柑桔裂皮类病毒快速检测技术的研究及湖北分离物的克隆
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-20页 |
| ·植物病原类病毒研究进展 | 第9-15页 |
| ·概述 | 第9-10页 |
| ·分类 | 第10-11页 |
| ·复制 | 第11-13页 |
| ·致病机理 | 第13-14页 |
| ·起源与进化 | 第14-15页 |
| ·发展趋势 | 第15页 |
| ·柑桔裂皮类病毒研究进展 | 第15-20页 |
| ·概述 | 第15-16页 |
| ·症状及分布危害 | 第16页 |
| ·株系分化 | 第16-17页 |
| ·致病性 | 第17-18页 |
| ·检测方法 | 第18-19页 |
| ·防治措施 | 第19-20页 |
| 2 研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 3 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·材料 | 第21-24页 |
| ·质粒、菌株、样品 | 第21页 |
| ·酶及主要试剂 | 第21-23页 |
| ·抗生素及培养基的配制 | 第23页 |
| ·质粒提取液 | 第23页 |
| ·PAGE的相关试剂 | 第23页 |
| ·核酸杂交的相关试剂 | 第23-24页 |
| ·其它溶液 | 第24页 |
| ·RT-PCR引物的设计及合成 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-31页 |
| ·CEVd RNA的提取 | 第24-25页 |
| ·聚丙烯酰胺双向凝胶电泳 | 第25-26页 |
| ·聚丙烯酰胺垂直双向凝胶电泳 | 第25-26页 |
| ·聚丙烯酰胺往复式双向凝胶电泳 | 第26页 |
| ·CEVd的RT-PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·反转录合成第一链cDNA | 第26-27页 |
| ·PCR扩增 | 第27页 |
| ·核酸杂交检测CEVd RNA | 第27-28页 |
| ·核酸探针的标记 | 第27-28页 |
| ·核酸杂交 | 第28页 |
| ·杂交结果的检测 | 第28页 |
| ·DNA片段的回收与纯化 | 第28-29页 |
| ·转化载体的构建 | 第29页 |
| ·大肠杆菌DH_(5α)感受态细胞的制备及转化 | 第29页 |
| ·电击转化大肠杆菌 | 第29-30页 |
| ·质粒DNA的制备和纯化 | 第30页 |
| ·CEVd的生物学性状观察 | 第30-31页 |
| 4 结果 | 第31-41页 |
| ·CEVd快速检测体系的建立 | 第31-34页 |
| ·聚丙烯酰胺双向凝胶电泳检测CEVd | 第31页 |
| ·RT-PCR检测CEVd | 第31-33页 |
| ·核酸杂交检测CEVd | 第33-34页 |
| ·生物素探针的标记 | 第33页 |
| ·斑点杂交和组织印迹杂交检测CEVd | 第33-34页 |
| ·CEVd湖北分离株克隆与测序 | 第34-41页 |
| ·感染CEVd柑桔样品的收集与鉴定 | 第34-37页 |
| ·CEVd-HB株的序列分析 | 第37-41页 |
| 5 讨论 | 第41-44页 |
| ·CEVd核酸的制备对检测的影响 | 第41页 |
| ·CEVd的三种检测方法的特点 | 第41-42页 |
| ·CEVd-HB分离物特征 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
