| 第一章 文献综述 | 第1-18页 |
| 1．1 机理Ⅰ植物的分子生物学机理研究 | 第11-12页 |
| 1．2 机理Ⅱ植物的分子生物学机理研究 | 第12页 |
| 1．3 编码参与烟酰胺和铁载体生成的酶的基因 | 第12-13页 |
| 1．4 调控基因 | 第13-14页 |
| 1．5 其他基因 | 第14页 |
| 1．6 参与铁吸收的调节机制 | 第14-15页 |
| 1．7 植物中可能存在的机理Ⅲ | 第15-16页 |
| 1．8 意义及目的 | 第16-18页 |
| 第二章 Mb.nramp1基因克隆及序列分析 | 第18-27页 |
| 2．1 试验材料 | 第18页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第18页 |
| 2．1．2 菌株，载体与试剂 | 第18页 |
| 2．2 试验方法 | 第18-21页 |
| 2．2．1 总RNA的提取 | 第18页 |
| 2．2．2 第一链cDNA的制备 | 第18页 |
| 2．2．3 引物设计与目的片段扩增 | 第18-20页 |
| 2．2．4 目的片断克隆 | 第20页 |
| 2．2．5 Mb nramp1基因全长序列分析 | 第20-21页 |
| 2．3 结果与分析 | 第21-27页 |
| 2．3．1 总RNA的提取与cDNA第一链的合成 | 第21页 |
| 2．3．2 Mb nrampl基因cDNA特异片段的扩增、克隆与测序 | 第21-23页 |
| 2．3．3 3′-RACE与5′-RACE及其产物克隆、酶切鉴定和序列分析 | 第23-24页 |
| 2．4．4 全长序列的拼读，克隆与测序 | 第24-25页 |
| 2．4．5 序列比对与进化树分析 | 第25-27页 |
| 第三章 Mb.nramp1在山定子中的杂交分析 | 第27-31页 |
| 3．1 植物材料 | 第27页 |
| 3．2 所用试剂 | 第27页 |
| 3．3 试验方法 | 第27-29页 |
| 3．3．1 Southern杂交 | 第27-28页 |
| 3．3．2 Northern杂交 | 第28-29页 |
| 3．4 试验结果 | 第29-31页 |
| 3．5．1 Southern杂交 | 第29页 |
| 3．5．2 Mb.nramp1的时空表达分析 | 第29-31页 |
| 第四章 异源互补法鉴定Mb.nramp1基因的功能 | 第31-36页 |
| 4．1 试验材料 | 第31页 |
| 4．1．1 菌株，质粒 | 第31页 |
| 4．1．2 引物设计 | 第31页 |
| 4．1．3 酵母生长培养基 | 第31页 |
| 4．1．4 酵母转化试剂盒 | 第31页 |
| 4．2 试验方法 | 第31-33页 |
| 4．2．1 酵母表达载体地构建 | 第31-32页 |
| 4．2．2 酵母转化 | 第32-33页 |
| 4．3 结果与分析 | 第33-36页 |
| 4．3．1 重组质粒的酶切鉴定 | 第33-34页 |
| 4．3．2 异源互补法验证Mb.nramp1的功能 | 第34-36页 |
| 第五章 Mb.nramp1在酵母中的亚细胞定位 | 第36-43页 |
| 5．1 试验材料 | 第36-37页 |
| 5．1．1 菌株、质粒 | 第36页 |
| 5．1．2 培养基 | 第36页 |
| 5．1．3 引物设计 | 第36页 |
| 5．1．4 酶与试剂盒 | 第36-37页 |
| 5．2 试验方法 | 第37-38页 |
| 5．2．1 载体构建 | 第37-38页 |
| 5．2．2 酵母转化与显微镜观察 | 第38页 |
| 5．3 结果与分析 | 第38-43页 |
| 5．3．1 酵母表达载体的构建 | 第38-40页 |
| 5．3．2 亚细胞定位 | 第40-43页 |
| 第六章 讨论 | 第43-48页 |
| 6．1 苹果中Nramp1基因克隆策略 | 第43页 |
| 6．2 Mb.nramp1参与了苹果体内对缺铁胁迫信号的应答机制 | 第43-44页 |
| 6．3 异源互补法研究Mb.nramp1基因的功能 | 第44-45页 |
| 6．4 利用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)对Mb.Nramp1基因亚细胞定位 | 第45-47页 |
| 6．5 植物吸收铁机理Ⅲ-吞噬机理模型的初步设想 | 第47-48页 |
| 第七章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 个人简历 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-61页 |
| 1 Mb.nramp1基因全长测序结果 | 第56-58页 |
| 2 EGFP基因ORF测序结果 | 第58-59页 |
| 3 Mb.nramp1 ORF酶切位点分析 | 第59-60页 |
| 4．EGFP ORF酶切位点分析 | 第60-61页 |
| 5．酵母表达载体pGBKT7 | 第61页 |
| 6．植物表达载体pBI121 | 第61页 |
