第一章 鸡传染性支气管炎研究进展 | 第1-16页 |
·历史 | 第9页 |
·病原学研究 | 第9-11页 |
·IBV的分类及形态特征 | 第9-10页 |
·IBV的一般生物学特征 | 第10-11页 |
·IBV的流行病学、临床症状和病理变化 | 第11-12页 |
·流行病学 | 第11页 |
·临床症状与病理变化 | 第11-12页 |
·IBV的诊断 | 第12-14页 |
·病毒的分离鉴定 | 第12-13页 |
·病毒的血清学诊断 | 第13页 |
·病毒的分子生物学诊断 | 第13-14页 |
·IB的免疫预防 | 第14-16页 |
第二章 鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展 | 第16-30页 |
·IBV的基因结构 | 第16页 |
·IBV的繁殖(基因组RNA的复制、转录及病毒的装配、运输与出芽) | 第16-20页 |
·基因组RNA的复制与转录 | 第16-18页 |
·IBV病毒粒的装配、运输与出芽 | 第18-19页 |
·基因组RNA合成的酶学 | 第19-20页 |
·IBV基因组的编码蛋白 | 第20-23页 |
·非结构蛋白 | 第20-21页 |
·结构蛋白 | 第21-23页 |
·冠状病毒的遗传变异 | 第23-26页 |
·冠状病毒的变异机制 | 第23-24页 |
·冠状病毒的重组方式 | 第24-25页 |
·重组在冠状病毒进化中的作用 | 第25-26页 |
·IBV的分型 | 第26-28页 |
·免疫型(或保护型) | 第26页 |
·抗原分型 | 第26-27页 |
·基因分型 | 第27-28页 |
·冠状病毒基因组的研究及冠状病毒表达载体系统的构建 | 第28页 |
·基因工程疫苗 | 第28-30页 |
第三章 鸡传染性支气管炎病毒N基因及编码蛋白的分子生物学研究进展 | 第30-35页 |
·编码N蛋白的mRNA结构 | 第30页 |
·N蛋白与病毒的复制与组装 | 第30-31页 |
·N蛋白遗传变异 | 第31-32页 |
·N基因的免疫原性 | 第32-33页 |
·IBV抗原表位在N蛋白上的定位 | 第32页 |
·N蛋白与免疫 | 第32-33页 |
·N基因及其编码产物在诊断中的应用 | 第33-35页 |
·N基因在诊断中的应用 | 第33-34页 |
·N蛋白及其单抗在诊断中的应用 | 第34-35页 |
第四章 鸡传染性支气管炎国内分离株LX4 5a、5b和N基因的克隆与序列测定 | 第35-44页 |
·材料 | 第35-37页 |
·IBV毒株 | 第35-36页 |
·SPF鸡胚 | 第36页 |
·载体及受体菌 | 第36页 |
·其它生化试剂 | 第36页 |
·主要仪器 | 第36页 |
·引物 | 第36页 |
·工具酶与主要试剂 | 第36页 |
·参考毒株名称、GeneBank登录号/参考文献及致病型 | 第36-37页 |
·方法 | 第37-39页 |
·IBV的增殖与RNA的提取 | 第37页 |
·RT-PCR扩增5a、5b及N基因cDNA序列 | 第37页 |
·IBV国内分离株LX4 5a、5b及N基因的克隆鉴定 | 第37-39页 |
·序列的分析比较 | 第39页 |
·结果 | 第39-41页 |
·LX4 5a、5b及N基因cDNA序列的扩增与鉴定 | 第39页 |
·重组质粒的序列测定 | 第39页 |
·序列分析 | 第39-41页 |
·讨论 | 第41-44页 |
·有关5a、5b的序列比较及分析 | 第41页 |
·有关IBV mRNA5翻译机理的讨论 | 第41-42页 |
·有关N基因的序列比较及分析 | 第42页 |
·有关N基因编码蛋白的碱性氨基酸区的序列比较及分析 | 第42-44页 |
第五章 鸡传染性支气管炎病毒LX4株N基因在大肠杆菌中的表达及产物免疫活性的检测 | 第44-53页 |
·材料 | 第44-45页 |
·IBV LX4 N基因 | 第44页 |
·大肠杆菌原核表达载体pPROEX~(TM)HTa及受体菌 | 第44页 |
·毒株 | 第44页 |
·实验动物 | 第44页 |
·酶、试剂或试剂盒 | 第44-45页 |
·方法 | 第45-48页 |
·引物的设计与合成 | 第45页 |
·重组表达载体的构建(路线见附件) | 第45页 |
·IBV LX4在大肠杆菌的表达及鉴定 | 第45-46页 |
·重组IBV LX4 N蛋白的纯化与ELISA检测 | 第46-47页 |
·重组IBV LX4 N蛋白多克隆抗体的制备及与不同致病型IBV的反应性 | 第47-48页 |
·结果 | 第48-50页 |
·重组质粒rpPROEX~(TM)HTa-N的鉴定 | 第48-49页 |
·表达重组N基因融合蛋白的SDS-PAGE及Western blot | 第49页 |
·表达融合蛋白的纯化 | 第49页 |
·表达产物的ELISA检测结果(表Ⅰ) | 第49-50页 |
·重组蛋白的凝集效价与琼扩检测结果(表Ⅱ,图8) | 第50页 |
·讨论 | 第50-53页 |
·有关IBV LX4 N基因诱导表达的讨论 | 第50-51页 |
·有关重组N蛋白应用于诊断的可行性探讨 | 第51-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-63页 |
附件 | 第63-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
作者简介 | 第76页 |