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鸡传染性支气管炎病毒国内分离株LX4 5a、5b及N基因的研究

第一章 鸡传染性支气管炎研究进展第1-16页
   ·历史第9页
   ·病原学研究第9-11页
     ·IBV的分类及形态特征第9-10页
     ·IBV的一般生物学特征第10-11页
   ·IBV的流行病学、临床症状和病理变化第11-12页
     ·流行病学第11页
     ·临床症状与病理变化第11-12页
   ·IBV的诊断第12-14页
     ·病毒的分离鉴定第12-13页
     ·病毒的血清学诊断第13页
     ·病毒的分子生物学诊断第13-14页
   ·IB的免疫预防第14-16页
第二章 鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展第16-30页
   ·IBV的基因结构第16页
   ·IBV的繁殖(基因组RNA的复制、转录及病毒的装配、运输与出芽)第16-20页
     ·基因组RNA的复制与转录第16-18页
     ·IBV病毒粒的装配、运输与出芽第18-19页
     ·基因组RNA合成的酶学第19-20页
   ·IBV基因组的编码蛋白第20-23页
     ·非结构蛋白第20-21页
     ·结构蛋白第21-23页
   ·冠状病毒的遗传变异第23-26页
     ·冠状病毒的变异机制第23-24页
     ·冠状病毒的重组方式第24-25页
     ·重组在冠状病毒进化中的作用第25-26页
   ·IBV的分型第26-28页
     ·免疫型(或保护型)第26页
     ·抗原分型第26-27页
     ·基因分型第27-28页
   ·冠状病毒基因组的研究及冠状病毒表达载体系统的构建第28页
   ·基因工程疫苗第28-30页
第三章 鸡传染性支气管炎病毒N基因及编码蛋白的分子生物学研究进展第30-35页
   ·编码N蛋白的mRNA结构第30页
   ·N蛋白与病毒的复制与组装第30-31页
   ·N蛋白遗传变异第31-32页
   ·N基因的免疫原性第32-33页
     ·IBV抗原表位在N蛋白上的定位第32页
     ·N蛋白与免疫第32-33页
   ·N基因及其编码产物在诊断中的应用第33-35页
     ·N基因在诊断中的应用第33-34页
     ·N蛋白及其单抗在诊断中的应用第34-35页
第四章 鸡传染性支气管炎国内分离株LX4 5a、5b和N基因的克隆与序列测定第35-44页
   ·材料第35-37页
     ·IBV毒株第35-36页
     ·SPF鸡胚第36页
     ·载体及受体菌第36页
     ·其它生化试剂第36页
     ·主要仪器第36页
     ·引物第36页
     ·工具酶与主要试剂第36页
     ·参考毒株名称、GeneBank登录号/参考文献及致病型第36-37页
   ·方法第37-39页
     ·IBV的增殖与RNA的提取第37页
     ·RT-PCR扩增5a、5b及N基因cDNA序列第37页
     ·IBV国内分离株LX4 5a、5b及N基因的克隆鉴定第37-39页
     ·序列的分析比较第39页
   ·结果第39-41页
     ·LX4 5a、5b及N基因cDNA序列的扩增与鉴定第39页
     ·重组质粒的序列测定第39页
     ·序列分析第39-41页
   ·讨论第41-44页
     ·有关5a、5b的序列比较及分析第41页
     ·有关IBV mRNA5翻译机理的讨论第41-42页
     ·有关N基因的序列比较及分析第42页
     ·有关N基因编码蛋白的碱性氨基酸区的序列比较及分析第42-44页
第五章 鸡传染性支气管炎病毒LX4株N基因在大肠杆菌中的表达及产物免疫活性的检测第44-53页
   ·材料第44-45页
     ·IBV LX4 N基因第44页
     ·大肠杆菌原核表达载体pPROEX~(TM)HTa及受体菌第44页
     ·毒株第44页
     ·实验动物第44页
     ·酶、试剂或试剂盒第44-45页
   ·方法第45-48页
     ·引物的设计与合成第45页
     ·重组表达载体的构建(路线见附件)第45页
     ·IBV LX4在大肠杆菌的表达及鉴定第45-46页
     ·重组IBV LX4 N蛋白的纯化与ELISA检测第46-47页
     ·重组IBV LX4 N蛋白多克隆抗体的制备及与不同致病型IBV的反应性第47-48页
   ·结果第48-50页
     ·重组质粒rpPROEX~(TM)HTa-N的鉴定第48-49页
     ·表达重组N基因融合蛋白的SDS-PAGE及Western blot第49页
     ·表达融合蛋白的纯化第49页
     ·表达产物的ELISA检测结果(表Ⅰ)第49-50页
     ·重组蛋白的凝集效价与琼扩检测结果(表Ⅱ,图8)第50页
   ·讨论第50-53页
     ·有关IBV LX4 N基因诱导表达的讨论第50-51页
     ·有关重组N蛋白应用于诊断的可行性探讨第51-53页
结论第53-54页
参考文献第54-63页
附件第63-75页
致谢第75-76页
作者简介第76页

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