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禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)致病力鉴定、毒素检测及其分子生物学研究

缩略词表第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-12页
1 文献综述第12-28页
 1.1 禾谷镰刀菌特征与类型第13页
 1.2 禾谷镰刀菌致病力鉴定第13-15页
 1.3 禾谷镰刀菌遗传与分子生物学研究第15-17页
 1.4 禾谷镰刀菌毒素第17-25页
  1.4.1 禾谷镰刀菌毒素类型与形成条件第17-19页
  1.4.2 禾谷镰刀菌毒素的分离与检测第19-20页
   1.4.2.1 生物测定法第19页
   1.4.2.2 化学和免疫化学测定法第19-20页
  1.4.3 禾谷镰刀菌毒素脱毒方法第20页
  1.4.4 禾谷镰刀菌毒素与病菌致病力的相关性第20-21页
  1.4.5 禾谷镰刀菌毒素分子生物学研究第21-25页
 1.5 禾谷镰刀菌-小麦互作第25-28页
  1.5.1 抗赤霉病种质筛选与鉴定第25页
  1.5.2 赤霉病新抗源的开拓与利用第25-26页
  1.5.3 抗赤霉病性遗传分析第26页
  1.5.4 抗赤霉病育种第26-28页
2 研究目的第28-29页
3 材料与方法第29-46页
 3.1 材料第29-36页
  3.1.1 禾谷镰刀菌菌株第29-35页
  3.1.2 小麦品种第35页
  3.1.3 培养基第35-36页
 3.2 方法第36-46页
  3.2.1 禾谷镰刀菌的分离与纯化第36页
  3.2.2 SCAR分子标记鉴定第36页
  3.2.3 分生孢子悬浮液的制备和保存第36-37页
  3.2.4 田间花期接种第37页
   3.2.4.1 接种方法第37页
   3.2.4.2 田间致病力测定方法第37页
  3.2.5 室内离体水培单花注射接种第37页
   3.2.5.1 麦穗采集与接种第37页
   3.2.5.2 病情调查与分析第37页
  3.2.6 室内胚芽鞘接种第37-39页
   3.2.6.1 种子处理和发芽第37-38页
   3.2.6.2 胚芽鞘接种第38页
   3.2.6.3 病症及鉴定第38页
   3.2.6.4 胚芽鞘接种后的 PCR验证第38-39页
    3.2.6.4.1 菌丝 DNA提取第38页
    3.2.6.4.2 植物 DNA提取第38页
    3.2.6.4.3 PCR反应第38-39页
  3.2.7 菌株致病力类型划分与数据统计分析第39页
  3.2.8 禾谷镰刀菌毒素检测第39-42页
   3.2.8.1 HPLC检测第39-40页
    3.2.8.1.1 麦粒毒素检测第39-40页
    3.2.8.1.2 培养基毒素检测第40页
    3.2.8.1.3 HPLC检测参数第40页
   3.2.8.2 分子检测第40-42页
    3.2.8.2.1 菌株收集及菌丝 DNA抽提第40-41页
    3.2.8.2.2 籽粒收集及 DNA抽提第41页
    3.2.8.2.3 引物设计第41页
    3.2.8.2.4 特异性 PCR检测第41-42页
    3.2.8.2.5 PCR产物序列测定第42页
  3.2.9 禾谷镰刀菌有性杂交与分析第42-46页
   3.2.9.1 有性世代培养方法第42页
   3.2.9.2 子代分离群体的构建第42页
   3.2.9.3 扩增片段长度多态性(AFLP)第42-46页
    3.2.9.3.1 子代菌株菌丝 DNA抽提第42-43页
    3.2.9.3.2 AFLP检测第43-46页
     3.2.9.3 2.1 DNA消化/连接第43-44页
     3.2.9.3.2.2 AFLP引物设计第44页
     3.2.9.3.2.3 非选择性预扩增第44页
     3.2.9.3.2.4 EcoRI引物的标记第44-45页
     3.2.9.3.2.5 选择性扩增第45页
     3.2.9.3.2.6 电泳检测第45页
     3.2.9.3.2.7 放射自显影第45页
     3.2.9.3.2.8 AFLP谱带聚类分析第45-46页
4 结果与分析第46-78页
 4.1 禾谷镰刀菌的形态和分子鉴定第46-47页
 4.2 中国禾谷镰刀菌致病力鉴定第47-50页
 4.3 中国和国外禾谷镰刀菌致病力比较第50-54页
 4.4 小麦胚芽鞘接种鉴定禾谷镰刀菌致病力第54-62页
  4.4.1 小麦抗赤霉病性中的成株期抗性第56-57页
  4.4.2 小麦品种安农8455胚芽鞘接种鉴定不同菌株致病力第57-60页
  4.4.3 胚芽鞘与花期接种鉴定病菌致病力的比较第60-62页
 4.5 中、欧不同小麦鉴别寄主花期接种分析第62-64页
 4.6 禾谷镰刀菌毒素检测与鉴定第64-75页
  4.6.1 HPLC法检测毒素 DON第64-68页
  4.6.2 PCR检测禾谷镰刀菌毒素 DON和NIV第68-69页
  4.6.3 我国禾谷镰刀菌产生毒素的类型与分布第69-73页
  4.6.4 PCR检测小麦和玉米籽粒中的赤霉菌毒索 DON和NIV第73-75页
 4.7 中国禾谷镰刀菌代表性菌株的特点与分析第75-76页
 4.8 禾谷镰刀菌杂交子代分析第76-78页
5 讨论第78-83页
 5.1 禾谷镰刀菌的形态和分子鉴定第78页
 5.2 禾谷镰刀菌致病力鉴定第78-79页
 5.3 一套中国禾谷镰刀菌菌株特点与应用第79-80页
 5.4 小麦抗赤霉病性中的成株期抗性第80页
 5.5 禾谷镰刀菌毒素检测第80-81页
 5.6 禾谷镰刀菌有性杂交与分析第81-83页
6 参考文献第83-95页
致谢第95-96页
附录I 攻读博士学位期间发表文章、专利申请和会议论文摘要第96页

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