| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstranct | 第4-9页 |
| 0 前言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-32页 |
| ·报告基因概述 | 第10-13页 |
| ·gus基因来源 | 第10-11页 |
| ·gus基因的酶学特性 | 第11-12页 |
| ·GUS活性测定 | 第12-13页 |
| ·花粉管通道途径进行基因转化的研究进展 | 第13-18页 |
| ·花粉管通道法提出的依据 | 第14-15页 |
| ·花粉管通道法转化的机理 | 第15-16页 |
| ·利用花粉管通道途径转基因的技术评价 | 第16-17页 |
| ·花粉管通道法对大豆基因转化的优越性 | 第17-18页 |
| ·花粉管通道法在转基因大豆中的应用 | 第18页 |
| ·T-DNA边界序列概述 | 第18-19页 |
| ·转基因植物中载体骨架序列的生物安全性研究 | 第19-26页 |
| ·载体骨架序列整合进植物染色体中 | 第19-21页 |
| ·载体骨架序列整合进植物染色体中可能存在的安全性隐患 | 第21页 |
| ·解决载体骨架序列的研究思路和方法 | 第21-23页 |
| ·基本元件转化植物的研究进展 | 第23-26页 |
| ·本课题的研究内容及意义 | 第26页 |
| 参考文献 | 第26-32页 |
| 2 花粉管通道法转化大豆的可行性研究 | 第32-50页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·材料和方法 | 第32-43页 |
| ·实验材料 | 第32-35页 |
| ·实验方法 | 第35-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-48页 |
| ·花粉管介导大豆基因转化的适宜时间及措施 | 第43页 |
| ·转化豆荚的形态特征观察 | 第43-44页 |
| ·T_1代转化植株的PCR检测 | 第44-45页 |
| ·T_1代转化植株的RT-PCR检测 | 第45-46页 |
| ·T_1代GUS组织化学染色 | 第46-47页 |
| ·T_1代转化植株的Southern杂交 | 第47页 |
| ·T_1代转化植株结果统计 | 第47-48页 |
| ·T_2代转化植株检测及结果统计 | 第48页 |
| ·小结 | 第48页 |
| 参考文献 | 第48-50页 |
| 3 gus基因线性化片段花粉管通道转化大豆的研究 | 第50-66页 |
| ·引言 | 第50页 |
| ·材料和方法 | 第50-54页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-64页 |
| ·基因转化元件的制备 | 第54页 |
| ·结实数统计 | 第54-55页 |
| ·T_1代转化大豆的检测 | 第55-59页 |
| ·T_2代转化植株的检测 | 第59-62页 |
| ·T_3代转化大豆的检测结果 | 第62-63页 |
| ·花粉管通道法转化大豆整合模式的分析 | 第63-64页 |
| ·小结 | 第64页 |
| 参考文献 | 第64-66页 |
| 4 共转化基因元件的构建 | 第66-79页 |
| ·引言 | 第66页 |
| ·实验材料 | 第66-67页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第66页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第66-67页 |
| ·引物的设计和合成 | 第67页 |
| ·实验方法 | 第67-72页 |
| ·酶切载体pZY102 | 第67页 |
| ·酶切目的产物的回收 | 第67-68页 |
| ·pUC118载体的制备 | 第68页 |
| ·pUC118载体与酶切目的片段的连接 | 第68-69页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第69-70页 |
| ·转化 | 第70页 |
| ·PCR检菌 | 第70页 |
| ·DNA测序 | 第70页 |
| ·bar基因的PCR扩增 | 第70-71页 |
| ·酶切bar基因片段和载体pUC118-gus | 第71-72页 |
| ·bar基因转化元件获得 | 第72页 |
| ·花粉管通道法共转化大豆 | 第72页 |
| ·结果与讨论 | 第72-77页 |
| ·bar基因转化元件的构建 | 第72-76页 |
| ·bar基因转化片段的获得 | 第76-77页 |
| ·花粉管通道共转化大豆 | 第77页 |
| ·小结 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-79页 |
| 5 结论与展望 | 第79-80页 |
| ·主要结论 | 第79页 |
| ·创新点 | 第79页 |
| ·有待进一步开展的工作 | 第79-80页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 附录 | 第82-90页 |