缩略词表 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
1 文献综述 | 第12-28页 |
1.1 禾谷镰刀菌特征与类型 | 第13页 |
1.2 禾谷镰刀菌致病力鉴定 | 第13-15页 |
1.3 禾谷镰刀菌遗传与分子生物学研究 | 第15-17页 |
1.4 禾谷镰刀菌毒素 | 第17-25页 |
1.4.1 禾谷镰刀菌毒素类型与形成条件 | 第17-19页 |
1.4.2 禾谷镰刀菌毒素的分离与检测 | 第19-20页 |
1.4.2.1 生物测定法 | 第19页 |
1.4.2.2 化学和免疫化学测定法 | 第19-20页 |
1.4.3 禾谷镰刀菌毒素脱毒方法 | 第20页 |
1.4.4 禾谷镰刀菌毒素与病菌致病力的相关性 | 第20-21页 |
1.4.5 禾谷镰刀菌毒素分子生物学研究 | 第21-25页 |
1.5 禾谷镰刀菌-小麦互作 | 第25-28页 |
1.5.1 抗赤霉病种质筛选与鉴定 | 第25页 |
1.5.2 赤霉病新抗源的开拓与利用 | 第25-26页 |
1.5.3 抗赤霉病性遗传分析 | 第26页 |
1.5.4 抗赤霉病育种 | 第26-28页 |
2 研究目的 | 第28-29页 |
3 材料与方法 | 第29-46页 |
3.1 材料 | 第29-36页 |
3.1.1 禾谷镰刀菌菌株 | 第29-35页 |
3.1.2 小麦品种 | 第35页 |
3.1.3 培养基 | 第35-36页 |
3.2 方法 | 第36-46页 |
3.2.1 禾谷镰刀菌的分离与纯化 | 第36页 |
3.2.2 SCAR分子标记鉴定 | 第36页 |
3.2.3 分生孢子悬浮液的制备和保存 | 第36-37页 |
3.2.4 田间花期接种 | 第37页 |
3.2.4.1 接种方法 | 第37页 |
3.2.4.2 田间致病力测定方法 | 第37页 |
3.2.5 室内离体水培单花注射接种 | 第37页 |
3.2.5.1 麦穗采集与接种 | 第37页 |
3.2.5.2 病情调查与分析 | 第37页 |
3.2.6 室内胚芽鞘接种 | 第37-39页 |
3.2.6.1 种子处理和发芽 | 第37-38页 |
3.2.6.2 胚芽鞘接种 | 第38页 |
3.2.6.3 病症及鉴定 | 第38页 |
3.2.6.4 胚芽鞘接种后的 PCR验证 | 第38-39页 |
3.2.6.4.1 菌丝 DNA提取 | 第38页 |
3.2.6.4.2 植物 DNA提取 | 第38页 |
3.2.6.4.3 PCR反应 | 第38-39页 |
3.2.7 菌株致病力类型划分与数据统计分析 | 第39页 |
3.2.8 禾谷镰刀菌毒素检测 | 第39-42页 |
3.2.8.1 HPLC检测 | 第39-40页 |
3.2.8.1.1 麦粒毒素检测 | 第39-40页 |
3.2.8.1.2 培养基毒素检测 | 第40页 |
3.2.8.1.3 HPLC检测参数 | 第40页 |
3.2.8.2 分子检测 | 第40-42页 |
3.2.8.2.1 菌株收集及菌丝 DNA抽提 | 第40-41页 |
3.2.8.2.2 籽粒收集及 DNA抽提 | 第41页 |
3.2.8.2.3 引物设计 | 第41页 |
3.2.8.2.4 特异性 PCR检测 | 第41-42页 |
3.2.8.2.5 PCR产物序列测定 | 第42页 |
3.2.9 禾谷镰刀菌有性杂交与分析 | 第42-46页 |
3.2.9.1 有性世代培养方法 | 第42页 |
3.2.9.2 子代分离群体的构建 | 第42页 |
3.2.9.3 扩增片段长度多态性(AFLP) | 第42-46页 |
3.2.9.3.1 子代菌株菌丝 DNA抽提 | 第42-43页 |
3.2.9.3.2 AFLP检测 | 第43-46页 |
3.2.9.3 2.1 DNA消化/连接 | 第43-44页 |
3.2.9.3.2.2 AFLP引物设计 | 第44页 |
3.2.9.3.2.3 非选择性预扩增 | 第44页 |
3.2.9.3.2.4 EcoRI引物的标记 | 第44-45页 |
3.2.9.3.2.5 选择性扩增 | 第45页 |
3.2.9.3.2.6 电泳检测 | 第45页 |
3.2.9.3.2.7 放射自显影 | 第45页 |
3.2.9.3.2.8 AFLP谱带聚类分析 | 第45-46页 |
4 结果与分析 | 第46-78页 |
4.1 禾谷镰刀菌的形态和分子鉴定 | 第46-47页 |
4.2 中国禾谷镰刀菌致病力鉴定 | 第47-50页 |
4.3 中国和国外禾谷镰刀菌致病力比较 | 第50-54页 |
4.4 小麦胚芽鞘接种鉴定禾谷镰刀菌致病力 | 第54-62页 |
4.4.1 小麦抗赤霉病性中的成株期抗性 | 第56-57页 |
4.4.2 小麦品种安农8455胚芽鞘接种鉴定不同菌株致病力 | 第57-60页 |
4.4.3 胚芽鞘与花期接种鉴定病菌致病力的比较 | 第60-62页 |
4.5 中、欧不同小麦鉴别寄主花期接种分析 | 第62-64页 |
4.6 禾谷镰刀菌毒素检测与鉴定 | 第64-75页 |
4.6.1 HPLC法检测毒素 DON | 第64-68页 |
4.6.2 PCR检测禾谷镰刀菌毒素 DON和NIV | 第68-69页 |
4.6.3 我国禾谷镰刀菌产生毒素的类型与分布 | 第69-73页 |
4.6.4 PCR检测小麦和玉米籽粒中的赤霉菌毒索 DON和NIV | 第73-75页 |
4.7 中国禾谷镰刀菌代表性菌株的特点与分析 | 第75-76页 |
4.8 禾谷镰刀菌杂交子代分析 | 第76-78页 |
5 讨论 | 第78-83页 |
5.1 禾谷镰刀菌的形态和分子鉴定 | 第78页 |
5.2 禾谷镰刀菌致病力鉴定 | 第78-79页 |
5.3 一套中国禾谷镰刀菌菌株特点与应用 | 第79-80页 |
5.4 小麦抗赤霉病性中的成株期抗性 | 第80页 |
5.5 禾谷镰刀菌毒素检测 | 第80-81页 |
5.6 禾谷镰刀菌有性杂交与分析 | 第81-83页 |
6 参考文献 | 第83-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
附录I 攻读博士学位期间发表文章、专利申请和会议论文摘要 | 第96页 |