| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-6页 |
| 引言 | 第6-8页 |
| 第1章 材料 | 第8-12页 |
| ·菌株 | 第8页 |
| ·培养基 | 第8-9页 |
| ·酶 | 第9页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第9-11页 |
| ·实验设备及仪器 | 第11页 |
| ·分析软件及数据库 | 第11-12页 |
| 第2章 方法 | 第12-21页 |
| ·烟曲霉CreB蛋白序列分析 | 第12页 |
| ·泛素C末端水解酶creβ基因缺失片段的构建 | 第12-17页 |
| ·烟曲霉基因组DNA的提取 | 第12-13页 |
| ·引物设计 | 第13-14页 |
| ·creB基因缺失片段的构建 | 第14-17页 |
| ·烟曲霉WT原生质体制备和转化 | 第17-18页 |
| ·原生质体的制备 | 第17页 |
| ·原生质体的转化 | 第17-18页 |
| ·缺失菌株的初步筛选和鉴定 | 第18-20页 |
| ·潮霉素抗性初筛 | 第18页 |
| ·单孢分离 | 第18-19页 |
| ·缺失菌株的PCR筛选 | 第19-20页 |
| ·缺失菌株的表型观察 | 第20-21页 |
| 第3章 结果 | 第21-30页 |
| ·CreB蛋白去泛素化结构域比对 | 第21-22页 |
| ·creB基因缺失片段的获得 | 第22-25页 |
| ·烟曲霉基因组DNA的获得 | 第22-23页 |
| ·Split-Marker策略构建creB基因缺失片段 | 第23-25页 |
| ·原生质体转化及缺失菌株的筛选 | 第25-29页 |
| ·原生质体的转化 | 第25-26页 |
| ·缺失菌株的筛选 | 第26-28页 |
| ·测序鉴定 | 第28-29页 |
| ·ΔcreB的钼酸盐抗性 | 第29-30页 |
| 第4章 讨论 | 第30-33页 |
| ·关于快速构建重组DNA片段 | 第30页 |
| ·关于直接进行原生质体转化的可行性 | 第30-31页 |
| ·关于烟曲霉去泛素化末端水解酶CreB的功能 | 第31页 |
| ·关于烟曲霉致病性的探讨 | 第31-33页 |
| 结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-36页 |
| 综述 | 第36-48页 |
| 综述参考文献 | 第45-48页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第48-49页 |
| 附录 | 第49-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |