页 |
| 第六章 转化酶促反应的初步研究 | 第79-94页 |
| ·材料与方法 | 第79-83页 |
| ·菌种来源 | 第79页 |
| ·斜面培养基及培养条件 | 第79页 |
| ·摇瓶培养基及培养条件 | 第79页 |
| ·一级种子培养基及培养条件 | 第79页 |
| ·二级发酵培养基及培养条件 | 第79页 |
| ·粗转化液配制 | 第79页 |
| ·主要材料 | 第79-80页 |
| ·主要仪器设备 | 第80页 |
| ·方法 | 第80-83页 |
| ·酶促转化反应的确定 | 第80页 |
| ·细胞破壁对酶活性的影响 | 第80页 |
| ·加酶量对转化反应的影响 | 第80-81页 |
| ·丙烯酸浓度对转化反应的影响 | 第81页 |
| ·氨水调不同pH值对转化反应的影响 | 第81页 |
| ·不同丙烯酸盐对转化反应的影响 | 第81-82页 |
| ·温度对转化反应的影响 | 第82页 |
| ·转化时间对转化反应得影响 | 第82页 |
| ·金属离子对转化反应的影响 | 第82页 |
| ·转化体系对转化反应的影响 | 第82页 |
| ·转化液自发反应产生β-丙氨酸的测定 | 第82-83页 |
| ·实验结果 | 第83-92页 |
| ·酶促转化反应的确定 | 第83页 |
| ·细胞破壁对产酶的影响 | 第83-84页 |
| ·加酶量对转化反应的影响 | 第84-85页 |
| ·丙烯酸浓度对转化率的影响 | 第85页 |
| ·不同pH值对转化反应的影响 | 第85-86页 |
| ·不同丙烯酸盐对转化反应的影响 | 第86-88页 |
| ·温度对转化反应的影响 | 第88页 |
| ·转化时间对转化反应的影响 | 第88-89页 |
| ·在转化液中添加不同的离子种类对转化率的影响 | 第89-90页 |
| ·不同底物添加剂对转化反应的影响 | 第90-91页 |
| ·转化液自发反应产生β-丙氨酸的测定 | 第91-92页 |
| ·转化条件的优化 | 第92页 |
| ·本章小结 | 第92-94页 |
| 第七章 固定化β-丙氨酸加氨酶的初步研究 | 第94-102页 |
| ·材料与方法 | 第94-96页 |
| ·菌种来源 | 第94页 |
| ·斜面培养基及培养条件 | 第94页 |
| ·摇瓶培养基及培养条件 | 第94页 |
| ·一级种子培养基及培养条件 | 第94页 |
| ·二级发酵培养基及培养条件 | 第94页 |
| ·转化液配制 | 第94-95页 |
| ·主要材料 | 第95页 |
| ·主要仪器设备 | 第95页 |
| ·方法 | 第95-96页 |
| ·酶液的置备 | 第95页 |
| ·固定化方法的确定 | 第95-96页 |
| ·以壳聚糖为载体的酶固定化方法优化 | 第96页 |
| ·结果与分析 | 第96-100页 |
| ·固定化方法的选择 | 第96-98页 |
| ·戊二醛质量浓度的确定 | 第98页 |
| ·最优化的固定化条件的确定 | 第98-100页 |
| ·本章小结 | 第100-102页 |
| 第八章 展望 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 攻读学位论文期间发表的学术论文目录 | 第111页 |
