摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
1 前言与综述 | 第9-18页 |
·研究的目的及意义 | 第9-11页 |
·植物应答非生物胁迫研究的意义 | 第9页 |
·盐芥耐盐机理研究的意义 | 第9页 |
·GPXs基因克隆及表达分析研究的意义 | 第9-11页 |
·国内外研究进展 | 第11-17页 |
·盐芥基因克隆方面的研究进展 | 第11-12页 |
·植物GPXs的克隆和生理活性研究进展 | 第12页 |
·植物GPXs结构 | 第12-14页 |
·GPXs的亚细胞定位研究 | 第14-15页 |
·植物GPXs基因的表达与抗逆性 | 第15-16页 |
·GPXs的功能研究 | 第16-17页 |
·科学问题的提出和实验设计 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-33页 |
·实验材料 | 第18-19页 |
·植物材料 | 第18页 |
·各种酶及试剂 | 第18页 |
·常用培养基和溶液的配制 | 第18-19页 |
·主要仪器和常用生物信息学软件 | 第19页 |
·基因克隆 | 第19-26页 |
·盐芥编码GPXs基因的EST的搜索和比对分析 | 第19页 |
·Trizol法提取总RNA | 第19-20页 |
·总RNA质量检测 | 第20页 |
·3'-RACE实验 | 第20-24页 |
·cDNA第一链的合成 | 第24-25页 |
·cDNA质量检测 | 第25页 |
·基因全长序列的获得 | 第25-26页 |
·盐芥ThGPXs的生物信息学分析 | 第26-27页 |
·盐芥ThGPXs的核苷酸和推测的氨基酸序列特征分析 | 第26页 |
·基因组序列分析 | 第26页 |
·推测的氨基酸序列的高级结构预测分析 | 第26-27页 |
·盐芥ThGPXs的其他结构预测 | 第27页 |
·系统进化树分析 | 第27页 |
·盐芥ThGPXs的表达模式分析 | 第27-29页 |
·植物材料处理方法 | 第27页 |
·样品总RNA的提取 | 第27-28页 |
·RNA、cDNA质量检测 | 第28页 |
·实时荧光定量PCR(quantitation real time PCR,qRT-PCR) | 第28-29页 |
·盐芥ThGPX6的亚细胞定位 | 第29-33页 |
·ThGPX6::GFP表达载体的构建 | 第29-31页 |
·基因枪法转化洋葱表皮细胞 | 第31-33页 |
3 结果与分析 | 第33-57页 |
·盐芥ThGPXs的克隆 | 第33-34页 |
·盐芥ThGPXs的EST序列搜索结果与分析 | 第33页 |
·3'-RACE实验结果 | 第33页 |
·基因全长序列的扩增 | 第33-34页 |
·盐芥ThGPXs的生物信息学分析 | 第34-49页 |
·盐芥ThGPXs的核苷酸和推测的氨基酸序列分析 | 第34-41页 |
·基因组水平分析 | 第41-43页 |
·盐芥ThGPXs推测的氨基酸序列的高级结构预测分析 | 第43-45页 |
·ThGPXs的其他结构预测 | 第45-48页 |
·系统进化树分析 | 第48-49页 |
·盐芥ThGPXs的表达分析 | 第49-55页 |
·不同处理下样品的总RNA提取以及cDNA质量的检测 | 第49-51页 |
·荧光定量PCR引物的筛选 | 第51页 |
·胁迫下的ThGPXs的荧光定量PCR表达分析 | 第51-55页 |
·ThGPX6的亚细胞定位 | 第55-57页 |
·ThGPX6::GFP表达载体构建 | 第55-56页 |
·ThGPX6的亚细胞定位 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-65页 |
·盐芥ThGPXs基因的克隆 | 第57-58页 |
·盐芥ThGPXs的生物信息学分析 | 第58-60页 |
·ThGPXs基因的表达模式 | 第60-63页 |
·ThGPX6的亚细胞定位 | 第63页 |
·问题与展望 | 第63-65页 |
全文结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第73-74页 |
攻读学位期间参与的科研课题 | 第74-75页 |
缩略词 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |